英文缩写符号及其中英文对照表 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 引言 | 第10-23页 |
·MAPK 的功能特点及级联信号通路 | 第11-16页 |
·MAPK 的结构特点 | 第11-12页 |
·MAPK 的级联系统 | 第12-13页 |
·MAPKs 在植物信号转导中的作用 | 第13-16页 |
·BADH 基因工程研究进展 | 第16-19页 |
·胆碱单加氧酶(CMO) | 第17页 |
·胆碱脱氢酶(CDH) | 第17-18页 |
·甜菜碱醛脱氢酶(BADH) | 第18-19页 |
·脯氨酸与植物抗渗透胁迫 | 第19-22页 |
·脯氨酸在植物抗逆性方面的作用 | 第19页 |
·脯氨酸的合成途径 | 第19-20页 |
·脯氨酸的降解途径 | 第20页 |
·脯氨酸累积酶基因 | 第20-22页 |
·本研究的目的意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-41页 |
·试验材料 | 第23-26页 |
·植物材料及处理 | 第23页 |
·菌株与质粒 | 第23页 |
·试剂盒、酶、生化试剂及实验仪器 | 第23页 |
·PCR 引物 | 第23-25页 |
·培养基 | 第25-26页 |
·试验方法 | 第26-41页 |
·甜瓜总 RNA 的提取 | 第26-28页 |
·反转录 cDNA 模板 | 第28页 |
·cDNA 纯化(用于 5′RACE) | 第28-29页 |
·对 cDNA 进行末端加尾(用于 5′RACE) | 第29页 |
·cDNA 全长序列的克隆 | 第29-32页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
·目的片段的回收 | 第32-33页 |
·连接反应 | 第33页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第33-34页 |
·碱裂解法提取质粒 DNA | 第34-35页 |
·质粒 DNA 酶切验证 | 第35-36页 |
·cDNA 片段的测序及序列分析 | 第36页 |
·实时荧光定量 | 第36页 |
·脯氨酸含量的测定 | 第36-37页 |
·CmMAPK、CmBADH、CmP5CS 反义表达载体的构建 | 第37-38页 |
·根癌农杆菌 LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第38-39页 |
·农杆菌介导的甜瓜遗传转化 | 第39-40页 |
·甜瓜基因组 DNA 的提取(CTAB 法) | 第40页 |
·转基因甜瓜的 PCR 筛选 | 第40-41页 |
3 结果与分析 | 第41-56页 |
·甜瓜总 RNA 的提取 | 第41页 |
·甜瓜 CmBADH、CmMAPK、CmP5CS 基因的克隆 | 第41-43页 |
·甜瓜 CmBADH、CmMAPK、CmP5CS 基因中间片段的克隆 | 第41页 |
·甜瓜 CmBADH、CmMAPK、CmP5CS 基因 3,端的克隆 | 第41-42页 |
·甜瓜 CmBADH、CmMAPK、CmP5CS 基因 5,端的克隆 | 第42页 |
·甜瓜 CmBADH、CmMAPK、CmP5CS 基因全长的克隆 | 第42-43页 |
·CmBADH、CmMAPK、CmP5CS 基因序列分析 | 第43-50页 |
·CmMAPK 基因生物信息学分析 | 第43-45页 |
·CmBADH 基因生物信息学分析 | 第45-47页 |
·CmP5CS 基因生物信息学分析 | 第47-50页 |
·甜瓜 CmBADH、CmMAPK、CmP5CS 基因的表达 | 第50-52页 |
·200 mmol/L NaCl 处理下的表达 | 第50-51页 |
·其它处理下的表达 | 第51-52页 |
·脯氨酸含量的测定 | 第52-53页 |
·CmP5CS、CmMAPK 基因反义表达载体的构建 | 第53页 |
·农杆菌介导法对甜瓜的转化 | 第53-56页 |
·甜瓜的遗传转化 | 第53-55页 |
·转化植株的筛选 | 第55-56页 |
4 讨论 | 第56-59页 |
·CmBADH 基因 | 第56页 |
·CmMAPK 基因 | 第56-57页 |
·CmP5CS 基因 | 第57-59页 |
5 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
攻读硕士期间发表文章 | 第74页 |