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人工合成的纳豆激酶基因转化烟草的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
缩写词说明第8-9页
第一章 引言第9-25页
   ·研究背景第9-23页
     ·纳豆与纳豆激酶第9-14页
     ·植物生物反应器第14-23页
   ·本研究的立题依据和意义第23-25页
第二章 农杆菌介导的sNK、sNK-E8i基因瞬时表达系统的建立第25-32页
   ·实验材料第25-26页
   ·实验方法第26-29页
     ·植物表达载体的农杆菌转化第26-27页
     ·烟草转纳豆激酶基因瞬时表达系统的建立第27-29页
   ·结果与分析第29-32页
     ·植物表达载体转化农杆菌第29-30页
     ·瞬时表达系统的建立第30-31页
     ·含与不含内含子纳豆激酶基因瞬时表达情况比较第31-32页
第三章 农杆菌介导法转化烟草第32-46页
   ·实验材料第32-33页
   ·实验方法第33-38页
     ·无菌苗的培养第33页
     ·农杆菌的活化及扩培第33页
     ·农杆菌侵染烟草叶盘外植体第33-34页
     ·转基因烟草基因组DNA的提取(SDS法)第34页
     ·转基因再生植株的PCR鉴定第34-35页
     ·烟草总RNA的提取第35页
     ·反转录第35-36页
     ·RT-PCR第36页
     ·RT-qPCR第36-37页
     ·烟草总蛋白的提取第37页
     ·纤维蛋白平板法检测纳豆激酶活性第37-38页
     ·NC89庆大霉素本底抗性水平测定实验第38页
     ·T_1代转基因烟草的筛选及鉴定第38页
   ·结果与分析第38-46页
     ·转基因烟草植株的获得第38-39页
     ·RT-PCR检测第39-41页
     ·RT-qPCR第41-42页
     ·转基因烟草植株纳豆激酶酶活检测第42-45页
     ·转纳豆激酶烟草植株的加代培养第45-46页
第四章 讨论与结论第46-48页
   ·讨论第46-47页
   ·结论第47-48页
参考文献第48-52页
致谢第52-53页
已发表论文第53页

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