中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-34页 |
1 狄斯瓦螨的概述 | 第14-17页 |
·狄斯瓦螨的简介 | 第14-15页 |
·狄斯瓦螨的防治及存在的问题 | 第15-17页 |
·物理防治法 | 第15-16页 |
·化学防治法 | 第16页 |
·饲养管理防治法 | 第16页 |
·抗螨蜂种的培育 | 第16-17页 |
2 蜜蜂抗螨的机制 | 第17-25页 |
·行为机制 | 第17-19页 |
·梳理行为机制 | 第17-18页 |
·卫生行为机制 | 第18-19页 |
·其它行为机制 | 第19页 |
·生理机制 | 第19-21页 |
·蜜蜂的封盖期 | 第19页 |
·蜜蜂幼虫对瓦螨的吸引力 | 第19-20页 |
·蜂群对蜂螨的繁殖力的影响 | 第20-21页 |
·分子机制的研究进展 | 第21-25页 |
·卫生行为的分子机制 | 第21-23页 |
·梳理行为分子机制 | 第23-24页 |
·蜂螨繁殖抑制分子机制 | 第24-25页 |
3 转录组学研究方法及其在蜜蜂分子生物学中的研究进展 | 第25-29页 |
·转录组学研究方法 | 第25-27页 |
·转录组学在蜜蜂分子生物学中的研究进展 | 第27-29页 |
4 蛋白质组学研究方法及其在蜜蜂分子生物学中的研究进展 | 第29-32页 |
·蛋白质组学研究方法 | 第29-30页 |
·蛋白质组学在蜜蜂分子生物学中的研究进展 | 第30-32页 |
5 本研究的目的和意义 | 第32-34页 |
第二章 实验蜂群的构建 | 第34-43页 |
1 材料和方法 | 第34-38页 |
·实验蜂群的组织 | 第34-35页 |
·实验蜂群的蜂螨胁迫 | 第35页 |
·全同胞姐妹鉴定 | 第35-37页 |
·试剂 | 第37页 |
·主要仪器设备 | 第37页 |
·基因组DNA提取 | 第37-38页 |
·微卫星引物合成PCR扩增检测 | 第38页 |
2 结果与分析 | 第38-41页 |
·东方蜜蜂受蜂螨胁迫情况 | 第38-39页 |
·全同胞姐妹鉴定 | 第39-41页 |
3 讨论 | 第41-43页 |
·实验蜂群的选择 | 第41页 |
·人工感染蜂螨的方式及时间 | 第41-42页 |
·全同胞姐妹的鉴定 | 第42-43页 |
第三章 东方蜜蜂头部组织转录组测序及抗螨相关基因的筛选 | 第43-76页 |
1 材料和方法 | 第43-49页 |
·实验材料 | 第43页 |
·主要试剂 | 第43-44页 |
·主要仪器设备 | 第44页 |
·总RNA提取及检测 | 第44页 |
·转录组测序实验过程 | 第44-45页 |
·数据分析流程 | 第45-49页 |
·产量统计 | 第46页 |
·unigene的组装 | 第46-47页 |
·unigene的功能注释 | 第47-48页 |
·差异表达基因分析 | 第48页 |
·差异表达基因的GO和pathway分析 | 第48-49页 |
2 结果与分析 | 第49-70页 |
·RNA提取及质量检测 | 第50页 |
·产量统计 | 第50-51页 |
·组装结果 | 第51-55页 |
·All-unigene的功能注释 | 第55-58页 |
·数据库比对结果 | 第55-56页 |
·unigenes的COG功能注释 | 第56-57页 |
·unigenes的GO功能注释 | 第57-58页 |
·unigenes KEGG代谢通路分析 | 第58页 |
·差异表达基因(DEGs)分析 | 第58-68页 |
·差异表达基因筛选 | 第58-60页 |
·C~+ VS M~+ | 第59页 |
·C VS M | 第59页 |
·C~+ VS C | 第59页 |
·M~+ VS M | 第59-60页 |
·差异表达基因GO分析 | 第60-61页 |
