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枯草芽孢杆菌表面展示人生长激素及其口服功效评估

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
目录第10-19页
1 文献综述第19-49页
   ·人生长激素的生物学性质第19-28页
     ·hGH结构第20-22页
       ·hGH的基因结构第20页
       ·hGH分子结构及亚型第20-22页
     ·hGH的生理功能第22-27页
     ·重hGH的研究历史第27-28页
   ·枯草芽孢杆菌概况第28-35页
     ·芽孢及芽孢表面展示外源重组蛋白第28页
     ·芽孢的构造与化学组成第28-30页
     ·芽孢的形成第30-32页
     ·芽孢表面展示系统第32页
     ·芽孢表面展示系统的构建原则第32-33页
     ·枯草芽孢杆菌芽孢表面展示系统第33-35页
   ·家蚕模式生物筛选药物第35-45页
     ·常用的模式生物第35-36页
     ·家蚕作为模式生物的特点第36-38页
     ·蚕和生命科学第38-44页
     ·家蚕与动物伦理道理第44-45页
   ·本研究的目的和意义第45-49页
     ·主要研究内容第46-48页
     ·研究的技术路线第48-49页
2 人生长激素基因的克隆及鉴定和中间桥梁载体pET-hGH构建第49-58页
   ·材料与试剂第49-52页
     ·质粒和菌株第49-50页
     ·试剂第50页
     ·仪器设备第50-51页
     ·试剂的配制第51-52页
   ·方法第52-54页
     ·人生长激素基因序列的来源第52页
     ·人生长激素基因的PCR扩增第52-53页
     ·目的基因的克隆与鉴定第53-54页
     ·pET30a-hGH中间桥梁载体的构建第54页
   ·结果第54-56页
     ·人生长激素基因的克隆与鉴定第54-56页
   ·讨论与小结第56-58页
3 芽孢表面展示hGH第58-73页
   ·材料和试剂第58-61页
     ·菌种和质粒第58-59页
     ·试剂第59页
     ·试剂的配制第59-61页
   ·实验方法第61-67页
     ·整合型重组质粒pJS700-hGH的构建第61-63页
     ·重组枯草芽孢杆菌菌株的筛选与鉴定第63-65页
     ·表面展示人生长激素重组芽孢的诱导及鉴定第65-66页
     ·芽孢悬液的制备第66-67页
   ·结果与分析第67-72页
     ·整合型重组质粒pJS700-hGH的构建及鉴定第67页
     ·重组枯草芽孢杆菌菌株的筛选与鉴定第67-70页
     ·融合蛋白CotC-hGH的表达和鉴定第70-72页
   ·讨论与小结第72-73页
4 家蚕口添芽孢展示hGH蛋白实验第73-91页
   ·材料第73-74页
     ·材料、仪器、试剂第73-74页
   ·方法第74-78页
     ·家蚕饲育第74页
     ·实验设计及调查项目第74-75页
     ·蛋白酶酶活测定主要试剂准备第75-76页
     ·家蚕中肠蛋白酶酶活测定第76-77页
     ·家蚕组织材料的提取第77-78页
     ·家蚕血清蛋白样品的制备第78页
     ·数据处理第78页
   ·结果第78-86页
     ·5龄期家蚕口添重组芽孢展示hGH后体重的变化第78-79页
     ·5龄期家蚕口添重组芽孢展示hGH后食欲的变化第79-81页
     ·5龄期家蚕口添重组芽孢展示hGH后体重转换效率的变化第81-82页
     ·5龄期家蚕口添重组芽孢展示hGH后不良茧率的变化第82-83页
     ·5龄期家蚕口添重组芽孢展示hGH后茧质的变化第83-84页
     ·5龄期家蚕口添重组芽孢展示hGH后肠蛋白酶活性的变化第84-85页
     ·家蚕血清hGH的Westron Blot分析第85-86页
   ·讨论第86-89页
   ·小结第89-91页
5 小鼠口服芽孢展示hGH蛋白的生物活性实验第91-101页
   ·材料第91-92页
     ·实验动物与饲养管理第91页
     ·受试物及配制第91-92页
     ·实验仪器与设备第92页
     ·主要试剂第92页
   ·实验方法第92-94页
     ·实验方案设计第92页
     ·体重的测定第92页
     ·血清生化检查第92-93页
     ·脏器系数的测定第93页
     ·小鼠血清中生长激素(hGH)测定第93-94页
     ·数据处理第94页
   ·结果第94-98页
     ·小鼠口服重组芽孢后生长及体重的变化第94-95页
     ·小鼠口服重组芽孢后脏器系数的变化第95-96页
     ·小鼠口服重组芽孢展示hGH后血液生化指标的变化第96-98页
     ·小鼠口服芽孢展示hGH后血清中hGH含量测定第98页
   ·讨论第98-100页
   ·小结第100-101页
6 总结和展望第101-104页
   ·主要工作总结第101-102页
   ·展望第102-104页
本研究创新点第104-105页
参考文献第105-114页
致谢第114-116页
博士期间发表的研究论文和参加的课题第116页

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