| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-20页 |
| ·葡萄斑点病研究进展 | 第11-15页 |
| ·葡萄斑点病的发生、分布及危害 | 第11页 |
| ·葡萄斑点病的病原及其分子生物学特性 | 第11-13页 |
| ·葡萄斑点病毒的寄主范围及其传播 | 第13页 |
| ·葡萄斑点病毒的检测技术 | 第13-15页 |
| ·葡萄黄斑病研究进展 | 第15-18页 |
| ·葡萄黄斑病的发生、分布及危害 | 第15-16页 |
| ·葡萄黄斑类病毒的种类及其分类地位 | 第16页 |
| ·GYSVd-1基因序列及其二级结构 | 第16-17页 |
| ·GYSVd的序列变化 | 第17-18页 |
| ·葡萄黄斑类病毒的主要检测技术 | 第18页 |
| ·研究目的与意义 | 第18-20页 |
| 2 葡萄斑点病毒的RT-PCR检测 | 第20-33页 |
| ·材料与方法 | 第20-26页 |
| ·供试样品与主要试剂 | 第20页 |
| ·dsRNA提取 | 第20-21页 |
| ·总RNA提取 | 第21页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第21-22页 |
| ·引物设计与合成 | 第22页 |
| ·RT-PCR | 第22-24页 |
| ·基因克隆与测序 | 第24-26页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第24页 |
| ·大肠杆菌DH5a的制备 | 第24-25页 |
| ·连接 | 第25页 |
| ·热激转化 | 第25页 |
| ·筛选阳性克隆 | 第25页 |
| ·序列分析 | 第25-26页 |
| ·荧光定量RT-PCR | 第26页 |
| ·荧光定量RT-PCR检测灵敏度分析 | 第26页 |
| ·结果与分析 | 第26-32页 |
| ·GFkV RT-PCR检测结果及其扩增产物序列特点 | 第26-30页 |
| ·GFkV MNP-RT-PCR检测结果 | 第30页 |
| ·GFkV MNP-qRT-PCR检测结果 | 第30页 |
| ·MNP-qRT-PCR检测GFkV灵敏度 | 第30-32页 |
| ·结论与讨论 | 第32-33页 |
| 3 葡萄黄斑类病毒RT-PCR检测及序列分析 | 第33-41页 |
| ·材料与方法 | 第33-34页 |
| ·供试材料与主要试剂 | 第33页 |
| ·总RNA提取 | 第33页 |
| ·引物设计与合成 | 第33页 |
| ·RT-PCR | 第33-34页 |
| ·基因克隆与测序 | 第34页 |
| ·SSCP分析 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-40页 |
| ·GYSVd RT-PCR检测结果 | 第34-35页 |
| ·GYSVd在不同葡萄组织中的RT-PCR检测结果 | 第35页 |
| ·SSCP分析结果 | 第35-36页 |
| ·序列分析 | 第36-40页 |
| ·结论与讨论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 附录一 主要试剂及溶液的配制 | 第45-46页 |
| 附录二 硕士期间发表论文 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47页 |