中英文缩略语表 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
前言 | 第12-16页 |
第一部分 缺氧诱导脊髓神经细胞调亡中R0CK-2的表达 | 第16-31页 |
引言 | 第16-17页 |
材料与方法 | 第17-23页 |
1. 材料 | 第17页 |
2. 实验方法 | 第17-23页 |
结果 | 第23-31页 |
第二部分 siRNA对缺氧诱导神经细胞凋亡的抑制作用 | 第31-56页 |
引言 | 第31-32页 |
材料与方法 | 第32-42页 |
1. 材料 | 第32-34页 |
·实验材料 | 第32页 |
·实验用具 | 第32页 |
·实验仪器 | 第32-33页 |
·试剂配制 | 第33-34页 |
2. 实验方法 | 第34-42页 |
·细胞培养 | 第34页 |
·ROCK2抑制表达载体构建 | 第34-36页 |
·shRNA序列设计与合成 | 第34-35页 |
·shROCK2载体构建 | 第35-36页 |
·抑制效率检测 | 第36页 |
·mRNA水平测定 | 第36-38页 |
·样品总RNA的提取和测定 | 第36页 |
·cDNA合成 | 第36-37页 |
·Real-time PCR引物设计 | 第37-38页 |
·荧光定量PCR检测相对表达量 | 第38页 |
·蛋白水平测定 | 第38-40页 |
·细胞总蛋白提取 | 第38-39页 |
·Western Blot | 第39-40页 |
·MTT检测 | 第40-41页 |
·流式细胞技术检测 | 第41-42页 |
·PI染色 | 第41页 |
·Annexin VFITC/PI染色 | 第41-42页 |
结果 | 第42-56页 |
·S-D大鼠脊髓神经元培养 | 第42页 |
·shROCK2载体构建 | 第42-45页 |
·测序结果 | 第42-43页 |
·抑制效率检测 | 第43-45页 |
·荧光定量PCR结果 | 第45-48页 |
·Western-Blot结果 | 第48-51页 |
·MTT检测 | 第51-53页 |
·流式细胞技术 | 第53-56页 |
讨论 | 第56-61页 |
结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-65页 |
综述 | 第65-70页 |
参考文献 | 第67-70页 |
研究生期间发表的论文及参与课题情况 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |