| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-20页 |
| 1 杧果炭疽病 | 第11-13页 |
| ·杧果炭疽病的重要性 | 第11-12页 |
| ·杧果炭疽病菌 | 第12页 |
| ·杧果炭疽病的发生特点 | 第12页 |
| ·杧果炭疽病的防治 | 第12-13页 |
| 2 杧果炭疽病菌的分子病理研究进展 | 第13页 |
| 3 丝状菌物 DNA 转化的研究 | 第13-18页 |
| ·研究现状 | 第13-14页 |
| ·菌物 DNA 的遗传转化 | 第14-17页 |
| ·选择标记 | 第14-15页 |
| ·外源 DNA 导入丝状菌物受体的方法 | 第15-17页 |
| （1） PEG-CaCl2介导转化法 | 第15页 |
| （2）农杆菌介导转化法（ATMT） | 第15-16页 |
| （3）醋酸锂转化法 | 第16页 |
| （4）限制性内切酶介导转化法（REMI） | 第16页 |
| （5）电激转化法 | 第16页 |
| （6）基因枪转化法 | 第16-17页 |
| ·遗传转化类型 | 第17页 |
| ·转化子的遗传稳定性 | 第17-18页 |
| 4 绿色荧光蛋白基因在丝状菌物中的应用 | 第18页 |
| 5 研究目的和意义 | 第18-20页 |
| 第二章 杧果炭疽病菌的鉴定与培养特性研究 | 第20-31页 |
| 1 材料与方法 | 第20-26页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·方法 | 第21-26页 |
| ·病菌分离、纯化 | 第21页 |
| ·孢子的产生及附着胞的形成 | 第21-22页 |
| ·分子鉴定 | 第22-25页 |
| ·CTAB 法提取分离株的基因组 DNA | 第22-23页 |
| ·分离株基因的电泳检测及切胶纯化回收 | 第23-24页 |
| ·分离株基因组 DNA 连接到克隆载体 pMD 18-T Vector 上 | 第24页 |
| ·连接产物转化至大肠杆菌 DH5α中 | 第24-25页 |
| ·阳性克隆的鉴定筛选 | 第25页 |
| ·分离株的致病性测定 | 第25-26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-30页 |
| ·病样症状与分离株的菌落形态 | 第26页 |
| ·分离株的分生孢子及附着胞 | 第26-28页 |
| ·孢子的形成及其大小 | 第26-27页 |
| ·孢子萌发及附着胞的形成 | 第27-28页 |
| ·分离株的分子鉴定 | 第28-29页 |
| ·PCR 鉴定分离株 | 第28页 |
| ·rDNA-ITS 区序列比对 | 第28-29页 |
| ·分离株的致病性 | 第29-30页 |
| 3 小结与讨论 | 第30-31页 |
| 第三章 杧果炭疽病菌遗传转化体系的构建 | 第31-42页 |
| 1.材料与方法 | 第31-35页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-35页 |
| ·原生质体制备 | 第32-33页 |
| ·质粒的提取 | 第33-34页 |
| ·质粒验证 | 第34页 |
| ·DNA 的转化 | 第34页 |
| ·MCGW 与 MCGT 的抗性鉴定 | 第34-35页 |
| ·MCGT 的分子鉴定 | 第35页 |
| ·MCGT 的荧光检测 | 第35页 |
| ·MCGT 的荧光检测 | 第35页 |
| ·MCGT 的生长稳定性分析 | 第35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-40页 |
| ·原生质体的收集 | 第35-36页 |
| ·质粒 DNA 的验证 | 第36页 |
| ·GFP 基因的转化 | 第36-37页 |
| ·对 HmB 的抗性鉴定 | 第37-39页 |
| ·MCGW 菌株对 HmB 的敏感性 | 第37-38页 |
| ·MCGT 对 HmB 的敏感性 | 第38-39页 |
| ·MCGT 的分子鉴定 | 第39-40页 |
| ·MCGT 的荧光鉴定 | 第40页 |
| ·MCGT 的荧光检测 | 第40页 |
| ·MCGT 的生长稳定性分析 | 第40页 |
| 3 小结与讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 杧果炭疽病菌 GFP 基因标记菌株的生物学特性 | 第42-55页 |
| 1 材料与方法 | 第42-46页 |
| ·试剂及材料 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-46页 |
| ·MCGW 的生长特性 | 第42-43页 |
| ·MCGT 的菌丝形态、孢子大小和附着胞形态 | 第43页 |
| ·MCGT 的呼吸速率 | 第43-44页 |
| ·转入 GFP 基因对细胞膜透性的影响 | 第44-45页 |
| ·MCGT 电解质渗透量的测定 | 第44页 |
| ·MCGT 还原糖渗透量的测定 | 第44-45页 |
| ·MCGT 蛋白质外渗量的测定 | 第45页 |
| ·转入 GFP 基因对致病性的影响 | 第45页 |
| ·活体花朵幼果接种研究致病性 | 第45页 |
| ·离体杧果果实及叶片接种的致病性研究 | 第45页 |
| ·转入 GFP 基因对侵染特性的影响 | 第45页 |
| ·MCGT 侵入杧果后的荧光稳定性 | 第45-46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-54页 |
| ·MCGT 的菌丝生长速度 | 第46页 |
| ·MCGW 与 MCGT 的形态特征比较 | 第46-47页 |
| ·MCGT 的呼吸速率 | 第47-48页 |
| ·转入 GFP 基因对细胞膜透性的影响 | 第48-49页 |
| ·MCGT 的电解质渗透量 | 第48-49页 |
| ·MCGT 的还原糖渗透量 | 第49页 |
| ·MCGT 的蛋白质外渗量 | 第49页 |
| ·MCGT 的致病性 | 第49-52页 |
| ·供试菌株活体接种的致病性 | 第49-51页 |
| ·供试菌株离体接种的致病性 | 第51-52页 |
| ·MCGT 在杧果果实的扩展特性 | 第52-53页 |
| ·MCGT 接种再分离的荧光稳定性 | 第53-54页 |
| 3 小结与讨论 | 第54-55页 |
| 第五章 总结与前景展望 | 第55-57页 |
| 1 总结 | 第55-56页 |
| 2 前景展望 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62页 |