| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-23页 |
| ·昆虫免疫 | 第10-11页 |
| ·抗菌蛋白 | 第11-16页 |
| ·抗菌蛋白来源 | 第11-12页 |
| ·抗菌蛋白分子结构 | 第12页 |
| ·抗菌蛋白作用机制 | 第12-13页 |
| ·抗菌蛋白生物活性 | 第13-15页 |
| ·抗菌蛋白的应用 | 第15-16页 |
| ·存在的问题 | 第16页 |
| ·抗菌蛋白X-Tox研究进展 | 第16-19页 |
| ·抗菌蛋白X-Tox的研究背景 | 第17页 |
| ·草地贪夜蛾抗菌蛋白11-Tox | 第17-19页 |
| ·大蜡螟抗菌蛋白6-Tox | 第19页 |
| ·重组蛋白表达系统的选择 | 第19-22页 |
| ·原核表达系统 | 第19-20页 |
| ·酵母表达系统 | 第20页 |
| ·昆虫细胞表达系统 | 第20-21页 |
| ·哺乳动物细胞表达系统 | 第21页 |
| ·转基因表达系统 | 第21-22页 |
| ·研究目的及意义 | 第22-23页 |
| 2 柞蚕6-Tox基因的克隆及生物信息学分析 | 第23-42页 |
| ·引言 | 第23页 |
| ·实验材料、试剂与仪器 | 第23-24页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·实验试剂 | 第23-24页 |
| ·实验仪器 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-30页 |
| ·柞蚕蛹的诱导及RNA提取 | 第24-26页 |
| ·柞蚕6-Tox基因的克隆 | 第26-29页 |
| ·6-Tox基因的生物信息学分析 | 第29-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-40页 |
| ·柞蚕脂肪体总RNA的提取及检测 | 第30-31页 |
| ·柞蚕6-Tox基因的克隆 | 第31-32页 |
| ·酶切鉴定 | 第32页 |
| ·6-Tox基因的生物信息学分析 | 第32-40页 |
| ·讨论 | 第40页 |
| ·小结 | 第40-42页 |
| 3 柞蚕6-Tox基因的表达谱分析 | 第42-52页 |
| ·引言 | 第42页 |
| ·实验材料、试剂与仪器 | 第42-43页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·实验试剂 | 第42-43页 |
| ·实验仪器 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-46页 |
| ·实时定量PCR引物的设计 | 第43-44页 |
| ·柞蚕蛹的诱导 | 第44-45页 |
| ·柞蚕蛹不同组织RNA的提取 | 第45页 |
| ·Real-time cDNA模板的制备 | 第45页 |
| ·6-Tox基因的Real-time PCR分析 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-50页 |
| ·柞蚕蛹不同组织RNA的提取 | 第46页 |
| ·Real-time PCR引物特异性分析 | 第46-47页 |
| ·6-Tox在不同微生物处理下的组织表达谱分析 | 第47-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 4 柞蚕6-Tox基因原核表达载体的构建及表达纯化研究 | 第52-68页 |
| ·引言 | 第52页 |
| ·实验材料、试剂与仪器 | 第52-53页 |
| ·实验材料 | 第52页 |
| ·实验试剂 | 第52-53页 |
| ·实验仪器 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-60页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第53-55页 |
| ·6-Tox基因的表达 | 第55-56页 |
| ·蛋白SDS-PAGE鉴定 | 第56-57页 |
| ·表达条件的优化 | 第57-58页 |
| ·的蛋白可溶性分析 | 第58-59页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第59-60页 |
| ·抑菌活性的检测 | 第60页 |
| ·结果与分析 | 第60-66页 |
| ·重组质粒pGEX-6P-1-6-Tox的双酶切鉴定 | 第60-62页 |
| ·重组质粒pGEX-6P-1-6-Tox的诱导表达 | 第62页 |
| ·诱导条件的优化 | 第62-64页 |
| ·目的蛋白可溶性分析 | 第64-65页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第65-66页 |
| ·抑菌活性鉴定 | 第66页 |
| ·讨论 | 第66-67页 |
| ·小结 | 第67-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
