中文摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 前言 | 第8-15页 |
1.1 C-反应蛋白简介 | 第8页 |
1.2 CRP的结构 | 第8-9页 |
1.3 CRP的生物学功能 | 第9-11页 |
1.3.1 与钙离子的结合 | 第9-10页 |
1.3.2 与磷酸胆碱的结合 | 第10页 |
1.3.3 与C1q和其他补体成分的结合 | 第10页 |
1.3.4 与免疫球蛋白Fc的结合 | 第10页 |
1.3.5 与脂筏胆固醇富集区结合后的变构 | 第10-11页 |
1.3.6 半胱氨酸开关的体内还原 | 第11页 |
1.3.7 细胞间的相互作用 | 第11页 |
1.4 蛋白质的折叠和去折叠 | 第11-13页 |
1.5 原子力显微镜与蛋白质的研究 | 第13页 |
1.6 分子动力学模拟 | 第13-14页 |
1.7 本研究选题依据和意义 | 第14-15页 |
第二章 材料和方法 | 第15-31页 |
2.1 试剂 | 第15页 |
2.2 实验方法 | 第15-31页 |
2.2.1 CRP亚基全长及截短突变体多次串联重复载体的构建 | 第15-21页 |
2.2.2 重组蛋白的表达和纯化 | 第21-22页 |
2.2.3 蛋白的凝胶电泳 | 第22-23页 |
2.2.4 蛋白的染色 | 第23页 |
2.2.5 DH5α、Rosetta感受态细胞的制备 | 第23页 |
2.2.6 部分其他试剂的配制 | 第23-24页 |
2.2.7 分子动力学模拟 | 第24-31页 |
第三章 结果和分析 | 第31-61页 |
3.1 多次串联重复载体的构建及蛋白的表达纯化 | 第31-45页 |
3.1.1 在C端引入2个半胱氨酸的载体的构建及表达 | 第32-39页 |
3.1.2 在C端引入 6X His-tag的载体的构建 | 第39-40页 |
3.1.3 在CRP间引入加长linker的载体的构建及表达 | 第40-45页 |
3.2 分子动力学模拟 | 第45-61页 |
3.2.1 常规分子动力学模拟 | 第45-56页 |
3.2.2 拉伸分子动力学模拟 | 第56-61页 |
第四章 讨论 | 第61-64页 |
参考文献 | 第64-69页 |
致谢 | 第69页 |