摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
目录 | 第10-19页 |
1 文献综述 | 第19-49页 |
·人生长激素的生物学性质 | 第19-28页 |
·hGH结构 | 第20-22页 |
·hGH的基因结构 | 第20页 |
·hGH分子结构及亚型 | 第20-22页 |
·hGH的生理功能 | 第22-27页 |
·重hGH的研究历史 | 第27-28页 |
·枯草芽孢杆菌概况 | 第28-35页 |
·芽孢及芽孢表面展示外源重组蛋白 | 第28页 |
·芽孢的构造与化学组成 | 第28-30页 |
·芽孢的形成 | 第30-32页 |
·芽孢表面展示系统 | 第32页 |
·芽孢表面展示系统的构建原则 | 第32-33页 |
·枯草芽孢杆菌芽孢表面展示系统 | 第33-35页 |
·家蚕模式生物筛选药物 | 第35-45页 |
·常用的模式生物 | 第35-36页 |
·家蚕作为模式生物的特点 | 第36-38页 |
·蚕和生命科学 | 第38-44页 |
·家蚕与动物伦理道理 | 第44-45页 |
·本研究的目的和意义 | 第45-49页 |
·主要研究内容 | 第46-48页 |
·研究的技术路线 | 第48-49页 |
2 人生长激素基因的克隆及鉴定和中间桥梁载体pET-hGH构建 | 第49-58页 |
·材料与试剂 | 第49-52页 |
·质粒和菌株 | 第49-50页 |
·试剂 | 第50页 |
·仪器设备 | 第50-51页 |
·试剂的配制 | 第51-52页 |
·方法 | 第52-54页 |
·人生长激素基因序列的来源 | 第52页 |
·人生长激素基因的PCR扩增 | 第52-53页 |
·目的基因的克隆与鉴定 | 第53-54页 |
·pET30a-hGH中间桥梁载体的构建 | 第54页 |
·结果 | 第54-56页 |
·人生长激素基因的克隆与鉴定 | 第54-56页 |
·讨论与小结 | 第56-58页 |
3 芽孢表面展示hGH | 第58-73页 |
·材料和试剂 | 第58-61页 |
·菌种和质粒 | 第58-59页 |
·试剂 | 第59页 |
·试剂的配制 | 第59-61页 |
·实验方法 | 第61-67页 |
·整合型重组质粒pJS700-hGH的构建 | 第61-63页 |
·重组枯草芽孢杆菌菌株的筛选与鉴定 | 第63-65页 |
·表面展示人生长激素重组芽孢的诱导及鉴定 | 第65-66页 |
·芽孢悬液的制备 | 第66-67页 |
·结果与分析 | 第67-72页 |
·整合型重组质粒pJS700-hGH的构建及鉴定 | 第67页 |
·重组枯草芽孢杆菌菌株的筛选与鉴定 | 第67-70页 |
·融合蛋白CotC-hGH的表达和鉴定 | 第70-72页 |
·讨论与小结 | 第72-73页 |
4 家蚕口添芽孢展示hGH蛋白实验 | 第73-91页 |
·材料 | 第73-74页 |
·材料、仪器、试剂 | 第73-74页 |
·方法 | 第74-78页 |
·家蚕饲育 | 第74页 |
·实验设计及调查项目 | 第74-75页 |
·蛋白酶酶活测定主要试剂准备 | 第75-76页 |
·家蚕中肠蛋白酶酶活测定 | 第76-77页 |
·家蚕组织材料的提取 | 第77-78页 |
·家蚕血清蛋白样品的制备 | 第78页 |
·数据处理 | 第78页 |
·结果 | 第78-86页 |
·5龄期家蚕口添重组芽孢展示hGH后体重的变化 | 第78-79页 |
·5龄期家蚕口添重组芽孢展示hGH后食欲的变化 | 第79-81页 |
·5龄期家蚕口添重组芽孢展示hGH后体重转换效率的变化 | 第81-82页 |
·5龄期家蚕口添重组芽孢展示hGH后不良茧率的变化 | 第82-83页 |
·5龄期家蚕口添重组芽孢展示hGH后茧质的变化 | 第83-84页 |
·5龄期家蚕口添重组芽孢展示hGH后肠蛋白酶活性的变化 | 第84-85页 |
·家蚕血清hGH的Westron Blot分析 | 第85-86页 |
·讨论 | 第86-89页 |
·小结 | 第89-91页 |
5 小鼠口服芽孢展示hGH蛋白的生物活性实验 | 第91-101页 |
·材料 | 第91-92页 |
·实验动物与饲养管理 | 第91页 |
·受试物及配制 | 第91-92页 |
·实验仪器与设备 | 第92页 |
·主要试剂 | 第92页 |
·实验方法 | 第92-94页 |
·实验方案设计 | 第92页 |
·体重的测定 | 第92页 |
·血清生化检查 | 第92-93页 |
·脏器系数的测定 | 第93页 |
·小鼠血清中生长激素(hGH)测定 | 第93-94页 |
·数据处理 | 第94页 |
·结果 | 第94-98页 |
·小鼠口服重组芽孢后生长及体重的变化 | 第94-95页 |
·小鼠口服重组芽孢后脏器系数的变化 | 第95-96页 |
·小鼠口服重组芽孢展示hGH后血液生化指标的变化 | 第96-98页 |
·小鼠口服芽孢展示hGH后血清中hGH含量测定 | 第98页 |
·讨论 | 第98-100页 |
·小结 | 第100-101页 |
6 总结和展望 | 第101-104页 |
·主要工作总结 | 第101-102页 |
·展望 | 第102-104页 |
本研究创新点 | 第104-105页 |
参考文献 | 第105-114页 |
致谢 | 第114-116页 |
博士期间发表的研究论文和参加的课题 | 第116页 |