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几丁质识别受体与Xa21的嵌合基因对水稻真菌病害的抗性研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
1. 前言第10-22页
   ·植物的天然免疫第10-11页
   ·水稻的天然免疫第11-18页
     ·PAMP触发的天然免疫反应(PTI)第12-16页
     ·Effector触发的天然免疫反应(ETI)第16-18页
   ·启动子第18-19页
   ·转基因植物的安全评价策略第19-20页
   ·技术路线第20-21页
   ·本研究目的和意义第21-22页
2. 实验材料与方法第22-43页
   ·实验材料与试剂第22-23页
     ·植物材料第22页
     ·菌株与载体质粒第22页
     ·主要工具酶和试剂第22页
   ·主要仪器设备第22页
     ·引物第22-23页
   ·实验方法第23-43页
     ·目的基因Xa21、OSCERK1和OSCEBiP的克隆第23-26页
     ·克隆载体pMD20T-Xa21的构建及鉴定第26-28页
     ·克隆载体pMD20T-OsCERK1的构建及鉴定第28-29页
     ·克隆载体pMD20T-OsCEBiP的构建及鉴定第29页
     ·植物表达载体的构建及鉴定第29-32页
     ·农杆菌的转化及鉴定第32-35页
     ·转基因水稻的获得第35-36页
     ·转基因水稻植株的分子检测与鉴定第36-40页
     ·转基因T_0代水稻植株的抗病性分析第40-41页
     ·转基因T_1代水稻植株的抗病性分析第41-42页
     ·转基因T_1代水稻植株的农艺性状考查第42-43页
3. 结果与分析第43-64页
   ·POSCEBIP-XA21和POSCERK1-XA21表达载体质粒的构建及鉴定第43-47页
     ·目的基因的克隆第43-44页
     ·pCAMBIA1300-pRSUS1重组质粒的构建及鉴定第44页
     ·pCAMBIA1300-pRSUS1-Xa21重组质粒构建及鉴定第44-45页
     ·pOsCEBiP-Xa21和pOsCERK1-Xa21表达载体质粒的构建及鉴定第45-47页
   ·POSCEBIP-XA21和POsCERK1-XA21载体质粒转化农杆菌菌液PCR鉴定第47-48页
   ·T_0代转基因水稻的获得、分子检测及功能鉴定第48-53页
     ·T_0代转pOsCERK1-Xa21和pOsCEBiP-Xa21水稻植株的获得第48-49页
     ·T_0代转基因水稻DNA的PCR鉴定第49-51页
     ·T_0代转基因水稻的RT-PCR鉴定第51-52页
     ·T_0代转基因水稻植株抗病性分析第52-53页
   ·T_1代转基因水稻植株分子鉴定及功能鉴定第53-64页
     ·T_1代转基因水稻植株的PCR鉴定第53-55页
     ·T_1代转基因水稻蛋白的Western blot分析第55页
     ·T_1代转基因水稻植株的抗性分析第55-61页
     ·T_1代转基因水稻植株农艺性状考察第61-64页
4. 讨论第64-67页
   ·OSCEBIP、OSCERK1、XA21基因与抗真菌病害第64-65页
   ·OSCEBIP、OSCERK1、XA21基因在抗真菌病害中的展望第65页
   ·水稻蔗糖合酶基因启动子(PRSUS1)的优势第65-67页
5. 结论第67-68页
参考文献第68-76页
附录第76-81页
 附录一:有关试剂的配制第76-80页
 附录二:缩写对照表(ABBREVIATIONS)第80-81页
作者简介第81页
致谢第81页

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