摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
目录 | 第12-14页 |
第一章 绪论 | 第14-24页 |
·黄瓜花叶病毒概述 | 第14-17页 |
·黄瓜花叶病毒生物学特性 | 第14页 |
·黄瓜花叶病毒病毒结构及基因组功能 | 第14-16页 |
·黄瓜花叶病毒的变异及分组 | 第16-17页 |
·黄瓜花叶病毒的防治 | 第17-18页 |
·植物中MicroRNA的研究进展 | 第18-22页 |
·植物中RNA沉默现象 | 第18页 |
·Mirco RNA的发现与产生机制 | 第18-20页 |
·Mirco RNA的生物学功能 | 第20-21页 |
·MircoRNA的人工模拟靶序列概述 | 第21页 |
·人工MircoRN A(Artificial microRNA, a miRNA)的研究进展 | 第21-22页 |
·抗病毒研究方法和进展 | 第22页 |
·研究内容与意义 | 第22-24页 |
·研究内容 | 第22-23页 |
·研究意义 | 第23-24页 |
第二章 模拟靶序列对CMV-GFP中报告基因的抑制效果检测 | 第24-44页 |
·材料与方法 | 第24-34页 |
·植物材料 | 第24页 |
·酶与试剂 | 第24页 |
·常用试剂的配制 | 第24页 |
·LS-RNA3-GFP-MIMIC克隆的构建 | 第24-29页 |
·LS-CMV-GFP-MIMIC克隆的农杆菌转化与浸润接种 | 第29-31页 |
·模拟靶序列影响LS-CMV-GFP 中GFP表达量的Western Blot检测 | 第31-32页 |
·Fny-RNA3-GFP-MIMIC的克隆构建 | 第32-34页 |
·Fny-RNA3-GFP -MIMIC克隆的农杆菌转化与浸润接种 | 第34页 |
·Fny-RNA3-GFP –MIMIC的Western Blot检测 | 第34页 |
·结果与分析 | 第34-43页 |
·LS-RNA 3-GFP-MIM隆的构建 | 第34-36页 |
·模拟靶序列对 LS-CMV-GFP 中GFP表达量的影响 | 第36-38页 |
·模拟靶序列影响LS-CMV-GFP 中GFP表达量的W estern Blot印迹结果与分析 | 第38-39页 |
·Fny-RNA3-GFP-MIMIC克隆的构建 | 第39-41页 |
·模拟靶序列影响Fny -CMV-GFP 中GFP表达量的荧光结果及分析 | 第41-42页 |
·模拟靶序列影响Fny-CMV-GFP 中GFP表达量的WesternBlot印迹结果与分析 | 第42-43页 |
·小结与讨论 | 第43-44页 |
第三章 靶序列模拟对CMV负链合成和翻译水平的影响 | 第44-52页 |
·材料与方法 | 第44-48页 |
·植物材料 | 第44页 |
·酶与试剂 | 第44页 |
·常用试剂的配制 | 第44页 |
·pBI-EGFP-UTR克隆的构建 | 第44-46页 |
·pBI-EGFP-UTR克隆的农杆菌转化与浸润接种 | 第46页 |
·EGFP-UTR的Western Blot检测 | 第46页 |
·RT-PCR检测 | 第46-48页 |
·结果与分析 | 第48-51页 |
·模拟靶序列对CMV翻译水平的影响 | 第48-49页 |
·模拟靶序列抑制CMV翻译水平的Western Blot印迹结果与分析 | 第49-50页 |
·模拟靶序列对CMV负链合成的影响 | 第50-51页 |
·小结与讨论 | 第51-52页 |
第四章 模拟靶序列对CMV完整病毒积累量的抑制效果 | 第52-65页 |
·材料与方法 | 第52-59页 |
·植物材料 | 第52页 |
·酶与试剂 | 第52页 |
·常用试剂的配制 | 第52页 |
·LS-CMV-MIMIC的克隆构建 | 第52-54页 |
·LS-CMV-MIMIC的克隆体外转录与病毒扩繁 | 第54-56页 |
·LS-CMV-MIMIC的Northern Blot检测 | 第56-58页 |
·模拟靶序列位于Fny不同基因组的克隆构建 | 第58页 |
·Fny-CMV-MIMIC克隆的农杆菌转化、浸润接种与病毒扩繁 | 第58-59页 |
·Fny-CMV-MIMIC的Northern Blot检测 | 第59页 |
·结果与分析 | 第59-64页 |
·miRNA与模拟靶序列互作的症状表现 | 第59-61页 |
·LS-CMV-MIMIC在拟南芥上的接种症状 | 第61页 |
·模拟靶序列对LS-CMV重组病毒积累的影响 | 第61-62页 |
·模拟靶序列对Fny-CMV病毒症状的影响 | 第62-63页 |
·Fny -CMV-MIMIC的Northern Blot印迹结果 | 第63-64页 |
·小结与讨论 | 第64-65页 |
总结和展望 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-71页 |
附录:重要溶剂配制 | 第71-73页 |
致谢 | 第73页 |