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甜菜碱提高烟草耐热性研究

符号说明第1-5页
目录第5-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-27页
   ·高温胁迫对植物的影响第13-15页
     ·高温对植物光合作用的影响第13-14页
     ·高温对植物生物膜的影响第14页
     ·氧化胁迫和抗氧化剂第14-15页
   ·甜菜碱的生物合成途径及其生理功能第15-21页
     ·甜菜碱的渗透调节作用第16-17页
     ·甜菜碱的“非渗透调节作用”第17-19页
       ·甜菜碱对光合机构的保护作用第17-18页
       ·甜菜碱对酶活的保护作用第18-19页
       ·甜菜碱对生物膜的保护作用第19页
     ·甜菜碱影响基因表达第19-21页
   ·甜菜碱基因工程和外源甜菜碱研究与应用第21-23页
   ·Ca~(2+)、热激蛋白与植物耐热性的关系第23-25页
     ·Ca~(2+)与植物耐热性的关系第23页
     ·热激蛋白与植物耐热性的关系第23-25页
   ·本研究的目的和意义第25-27页
2 材料与方法第27-41页
   ·实验材料与处理第27-28页
     ·实验材料第27页
     ·材料的培养和处理第27-28页
       ·烟草植株的培养和处理第27页
       ·烟草种子的处理第27-28页
   ·实验方法第28-37页
     ·烟草总 DNA 的提取(CTAB 法)第28页
     ·转基因植株的 PCR 筛选第28-29页
     ·Western Blot第29-32页
       ·植物总蛋白的提取:第29-30页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第30-31页
       ·半干法蛋白转移第31页
       ·封闭及杂交第31-32页
       ·显色反应第32页
       ·尿素-SDS-PAGE第32页
     ·Real-Time PCR第32-36页
       ·植物材料总 RNA 的提取第32-34页
       ·反转录获得 cDNA 第一条链第34页
       ·Real-Time PCR 体系及反应条件第34-36页
     ·烟草 K326 叶肉原生质体的制备第36-37页
       ·原生质体的制备第36页
       ·原生质体的纯化第36-37页
   ·生理指标的测定第37-39页
     ·甜菜碱含量的测定第37页
     ·光合速率的测定第37页
     ·调制式荧光仪荧光参数的测定第37-38页
     ·丙二醛含量和相对电导率的测定第38页
     ·超氧阴离子自由基的测定第38页
     ·抗氧化酶活性测定第38页
     ·Ca~(2+)含量的测定第38-39页
     ·Ca~(2+)-ATPase 和 Mg~(2+)-ATPase 活性的测定第39页
     ·烟草原生质体内自由钙离子([Ca~(2+)]i)浓度的检测第39页
   ·统计分析第39-41页
3 结果与分析第41-62页
   ·转基因烟草植株的筛选鉴定第41页
   ·转 BADH 基因烟草甜菜碱含量的测定第41-42页
   ·甜菜碱提高烟草耐热性第42-48页
     ·不同温度对烟草叶片净光合速率和表观量子效率的影响第42-43页
     ·不同温度对烟草 PSII 光化学效率的影响第43-44页
     ·不同温度对烟草丙二醛(MDA)含量和相对电导率的影响第44-45页
     ·野生型和转 BADH 基因烟草对 43℃高温胁迫的响应第45-48页
       ·高温胁迫对烟草叶片膜脂过氧化和膜透性的影响第45-46页
       ·43 ℃高温胁迫对烟草叶片 H2O2含量和 O2-产生速率的影响第46页
       ·43 ℃高温胁迫对烟草叶片抗氧化酶活性影响第46-48页
   ·钙与植物耐热性的关系第48-55页
     ·Ca~(2+)含量的检测第48-50页
     ·外源 CaCl_2预处理对高温胁迫下烟草叶片光合作用的影响第50-55页
       ·外源 CaCl_2预处理对高温胁迫下烟草叶片光合速率的影响第50-51页
       ·外源 CaCl_2预处理对高温胁迫下烟草叶片 PSII 光化学效率的影响第51-52页
       ·外源 CaCl_2预处理对高温胁迫下叶片膜脂过氧化程度和膜透性的影响第52-53页
       ·外源 CaCl_2预处理对烟草叶片抗氧化酶活性和抗氧化物质含量的影响第53-55页
   ·甜菜碱提高烟草耐热性与钙离子的关系第55-62页
     ·甜菜碱可以提高烟草体内 Ca~(2+)的含量第55-57页
     ·甜菜碱提高烟草体内[Ca~(2+)]i浓度第57-59页
     ·高温条件下甜菜碱增强了烟草 CaM、HSP 的表达第59-60页
     ·高温条件下甜菜碱增强了烟草抗氧化酶的表达第60-62页
4 讨论第62-68页
   ·甜菜碱提高烟草叶片光合作用对高温胁迫的耐性第62页
   ·甜菜碱对高温胁迫条件下生物膜的影响第62-63页
   ·甜菜碱对高温胁迫条件下活性氧积累和抗氧化酶活性的影响第63页
   ·甜菜碱对高温胁迫条件下烟草叶片中基因表达的影响第63-64页
   ·Ca 对烟草耐热性的影响第64-66页
   ·甜菜碱对钙的影响第66-68页
5 结论第68-69页
参考文献第69-81页
致谢第81页

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