| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-17页 |
| 第一章 人膝关节OA滑膜细胞和正常滑膜细胞培养与鉴定 | 第17-25页 |
| ·材料 | 第17-20页 |
| ·标本来源及临床资料 | 第17-18页 |
| ·仪器与试剂 | 第18-20页 |
| ·方法 | 第20-22页 |
| ·人原代滑膜细胞分离、培养及观察 | 第20-21页 |
| ·人滑膜细胞鉴定 | 第21-22页 |
| ·结果 | 第22-23页 |
| ·人原代滑膜细胞培养分离结果 | 第22页 |
| ·人滑膜成纤维细胞光镜观察结果 | 第22-23页 |
| ·人滑膜成纤维细胞免疫细胞化学鉴定结果 | 第23页 |
| ·讨论 | 第23-24页 |
| ·选择成纤维样滑膜细胞作为实验靶细胞的依据 | 第23-24页 |
| ·酶消化法分离培养人滑膜细胞的效果 | 第24页 |
| ·结论 | 第24-25页 |
| 第二章 OPN、CD147慢病毒制备及转染人滑膜细胞 | 第25-54页 |
| ·材料 | 第25-28页 |
| ·主要实验仪器及耗材 | 第25-26页 |
| ·主要实验试剂 | 第26-28页 |
| ·方法 | 第28-42页 |
| ·CD147-shRNA慢病毒表达载体的构建、鉴定及包装 | 第28-32页 |
| ·OPN-shRNA慢病毒表达载体的构建、鉴定及包装 | 第32-34页 |
| ·慢病毒包装 | 第34-37页 |
| ·空载慢病毒载体转染人滑膜细胞条件摸索 | 第37-38页 |
| ·实验体系放大及正式的病毒感染实验 | 第38-40页 |
| ·qPCR检测慢病毒转染人滑膜细胞前后OPN、CD147内源性表达 | 第40-42页 |
| ·统计分析 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-51页 |
| ·CD147 shRNA PCR鉴定结果 | 第42-46页 |
| ·OPN shRNA PCR鉴定结果 | 第46-49页 |
| ·qPCR检测慢病毒转染人滑膜细胞前后OPN、CD147内源性表达 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| ·阻断蛋白功能的三种技术 | 第51-52页 |
| ·常用拮抗OPN与CD147的方法 | 第52-53页 |
| ·OPN及CD147慢病毒载体制备 | 第53页 |
| ·结论 | 第53-54页 |
| 第三章 人正常滑膜细胞与OA滑膜细胞PPIC表达的差异及其与OPN-CD147结合的关系 | 第54-66页 |
| ·材料 | 第54-55页 |
| ·主要实验仪器及耗材 | 第54-55页 |
| ·主要实验试剂 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-59页 |
| ·引物设计 | 第55-56页 |
| ·RNA提取及逆转录 | 第56页 |
| ·OPN与CD147免疫共沉淀 | 第56-59页 |
| ·统计分析 | 第59页 |
| ·结果 | 第59-63页 |
| ·RNA提取 | 第59页 |
| ·QPCR结果 | 第59-63页 |
| ·OPN与CD147免疫共沉淀结果 | 第63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| ·正常滑膜细胞与OA滑膜细胞在OPN、CD147、PPIC、MMP-3及TNF-α表达上的差异 | 第63-64页 |
| ·OPN经PPIC与CD147结合 | 第64-65页 |
| ·结论 | 第65-66页 |
| 第四章 OPN、CD147及PPIC对人滑膜细胞生长增殖及表达MMP-3、TNF-α的影响 | 第66-80页 |
| ·材料 | 第66-67页 |
| ·主要实验仪器及耗材 | 第66页 |
| ·主要实验试剂 | 第66-67页 |
| ·方法 | 第67-70页 |
| ·人原代滑膜细胞培养 | 第67页 |
| ·OPN、CD147、PPIC对人滑膜细胞生长与增殖的影响 | 第67-68页 |
| ·Western blot实验 | 第68-70页 |
| ·统计分析 | 第70页 |
| ·结果 | 第70-76页 |
| ·OPN、CD147、PPIC对人滑膜细胞生长的影响 | 第70-72页 |
| ·OPN、CD147、PPIC对人滑膜细胞增殖的影响 | 第72-73页 |
| ·OPN、CD147及PPIC干预人膝正常滑膜细胞及OA滑膜细胞后表达MMP-3及TNF-α差异 | 第73-76页 |
| ·讨论 | 第76-79页 |
| ·正常人滑膜细胞与OA滑膜细胞的生长及增殖 | 第76页 |
| ·OPN经PPIC与CD147结合对人成纤维样滑膜细胞生长及增殖的影响 | 第76-78页 |
| ·OPN经PPIC结合CD147对滑膜细胞表达MMP-3及TNF-α的影响 | 第78页 |
| ·本课题的几点创新 | 第78-79页 |
| ·本课题的几点不足 | 第79页 |
| ·结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-87页 |
| 综述 | 第87-147页 |
| 参考文献 | 第122-147页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第147-150页 |
| 致谢 | 第150-151页 |
