| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-16页 |
| ·脂肪酶概述 | 第9-12页 |
| ·脂肪酶的概念 | 第9页 |
| ·脂肪酶的来源 | 第9-10页 |
| ·痤疮丙酸杆菌脂肪酶 | 第10-12页 |
| ·脂肪酶的酶学性质及应用 | 第12-13页 |
| ·脂肪酶的酶学性质 | 第12页 |
| ·脂肪酶的应用 | 第12-13页 |
| ·脂肪酶的国内外研究进展 | 第13-14页 |
| ·国外研究进展 | 第13页 |
| ·国内研究进展 | 第13-14页 |
| ·研究意义与目的 | 第14页 |
| ·研究内容 | 第14-16页 |
| ·主要研究内容 | 第14-15页 |
| ·创新点 | 第15-16页 |
| 第二章 脂肪酶基因的克隆及克隆载体的构建 | 第16-31页 |
| ·实验材料 | 第16-17页 |
| ·仪器及药品 | 第16页 |
| ·质粒及菌株 | 第16页 |
| ·试剂及培养基 | 第16-17页 |
| ·实验内容 | 第17-21页 |
| ·引物的设计与合成 | 第17页 |
| ·liphy基因的PCR扩增与鉴定 | 第17-18页 |
| ·克隆载体pUCm-T-liphy的构建 | 第18-21页 |
| ·实验结果 | 第21-29页 |
| ·目的片段的PCR扩增 | 第21-22页 |
| ·克隆载体pUCm-T-liphy的鉴定 | 第22-29页 |
| ·结果讨论 | 第29-30页 |
| ·脂肪酶基因的克隆 | 第29页 |
| ·克隆载体pUCm-T-liphy的构建及测序 | 第29-30页 |
| ·小结 | 第30-31页 |
| 第三章 重组表达载体pET-15b-liphy的构建及重组酶表达 | 第31-43页 |
| ·实验材料 | 第31-33页 |
| ·仪器及药品 | 第31页 |
| ·质粒及菌株 | 第31页 |
| ·试剂及培养基 | 第31-33页 |
| ·实验内容 | 第33-37页 |
| ·重组表达载体pET-15b-liphy的构建 | 第33页 |
| ·重组表达载体pET-15b-liphy的转化及鉴定 | 第33-34页 |
| ·诱导表达重组脂肪酶 | 第34-37页 |
| ·实验结果 | 第37-40页 |
| ·liphy基因片段和pET-15b载体的双酶切回收鉴定 | 第37页 |
| ·重组表达载体pET-15b-liphy的鉴定 | 第37-40页 |
| ·重组脂肪酶诱导表达 | 第40页 |
| ·结果讨论 | 第40-41页 |
| ·重组载体pET-15b-liphy的构建 | 第40-41页 |
| ·诱导表达重组脂肪酶 | 第41页 |
| ·小结 | 第41-43页 |
| 第四章 重组脂肪酶表达条件的优化及纯化 | 第43-55页 |
| ·实验材料 | 第43-45页 |
| ·仪器及药品 | 第43页 |
| ·菌种及质粒 | 第43页 |
| ·培养基及试剂 | 第43-45页 |
| ·实验内容 | 第45-48页 |
| ·控制变量法优化重组脂肪酶表达条件 | 第45-46页 |
| ·正交法优化重组脂肪酶表达条件 | 第46-47页 |
| ·重组脂肪酶的分离纯化 | 第47-48页 |
| ·实验结果 | 第48-53页 |
| ·控制变量法优化重组脂肪酶表达条件 | 第48-51页 |
| ·正交法优化重组脂肪酶表达条件 | 第51-53页 |
| ·重组脂肪酶的分离纯化 | 第53页 |
| ·结果讨论 | 第53-54页 |
| ·影响原核表达的因素 | 第53-54页 |
| ·重组脂肪酶的分离纯化 | 第54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 第五章 重组脂肪酶的酶学性质及应用 | 第55-69页 |
| ·实验材料 | 第55-56页 |
| ·仪器及药品 | 第55页 |
| ·菌种及质粒 | 第55页 |
| ·培养基及试剂 | 第55-56页 |
| ·实验内容 | 第56-59页 |
| ·重组脂肪酶的酶学性质 | 第56-58页 |
| ·重组脂肪酶的MTT毒性试验 | 第58页 |
| ·重组脂肪酶对地沟油及橄榄油的降解作用 | 第58-59页 |
| ·实验结果 | 第59-67页 |
| ·重组脂肪酶的酶学性质 | 第59-64页 |
| ·重组脂肪酶的MTT毒性试验 | 第64-65页 |
| ·重组脂肪酶对地沟油及橄榄油的降解作用 | 第65-67页 |
| ·结果讨论 | 第67-68页 |
| ·重组脂肪酶的酶学性质 | 第67页 |
| ·重组脂肪酶的MTT毒性试验 | 第67-68页 |
| ·重组脂肪酶对地沟油及橄榄油的降解作用 | 第68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 结论 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-72页 |
