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草鱼感染小瓜虫后病理及其MHⅡ-DAB1基因的多态、表达的研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-14页
第一章 文献综述第14-22页
 前言第14页
 1 小瓜虫病研究现状第14-18页
   ·淡水小瓜虫第14-15页
   ·淡水小瓜虫生活史第15页
   ·淡水小瓜虫病症状及病理学研究第15-16页
   ·淡水小瓜虫病的防治第16-17页
   ·淡水小瓜虫病的免疫学研究第17-18页
 2 硬骨鱼类MHⅡ基因研究现状第18-21页
   ·硬骨鱼类MH第18页
   ·硬骨鱼类MHⅡ类基因的结构特征第18-19页
   ·硬骨鱼类MHⅡ类分子的结构特征第19页
   ·硬骨鱼类MHⅡ类基因的多态性第19-20页
   ·硬骨鱼类MHⅡ类基因与抗病力的关系第20-21页
 3 存在问题第21页
 4 目的意义第21-22页
第二章 草鱼小瓜虫病组织病理学观察第22-34页
 引言第22页
 1 实验材料第22-23页
   ·实验鱼第22页
   ·实验虫源第22页
   ·主要实验试剂和仪器第22-23页
 2 试验方法第23-25页
   ·小瓜虫分离第23页
   ·小瓜虫幼虫的计数第23页
   ·草鱼的感染实验第23页
   ·组织病理观察第23-24页
     ·组织病理取样第23-24页
     ·组织病理切片制作第24页
   ·透射电镜样品观察第24-25页
     ·透射电镜样品取样第24页
     ·透射电镜样品切片制作第24-25页
 3 实验结果第25-32页
   ·淡水小瓜虫的分离鉴定第25页
   ·草鱼淡水小瓜虫病的临床症状第25页
   ·病理变化观察第25-32页
     ·鳃病理变化第25-26页
     ·皮肤病理变化第26页
     ·肌肉病理变化第26页
     ·肠病理变化第26页
     ·肝脏病理变化第26页
     ·脾脏病理变化第26-32页
 4 讨论第32-34页
第三章 小瓜虫对草鱼MHⅡ-DAB1基因的影响第34-55页
 引言第34页
 1 实验材料第34-36页
   ·实验鱼第34页
   ·实验虫源第34页
   ·主要实验仪器第34-35页
   ·主要试剂和试剂盒第35页
   ·所用溶剂及其器具第35-36页
 2 试验方法第36-43页
   ·小瓜虫感染实验第36页
   ·样品的制备第36-38页
     ·DNA的抽提第36页
     ·RNA的提取第36-38页
       ·RNA的提取第36-37页
       ·RNA中痕量DNA的去除第37页
       ·总RNA浓度、纯度的检测第37页
       ·总RNA的反转录第37-38页
   ·草鱼MHⅡ-DAB1基因的多态性检测第38-41页
     ·DAB1基因外显子2的克隆第38页
     ·PCR产物的纯化第38-39页
     ·连接反应第39-40页
     ·感受态细胞的制备第40页
     ·重组质粒的转化第40页
     ·重组质粒的提取第40-41页
     ·重组质粒的测序第41页
   ·MHⅡ-DAB1基因表达第41-43页
     ·MHⅡ-DAB1基因引物的设计第41-42页
     ·MHⅡ-DAB1基因的克隆鉴定第42页
       ·PCR反应第42页
       ·PCR产物的纯化第42页
       ·连接反应第42页
       ·感受态细胞的制备第42页
       ·重组质粒的转化第42页
       ·重组质粒的提取第42页
       ·重组质粒的测序第42页
     ·MHⅡ-DAB1基因表达第42-43页
     ·实时荧光定量PCR数据处理第43页
 3 实验结果第43-53页
   ·草鱼MHⅡ-DAB1基因外显子2多态性分析第43-49页
     ·DAB1等位基因命名及多态位点的变异第43-44页
     ·DAB1基因的碱基组成及核苷酸的替换第44-45页
     ·DAB1基因外显子2密码子的使用偏倚性及使用频率第45-46页
     ·DAB1基因外显子2的氨基酸分析第46页
     ·DAB1等位基因进化树的构建第46-48页
     ·DAB1基因对小瓜虫的抗病力第48-49页
   ·草鱼MHⅡ-DAB1基因定量表达第49-53页
     ·总RNA的检测第49页
     ·克隆鉴定第49-50页
     ·从溶解曲线验证实时定量引物的特异性第50页
     ·MHⅡ-DAB1基因在各组织的表达第50-53页
 4 讨论第53-55页
总结第55-56页
参考文献第56-66页
致谢第66-67页
附录第67-68页
攻读学位期间发表的学术论文目录第68页

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