| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-20页 |
| ·FGF5基因的研究现状 | 第9-13页 |
| ·FGF家族 | 第9-10页 |
| ·FGF5基因 | 第10-13页 |
| ·RNA干扰技术 | 第13-16页 |
| ·RNA干扰研究进展 | 第13-14页 |
| ·RNA干扰的分子作用机制 | 第14-15页 |
| ·RNAi的作用特点 | 第15页 |
| ·RNAi的生物学意义 | 第15-16页 |
| ·shRNA干扰 | 第16页 |
| ·RNA干扰的应用 | 第16页 |
| ·动物转基因技术 | 第16-20页 |
| ·动物转基因技术的研究进展 | 第17页 |
| ·转基因动物的制备方法 | 第17-18页 |
| ·转基因动物的检测方法 | 第18-19页 |
| ·动物转基因技术的应用 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20页 |
| 2 绒山羊胎儿皮肤成纤维细胞的体外培养 | 第20-26页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-24页 |
| ·胎儿皮肤成纤维细胞的原代培养 | 第21-22页 |
| ·细胞的传代培养和纯化 | 第22页 |
| ·细胞冻存与复苏 | 第22页 |
| ·绒山羊胎儿成纤维细胞生长曲线的绘制 | 第22-23页 |
| ·PCR鉴定胎儿性别 | 第23-24页 |
| ·结果与分析 | 第24-26页 |
| ·绒山羊胎儿皮肤成纤维细胞的形态学特征 | 第24-25页 |
| ·成纤维细胞生长曲线的绘制 | 第25页 |
| ·胎儿性别鉴定结果 | 第25-26页 |
| ·讨论 | 第26页 |
| 3 绒山羊胎儿成纤维细胞的转染及鉴定 | 第26-38页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·实验试剂 | 第27页 |
| ·仪器设备和耗材 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-33页 |
| ·pGCsilencer~(TM)U6/Neo/GFP/RNAi载体的前期处理 | 第27-29页 |
| ·转基因细胞的建立 | 第29-31页 |
| ·转基因细胞的鉴定 | 第31-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-37页 |
| ·质粒的检测结果 | 第33页 |
| ·G418对GFFCs的筛选 | 第33-34页 |
| ·细胞的转染效率检测 | 第34页 |
| ·单克隆细胞 | 第34-35页 |
| ·转基因细胞的鉴定结果 | 第35-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 4 山羊体细胞核移植 | 第38-42页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·实验试剂和耗材 | 第38页 |
| ·实验设备 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-40页 |
| ·卵巢卵母细胞的采集和体外成熟 | 第38-39页 |
| ·受体卵母细胞的准备 | 第39页 |
| ·供体细胞的准备 | 第39页 |
| ·核移植制备重构胚 | 第39页 |
| ·融合 | 第39页 |
| ·重构胚的激活、发育培养及胚胎移植 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |