| 目录 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-13页 |
| 主要缩略词简表 | 第13-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-29页 |
| 1. 材料 | 第20-24页 |
| ·细胞系和组织样本 | 第20-21页 |
| ·细胞系 | 第20页 |
| ·组织样本 | 第20-21页 |
| ·实验动物 | 第21页 |
| ·菌株和质粒载体 | 第21页 |
| ·试剂 | 第21-23页 |
| ·益气解毒方 | 第21-22页 |
| ·试剂盒与抗体 | 第22页 |
| ·细胞培和实验养用试剂 | 第22页 |
| ·探针、引物和RNA干扰序列 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| 2. 方法 | 第24-29页 |
| ·组织总RNA的抽提 | 第24页 |
| ·细胞总RNA的抽提 | 第24-25页 |
| ·miR-200b和si-CD133转染的细胞 | 第25页 |
| ·Western blot | 第25页 |
| ·细胞生长曲线 | 第25-26页 |
| ·流式细胞分析(FAM)鼻咽癌干细胞中CD133 | 第26页 |
| ·实时荧光定量PCR(qRT-PCR)mRNA检测 | 第26-27页 |
| ·实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miRNA | 第27页 |
| ·Transwell侵袭实验 | 第27-28页 |
| ·miR-200b的靶基因验证 | 第28页 |
| ·裸鼠成瘤实验 | 第28页 |
| ·统计学分析 | 第28-29页 |
| 第三章 结果 | 第29-51页 |
| 第一部分 益气解毒方对鼻咽癌干细胞标志物CD133、CD44的影响 | 第29-34页 |
| ·免疫组化检测鼻咽癌干细胞标志物CD133、CD44在正常鼻咽上皮和不同临床阶段鼻咽癌组织中的表达 | 第29-32页 |
| ·益气解毒方抑制鼻咽癌干细胞CNE2-SC的形成 | 第32-34页 |
| 第二部分 益气解毒方调控鼻咽癌干细胞差异miRNA的筛选与验证 | 第34-40页 |
| ·益气解毒方所调控鼻咽癌干细胞差异miRNA的筛选 | 第34-35页 |
| ·运用qRT-PCR对芯片结果中上调的miRNA进行验证 | 第35-36页 |
| ·益气解毒方调控上调的miRNA在鼻咽癌细胞和组织中的表达 | 第36-38页 |
| ·miR-200b在鼻咽癌细胞核组织中的表达改变 | 第36-37页 |
| ·miR-200b在鼻咽癌细胞中的表达改变 | 第37-38页 |
| ·裸鼠移植瘤实验进一步证实益气解毒方上调miR-200b的表达 | 第38-40页 |
| 第三部分miR200b作为鼻咽癌治疗潜在生物靶点的作用机制 | 第40-51页 |
| ·miR-200b抑制鼻咽癌干细胞CNE2-SC成球能力 | 第40-42页 |
| ·过表达miR-200b抑制鼻咽癌细胞生长增殖与侵袭 | 第42-45页 |
| ·裸鼠体内实验证实过表达miR-200b抑制鼻咽癌细胞生长 | 第45-46页 |
| ·miR-200b通过靶向CD133抑制鼻咽癌及鼻咽癌干细胞的生长 | 第46-49页 |
| ·miR-200b通过靶向CD133抑制鼻咽癌的生长增殖与侵袭 | 第49-51页 |
| 第四章 讨论 | 第51-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-68页 |
| 综述 | 第68-80页 |
| 参考文献 | 第77-80页 |
| 致谢 | 第80-82页 |
| 攻读博士学位期间主持或参与课题、发表论文著作等情况 | 第82页 |
