前言 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-9页 |
Abstract | 第9-19页 |
第1章 文献综述 | 第19-29页 |
·肿瘤乏氧细胞与乏氧诱导因子 | 第19-21页 |
·肿瘤乏氧细胞 | 第19页 |
·乏氧诱导因子 | 第19-20页 |
·HIFα与电离辐射 | 第20-21页 |
·乏氧与自噬 | 第21页 |
·细胞自噬 | 第21-27页 |
·自噬的来源 | 第21页 |
·自噬的内涵 | 第21-22页 |
·自噬体形成的分子机制 | 第22-23页 |
·自噬相关信号调控 | 第23-25页 |
·自噬与凋亡 | 第25页 |
·自噬与电离辐射 | 第25-26页 |
·影响自噬的相关分子 | 第26-27页 |
·本课题研究的意义及展望 | 第27-29页 |
第2章 材料与方法 | 第29-43页 |
·主要试剂与器材 | 第29-31页 |
·试剂 | 第29-30页 |
·主要器材 | 第30-31页 |
·细胞培养与照射条件 | 第31-32页 |
·细胞培养 | 第31-32页 |
·照射条件 | 第32页 |
·细胞培养试剂配制 | 第32页 |
·DMEM 培养液 | 第32页 |
·小牛血清的配制 | 第32页 |
·胰酶配制 | 第32页 |
·细胞冻存及复苏 | 第32-33页 |
·细胞模型的建立 | 第33-37页 |
·pSUPER-Retro-puro 双酶切 | 第33页 |
·pSUPER-HIF-1α Ri 慢病毒载体的构建 | 第33-34页 |
·感受态 DH5α的制备 | 第34-35页 |
·转化感受态细胞 | 第35-36页 |
·反转录病毒包装(磷酸钙共沉淀转染方法) | 第36-37页 |
·克隆形成 | 第37-38页 |
·单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverine,MDC)荧光染色测自噬率 | 第38页 |
·Hoechst 33342 和碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法检测细胞凋亡发生率 | 第38页 |
·蛋白质免疫印记法(Western blot) | 第38-42页 |
·主要试剂的配制 | 第38-40页 |
·细胞总蛋白的提取 | 第40-41页 |
·蛋白浓度测定 | 第41页 |
·SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶 | 第41页 |
·方法步骤 | 第41-42页 |
·统计学处理 | 第42-43页 |
第3章 实验结果 | 第43-56页 |
·乏氧诱导 HIF-1α表达和自噬发生 | 第43-44页 |
·MCF7 HIF-1α Ri 细胞模型建立 | 第44-46页 |
·HIF-1α促进乏氧和电离辐射诱导的人乳腺癌 MCF-7 细胞自噬 | 第46-49页 |
·HIF-1α增加人乳腺癌 MCF-7 细胞在乏氧条件下的辐射抗性 | 第49-50页 |
·沉默 HIF-1α增加人乳腺癌 MCF-7 细胞在乏氧条件下的辐射敏感性 | 第50页 |
·HIF-1α在电离辐射诱导人乳腺癌细胞自噬中的作用机制 | 第50-52页 |
·HIF-1α不影响乏氧和电离辐射诱导的 MCF-7 细胞凋亡 | 第52-56页 |
第4章 讨论 | 第56-61页 |
·乏氧诱导人乳腺癌 MCF-7 细胞 HIF-1α的表达 | 第56-57页 |
·HIF-1α与辐射诱导的 MCF-7 细胞自噬 | 第57-58页 |
·人乳腺癌 MCF-7 细胞在乏氧条件下的自噬与辐射敏感性 | 第58-59页 |
·乏氧诱导因子 1α在电离辐射诱导人乳腺癌细胞自噬中的机制 | 第59-60页 |
·HIF-1α对人乳腺癌 MCF-7 细胞凋亡的影响 | 第60-61页 |
第5章 结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-72页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文及去的的科研成果 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |