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家蚕PGRP-S5基因的重组表达和功能分析

资助项目第1-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
目录第10-12页
第一章 文献综述第12-20页
   ·昆虫天然免疫反应第12-15页
     ·细胞免疫反应第12-13页
     ·体液免疫反应第13-15页
   ·病原相关分子模式第15-16页
   ·模式识别受体第16-18页
     ·肽聚糖识别蛋白第16-18页
     ·革兰氏阴性菌结合蛋白第18页
     ·β-1,3-葡聚糖识别蛋白第18页
   ·本实验研究意义及立题依据第18-20页
第二章 材料与方法第20-34页
   ·实验材料第20-23页
     ·供试昆虫与菌种第20页
     ·试剂和仪器第20-21页
     ·常见缓冲液及试剂配方第21-23页
   ·研究方法第23-34页
     ·家蚕的饲养与感染第23页
     ·家蚕的解剖与组织的提取第23页
     ·总 RNA 提取及纯化第23-24页
     ·cDNA 第一链的合成第24页
     ·Polymerase Chain Reaction(PCR)检测第24-25页
     ·PGRP-S5 基因活性结构域的体外重组表达第25-31页
     ·活性检测第31-34页
第三章 结果与分析第34-45页
   ·PGRP-S5 的同源性分析第34-36页
   ·半定量 PCR 分析 PGRP-S5 的基因表达量第36-37页
     ·注射 Pa 和 Sa 对 PGRP-S5 在脂肪体和血细胞中表达量的影响第36-37页
     ·喂食绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌对 PGRP-S5 在中肠中表达量的影响第37页
   ·PGRP-S5 基因活性结构域的重组表达与蛋白纯化第37-41页
     ·PGRP-S5 基因活性结构域的 PCR 扩增第37-38页
     ·PGRP-S5 重组质粒的表达第38-39页
     ·PGRP-S5 活性域重组蛋白的纯化第39页
     ·PGRP-S5 活性域重组蛋白的 SUMO 酶酶切及纯化第39-40页
     ·Western Blot 检测第40-41页
   ·PGRP-S5 活性域蛋白与肽聚糖的结合第41页
   ·PGRP-S5 活性结构域蛋白与细菌的凝集第41-42页
   ·PGRP-S5 活性结构域蛋白的酰胺酶活性第42-43页
   ·PGRP-S5 活性结构域蛋白的抗菌活性第43页
   ·PGRP-S5 活性结构域蛋白参与酚氧化酶原级联反应第43-45页
第四章 结果与讨论第45-48页
   ·不同细菌诱导下 PGRP-S5 基因表达量的变化第45页
   ·家蚕 PGRP-S5 基因的序列分析第45页
   ·家蚕 PGRP-S5 活性结构域的克隆及原核表达第45-46页
   ·PGRP-S5 活性结构域蛋白与肽聚糖的结合活性及与细菌的凝集反应第46页
   ·PGRP-S5 活性结构域蛋白的酰胺酶活性及抗菌活性第46页
   ·PGRP-S5 活性结构域蛋白参与酚氧化酶原级联反应第46-48页
参考文献第48-53页
附录第53-54页
致谢第54-56页
作者简介第56页

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