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抗COX-2人源单链抗体的原核表达、纯化及活性分析

内容提要第1-7页
第一章 前言第7-16页
   ·COX-2 的特性第7-10页
     ·COX-2 的发现与生物学特性第7页
     ·COX-2 的表达调控第7-8页
     ·COX-2 蛋白的空间结构第8页
     ·COX 的催化活性第8-10页
   ·COX-2 与肿瘤第10-11页
   ·COX-2 抑制剂的研究现状第11-13页
     ·COX 抑制剂的发展第11-12页
     ·COX-2 抑制剂与肿瘤治疗第12页
     ·COX-2 抑制剂的局限性第12-13页
   ·单链抗体与肿瘤治疗第13-15页
     ·单链抗体的特征第13-14页
     ·单链抗体的来源第14页
     ·单链抗体在肿瘤治疗的应用和前景第14-15页
   ·本研究的立题依据和意义第15-16页
第二章 材料与方法第16-27页
   ·材料第16-17页
     ·质粒第16页
     ·菌株第16页
     ·细胞株第16页
     ·主要仪器第16页
     ·主要试剂及配制第16-17页
   ·实验方法第17-27页
     ·重组人 COX-2 蛋白的制备第17-23页
     ·抗 COX-2 单链抗体的可溶性表达与纯化第23-24页
     ·抗 COX-2 单链抗体的活性分析第24-27页
第三章 实验结果第27-39页
   ·重组人 COX-2 蛋白的制备第27-31页
     ·pET28b-COX-2 重组表达载体的构建及鉴定第27-28页
     ·人 COX-2 基因在大肠杆菌中的诱导表达第28页
     ·重组人 COX-2 蛋白的纯化与复性第28页
     ·ELISA 法鉴定重组人 COX-2 蛋白第28-30页
     ·Western blot 法鉴定重组人 COX-2 蛋白第30-31页
   ·抗 COX-2 单链抗体的可溶性表达与纯化第31-32页
     ·抗 COX-2 单链抗体的可溶性分泌表达第31-32页
     ·可溶性表达的抗 COX-2 单链抗体的纯化与鉴定第32页
   ·抗 COX-2 单链抗体的活性分析第32-39页
     ·ELISA 法鉴定纯化的抗 COX-2 单链抗体与重组人 COX-2 的结合活性第32-34页
     ·Western blot 分析纯化的抗 COX-2 单链抗体与重组人 COX-2 的结合活性第34-35页
     ·抗 COX-2 多克隆抗体与抗 COX-2 单链抗体竞争性结合 COX-2 蛋白第35页
     ·抗 COX-2 单链抗体特异性结合 COX-2第35-36页
     ·抗 COX-2 单链抗体亲和力的测定第36-37页
     ·抗 COX-2 单链抗体与肿瘤细胞内 COX-2 蛋白的相互作用分析第37-39页
第四章 讨论第39-41页
   ·COX-2 蛋白的纯化与复性第39页
   ·抗 COX-2 人源单链抗体的结合活性及意义第39-41页
第五章 结论第41-42页
参考文献第42-51页
中文摘要第51-53页
Abstract第53-55页
致谢第55页

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