| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 目录 | 第10-11页 |
| 缩略词汇表 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-15页 |
| 实验技术路线图 | 第15-16页 |
| 第一章 材料与方法 | 第16-31页 |
| 1 材料 | 第16-21页 |
| ·细胞株、菌种和重组质粒 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16-20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| 2 方法 | 第21-31页 |
| ·携带pcDNA3.1(+)/GPI-PLD质粒的TG1大肠杆菌扩增培养及提取 | 第21-22页 |
| ·重组质粒pcDNA3.1(+)/GPI-PLD转染HepG2细胞、筛选及鉴定 | 第22-29页 |
| ·转染的HepG2细胞体外侵袭能力的测定 | 第29-30页 |
| ·转染的HepG2细胞血管生成拟态的三维细胞培养与观察 | 第30页 |
| ·统计学分析 | 第30-31页 |
| 第二章 结果 | 第31-44页 |
| 1. 质粒提取酶切结果 | 第31页 |
| 2. 稳定转染GPI-PLD基因后G418筛选结果 | 第31-33页 |
| 3. 经G481筛选稳定转染组及对照组细胞GIP-PLD酶活性测定结果 | 第33-34页 |
| 4. 细胞总RNA提取及鉴定结果 | 第34页 |
| 5. RT-PCR法检测GPI-PLD基因mRNA的表达量变化 | 第34-35页 |
| 6. ELISA法检测各组细胞培养液中CD87的浓度 | 第35-36页 |
| 7. 流式细胞术检测各组细胞表面锚定CD87的表达水平 | 第36-38页 |
| 8. 免疫细胞化学法结合western blot检测各组细胞表面锚定Ephrin-A1的表达水平 | 第38-40页 |
| 9. GPI-PLD对HepG_2细胞侵袭能力的影响 | 第40-42页 |
| 10. 转染的HePG_2细胞血管生成拟态的三维细胞培养与观察 | 第42-44页 |
| 第三章 讨论 | 第44-51页 |
| 1. GPI-PLD与肝细胞癌 | 第44-46页 |
| 2. 肿瘤血管生成拟态 | 第46-48页 |
| 3. CD87、Ephrin-A1与细胞侵袭、血管生成拟态 | 第48-51页 |
| 第四章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 综述 | 第56-63页 |
| 参考文献 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第64页 |
