摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-8页 |
缩写词说明 | 第8-9页 |
第一章 引言 | 第9-25页 |
·研究背景 | 第9-23页 |
·纳豆与纳豆激酶 | 第9-14页 |
·植物生物反应器 | 第14-23页 |
·本研究的立题依据和意义 | 第23-25页 |
第二章 农杆菌介导的sNK、sNK-E8i基因瞬时表达系统的建立 | 第25-32页 |
·实验材料 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-29页 |
·植物表达载体的农杆菌转化 | 第26-27页 |
·烟草转纳豆激酶基因瞬时表达系统的建立 | 第27-29页 |
·结果与分析 | 第29-32页 |
·植物表达载体转化农杆菌 | 第29-30页 |
·瞬时表达系统的建立 | 第30-31页 |
·含与不含内含子纳豆激酶基因瞬时表达情况比较 | 第31-32页 |
第三章 农杆菌介导法转化烟草 | 第32-46页 |
·实验材料 | 第32-33页 |
·实验方法 | 第33-38页 |
·无菌苗的培养 | 第33页 |
·农杆菌的活化及扩培 | 第33页 |
·农杆菌侵染烟草叶盘外植体 | 第33-34页 |
·转基因烟草基因组DNA的提取(SDS法) | 第34页 |
·转基因再生植株的PCR鉴定 | 第34-35页 |
·烟草总RNA的提取 | 第35页 |
·反转录 | 第35-36页 |
·RT-PCR | 第36页 |
·RT-qPCR | 第36-37页 |
·烟草总蛋白的提取 | 第37页 |
·纤维蛋白平板法检测纳豆激酶活性 | 第37-38页 |
·NC89庆大霉素本底抗性水平测定实验 | 第38页 |
·T_1代转基因烟草的筛选及鉴定 | 第38页 |
·结果与分析 | 第38-46页 |
·转基因烟草植株的获得 | 第38-39页 |
·RT-PCR检测 | 第39-41页 |
·RT-qPCR | 第41-42页 |
·转基因烟草植株纳豆激酶酶活检测 | 第42-45页 |
·转纳豆激酶烟草植株的加代培养 | 第45-46页 |
第四章 讨论与结论 | 第46-48页 |
·讨论 | 第46-47页 |
·结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
已发表论文 | 第53页 |