| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 中英文缩略词表 | 第9-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-12页 |
| 第2章 材料和方法 | 第12-25页 |
| ·细胞株 | 第12页 |
| ·主要试剂 | 第12-17页 |
| ·购买试剂 | 第12-13页 |
| ·试验方法 | 第13-16页 |
| ·主要仪器设备 | 第16-17页 |
| ·细胞的传代和培养 | 第17页 |
| ·靶向 Notch1 基因 shRNA 重组质粒的构建 | 第17-18页 |
| ·瞬时转染靶向 Notch1 的 shRNA 重组质粒 | 第18页 |
| ·MG63 细胞对潮霉素 B 的敏感性测试 | 第18-19页 |
| ·稳定转染靶向 Notch1 的 shRNA 重组质粒 | 第19页 |
| ·实时定量 PCR(qRT-PCR) | 第19-20页 |
| ·Western blotting | 第20-25页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第20-21页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第21页 |
| ·蛋白变性 | 第21页 |
| ·制胶 | 第21页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第21-22页 |
| ·转膜 | 第22页 |
| ·免疫杂交 | 第22-23页 |
| ·化学发光，显影、定影 | 第23页 |
| ·MTT 法检测 MG63 细胞增殖情况 | 第23-24页 |
| ·细胞周期的检测 | 第24页 |
| ·细胞凋亡的检测 | 第24页 |
| ·统计学分析 | 第24-25页 |
| 第3章 结果 | 第25-32页 |
| ·重组质粒 shRNA 的鉴定 | 第25-26页 |
| ·shRNA 重组质粒对 Notch1 基因表达的抑制作用 | 第26-27页 |
| ·qRT-PCR 检测 Notch1 mRNA 的表达 | 第26-27页 |
| ·Western blotting 检测 Notch1 蛋白的表达 | 第27页 |
| ·Notch1 信号通路阻断后对 MG63 细胞生物学行为的影响 | 第27-31页 |
| ·筛选 Notch1 稳定低表达的细胞株 | 第27页 |
| ·MTT 检测阻断 Notch1 信号通路对 MG63 细胞增殖的影响 | 第27-28页 |
| ·流式细胞学检测阻断 Notch1 信号通路对 MG63 细胞周期的影响 | 第28-29页 |
| ·流式细胞学检测阻断 Notch1 信号通路对 MG63 细胞凋亡的影响 | 第29-31页 |
| ·Notch1 信号通路阻断后 MG63 细胞 Bax 和 Bcl-2 蛋白表达的变化 | 第31-32页 |
| 第4章 讨论 | 第32-35页 |
| 第5章 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-38页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第38-39页 |
| 综述 | 第39-45页 |
| 参考文献 | 第44-45页 |
