资助项目 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
目录 | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
·昆虫天然免疫反应 | 第12-15页 |
·细胞免疫反应 | 第12-13页 |
·体液免疫反应 | 第13-15页 |
·病原相关分子模式 | 第15-16页 |
·模式识别受体 | 第16-18页 |
·肽聚糖识别蛋白 | 第16-18页 |
·革兰氏阴性菌结合蛋白 | 第18页 |
·β-1,3-葡聚糖识别蛋白 | 第18页 |
·本实验研究意义及立题依据 | 第18-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-34页 |
·实验材料 | 第20-23页 |
·供试昆虫与菌种 | 第20页 |
·试剂和仪器 | 第20-21页 |
·常见缓冲液及试剂配方 | 第21-23页 |
·研究方法 | 第23-34页 |
·家蚕的饲养与感染 | 第23页 |
·家蚕的解剖与组织的提取 | 第23页 |
·总 RNA 提取及纯化 | 第23-24页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第24页 |
·Polymerase Chain Reaction(PCR)检测 | 第24-25页 |
·PGRP-S5 基因活性结构域的体外重组表达 | 第25-31页 |
·活性检测 | 第31-34页 |
第三章 结果与分析 | 第34-45页 |
·PGRP-S5 的同源性分析 | 第34-36页 |
·半定量 PCR 分析 PGRP-S5 的基因表达量 | 第36-37页 |
·注射 Pa 和 Sa 对 PGRP-S5 在脂肪体和血细胞中表达量的影响 | 第36-37页 |
·喂食绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌对 PGRP-S5 在中肠中表达量的影响 | 第37页 |
·PGRP-S5 基因活性结构域的重组表达与蛋白纯化 | 第37-41页 |
·PGRP-S5 基因活性结构域的 PCR 扩增 | 第37-38页 |
·PGRP-S5 重组质粒的表达 | 第38-39页 |
·PGRP-S5 活性域重组蛋白的纯化 | 第39页 |
·PGRP-S5 活性域重组蛋白的 SUMO 酶酶切及纯化 | 第39-40页 |
·Western Blot 检测 | 第40-41页 |
·PGRP-S5 活性域蛋白与肽聚糖的结合 | 第41页 |
·PGRP-S5 活性结构域蛋白与细菌的凝集 | 第41-42页 |
·PGRP-S5 活性结构域蛋白的酰胺酶活性 | 第42-43页 |
·PGRP-S5 活性结构域蛋白的抗菌活性 | 第43页 |
·PGRP-S5 活性结构域蛋白参与酚氧化酶原级联反应 | 第43-45页 |
第四章 结果与讨论 | 第45-48页 |
·不同细菌诱导下 PGRP-S5 基因表达量的变化 | 第45页 |
·家蚕 PGRP-S5 基因的序列分析 | 第45页 |
·家蚕 PGRP-S5 活性结构域的克隆及原核表达 | 第45-46页 |
·PGRP-S5 活性结构域蛋白与肽聚糖的结合活性及与细菌的凝集反应 | 第46页 |
·PGRP-S5 活性结构域蛋白的酰胺酶活性及抗菌活性 | 第46页 |
·PGRP-S5 活性结构域蛋白参与酚氧化酶原级联反应 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
附录 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-56页 |
作者简介 | 第56页 |