·差异表达基因GO功能显著性富集分析 | 第61-66页 |
·差异表达基因pathway富集分析 | 第66-68页 |
·抗螨相关的基因分析 | 第68-70页 |
·四组差异基因间的韦恩分析 | 第68-69页 |
·抗螨相关的DEGss的分析 | 第69-70页 |
3 讨论 | 第70-76页 |
·东方蜜蜂转录组测序数据库 | 第70-71页 |
·差异表达基因与抗螨性状相关 | 第71-73页 |
·抗螨候选基因分析 | 第73-76页 |
第四章 东方蜜蜂头部组织的蛋白质组学分析及抗螨相关蛋白质的筛选 | 第76-114页 |
1 材料和方法 | 第76-80页 |
·实验材料 | 第76页 |
·试剂 | 第76-77页 |
·主要仪器设备 | 第77页 |
·蛋白提取及检测 | 第77页 |
·iTRAQ实验过程 | 第77-79页 |
·蛋白质浓度定量(Bradford定量) | 第77-78页 |
·SDS电泳 | 第78页 |
·蛋白质酶解 | 第78页 |
·iTRAQ标记 | 第78页 |
·SCX分离 | 第78页 |
·基于Triple TOF 5600的LC-ESI-MS/MS分析 | 第78-79页 |
·数据分析流程 | 第79-80页 |
2 结果与分析 | 第80-110页 |
·蛋白质检测 | 第80-82页 |
·蛋白质鉴定 | 第82-86页 |
·肽段鉴定质量评估 | 第82-84页 |
·蛋白质鉴定 | 第84-86页 |
·蛋白质功能注释 | 第86-89页 |
·GO功能注释 | 第86-87页 |
·COG功能分类 | 第87-88页 |
·pathway代谢通路注释 | 第88-89页 |
·差异表达蛋白质分析 | 第89-107页 |
·差异表达蛋白的鉴定 | 第89-90页 |
·差异表达蛋白的GO富集分析 | 第90-103页 |
·差异表达蛋白的pathway富集分析 | 第103-105页 |
·差异表达蛋白的韦恩分析 | 第105-107页 |
·蛋白质组与转录组的关联分析 | 第107-110页 |
·蛋白组与转录组结果关联 | 第107页 |
·差异蛋白与转录组差异基因的相关性分析 | 第107-108页 |
·差异蛋白与转录组差异基因表达模式的关联聚类分析 | 第108-110页 |
3 讨论 | 第110-114页 |
·蜂螨胁迫东方蜜蜂头部差异表达蛋白质 | 第110-112页 |
·蛋白质组与转录组的关联分析 | 第112-114页 |
第五章 抗螨相关基因的初步验证 | 第114-143页 |
1 材料和方法 | 第114-118页 |
·实验材料 | 第114页 |
·主要试剂及使用仪器 | 第114-115页 |
·试验方法 | 第115-118页 |
·蜜蜂头部总RNA提取、检测及反转录 | 第115页 |
·实时定量PCR引物设计及目的片段扩增 | 第115-116页 |
·CDs的克隆测序 | 第116-117页 |
·序列分析 | 第117-118页 |
2 结果和分析 | 第118-140页 |
·差异基因的qRT-PCR验证 | 第118-121页 |
·Obp17,Obp18及Mklb-1编码区克隆测序 | 第121-122页 |
·Obp17,Obp18,Obp4及Mklb-1生物信息学分析 | 第122-140页 |
·Obp17的生物信息学分析 | 第122-127页 |
·Obp18的生物信息学分析 | 第127-131页 |
·Obp4的生物信息学分析 | 第131-135页 |
·Mblk-1的生物信息学分析 | 第135-140页 |
3 讨论 | 第140-143页 |
全文结论 | 第143-144页 |
全文创新点 | 第144-145页 |
参考文献 | 第145-165页 |
附录 | 第165-174页 |
致谢 | 第174-175页 |
攻读学位期间发表学术论文(第一作者) | 第175-176页 |