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乏氧诱导因子1α在电离辐射诱导人乳腺癌细胞自噬中的作用研究

前言第1-5页
中文摘要第5-9页
Abstract第9-19页
第1章 文献综述第19-29页
   ·肿瘤乏氧细胞与乏氧诱导因子第19-21页
     ·肿瘤乏氧细胞第19页
     ·乏氧诱导因子第19-20页
     ·HIFα与电离辐射第20-21页
     ·乏氧与自噬第21页
   ·细胞自噬第21-27页
     ·自噬的来源第21页
     ·自噬的内涵第21-22页
     ·自噬体形成的分子机制第22-23页
     ·自噬相关信号调控第23-25页
     ·自噬与凋亡第25页
     ·自噬与电离辐射第25-26页
     ·影响自噬的相关分子第26-27页
   ·本课题研究的意义及展望第27-29页
第2章 材料与方法第29-43页
   ·主要试剂与器材第29-31页
     ·试剂第29-30页
     ·主要器材第30-31页
   ·细胞培养与照射条件第31-32页
     ·细胞培养第31-32页
     ·照射条件第32页
   ·细胞培养试剂配制第32页
     ·DMEM 培养液第32页
     ·小牛血清的配制第32页
     ·胰酶配制第32页
   ·细胞冻存及复苏第32-33页
   ·细胞模型的建立第33-37页
     ·pSUPER-Retro-puro 双酶切第33页
     ·pSUPER-HIF-1α Ri 慢病毒载体的构建第33-34页
     ·感受态 DH5α的制备第34-35页
     ·转化感受态细胞第35-36页
     ·反转录病毒包装(磷酸钙共沉淀转染方法)第36-37页
   ·克隆形成第37-38页
   ·单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverine,MDC)荧光染色测自噬率第38页
   ·Hoechst 33342 和碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法检测细胞凋亡发生率第38页
   ·蛋白质免疫印记法(Western blot)第38-42页
     ·主要试剂的配制第38-40页
     ·细胞总蛋白的提取第40-41页
     ·蛋白浓度测定第41页
     ·SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶第41页
     ·方法步骤第41-42页
   ·统计学处理第42-43页
第3章 实验结果第43-56页
   ·乏氧诱导 HIF-1α表达和自噬发生第43-44页
   ·MCF7 HIF-1α Ri 细胞模型建立第44-46页
   ·HIF-1α促进乏氧和电离辐射诱导的人乳腺癌 MCF-7 细胞自噬第46-49页
   ·HIF-1α增加人乳腺癌 MCF-7 细胞在乏氧条件下的辐射抗性第49-50页
   ·沉默 HIF-1α增加人乳腺癌 MCF-7 细胞在乏氧条件下的辐射敏感性第50页
   ·HIF-1α在电离辐射诱导人乳腺癌细胞自噬中的作用机制第50-52页
   ·HIF-1α不影响乏氧和电离辐射诱导的 MCF-7 细胞凋亡第52-56页
第4章 讨论第56-61页
   ·乏氧诱导人乳腺癌 MCF-7 细胞 HIF-1α的表达第56-57页
   ·HIF-1α与辐射诱导的 MCF-7 细胞自噬第57-58页
   ·人乳腺癌 MCF-7 细胞在乏氧条件下的自噬与辐射敏感性第58-59页
   ·乏氧诱导因子 1α在电离辐射诱导人乳腺癌细胞自噬中的机制第59-60页
   ·HIF-1α对人乳腺癌 MCF-7 细胞凋亡的影响第60-61页
第5章 结论第61-62页
参考文献第62-72页
攻读硕士学位期间发表的学术论文及去的的科研成果第72-73页
致谢第73页

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