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甜瓜CmMAPK、CmBADH、CmP5CS基因的克隆、表达分析及遗传转化

英文缩写符号及其中英文对照表第1-8页
摘要第8-9页
Abstract第9-10页
1 引言第10-23页
   ·MAPK 的功能特点及级联信号通路第11-16页
     ·MAPK 的结构特点第11-12页
     ·MAPK 的级联系统第12-13页
     ·MAPKs 在植物信号转导中的作用第13-16页
   ·BADH 基因工程研究进展第16-19页
     ·胆碱单加氧酶(CMO)第17页
     ·胆碱脱氢酶(CDH)第17-18页
     ·甜菜碱醛脱氢酶(BADH)第18-19页
   ·脯氨酸与植物抗渗透胁迫第19-22页
     ·脯氨酸在植物抗逆性方面的作用第19页
     ·脯氨酸的合成途径第19-20页
     ·脯氨酸的降解途径第20页
     ·脯氨酸累积酶基因第20-22页
   ·本研究的目的意义第22-23页
2 材料与方法第23-41页
   ·试验材料第23-26页
     ·植物材料及处理第23页
     ·菌株与质粒第23页
     ·试剂盒、酶、生化试剂及实验仪器第23页
     ·PCR 引物第23-25页
     ·培养基第25-26页
   ·试验方法第26-41页
     ·甜瓜总 RNA 的提取第26-28页
     ·反转录 cDNA 模板第28页
     ·cDNA 纯化(用于 5′RACE)第28-29页
     ·对 cDNA 进行末端加尾(用于 5′RACE)第29页
     ·cDNA 全长序列的克隆第29-32页
     ·琼脂糖凝胶电泳第32页
     ·目的片段的回收第32-33页
     ·连接反应第33页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第33-34页
     ·碱裂解法提取质粒 DNA第34-35页
     ·质粒 DNA 酶切验证第35-36页
     ·cDNA 片段的测序及序列分析第36页
     ·实时荧光定量第36页
     ·脯氨酸含量的测定第36-37页
     ·CmMAPK、CmBADH、CmP5CS 反义表达载体的构建第37-38页
     ·根癌农杆菌 LBA4404 感受态细胞的制备与转化第38-39页
     ·农杆菌介导的甜瓜遗传转化第39-40页
     ·甜瓜基因组 DNA 的提取(CTAB 法)第40页
     ·转基因甜瓜的 PCR 筛选第40-41页
3 结果与分析第41-56页
   ·甜瓜总 RNA 的提取第41页
   ·甜瓜 CmBADH、CmMAPK、CmP5CS 基因的克隆第41-43页
     ·甜瓜 CmBADH、CmMAPK、CmP5CS 基因中间片段的克隆第41页
     ·甜瓜 CmBADH、CmMAPK、CmP5CS 基因 3,端的克隆第41-42页
     ·甜瓜 CmBADH、CmMAPK、CmP5CS 基因 5,端的克隆第42页
     ·甜瓜 CmBADH、CmMAPK、CmP5CS 基因全长的克隆第42-43页
   ·CmBADH、CmMAPK、CmP5CS 基因序列分析第43-50页
     ·CmMAPK 基因生物信息学分析第43-45页
     ·CmBADH 基因生物信息学分析第45-47页
     ·CmP5CS 基因生物信息学分析第47-50页
   ·甜瓜 CmBADH、CmMAPK、CmP5CS 基因的表达第50-52页
     ·200 mmol/L NaCl 处理下的表达第50-51页
     ·其它处理下的表达第51-52页
   ·脯氨酸含量的测定第52-53页
   ·CmP5CS、CmMAPK 基因反义表达载体的构建第53页
   ·农杆菌介导法对甜瓜的转化第53-56页
     ·甜瓜的遗传转化第53-55页
     ·转化植株的筛选第55-56页
4 讨论第56-59页
   ·CmBADH 基因第56页
   ·CmMAPK 基因第56-57页
   ·CmP5CS 基因第57-59页
5 结论第59-60页
参考文献第60-73页
致谢第73-74页
攻读硕士期间发表文章第74页

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