中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-22页 |
前言 | 第14页 |
1 小瓜虫病研究现状 | 第14-18页 |
·淡水小瓜虫 | 第14-15页 |
·淡水小瓜虫生活史 | 第15页 |
·淡水小瓜虫病症状及病理学研究 | 第15-16页 |
·淡水小瓜虫病的防治 | 第16-17页 |
·淡水小瓜虫病的免疫学研究 | 第17-18页 |
2 硬骨鱼类MHⅡ基因研究现状 | 第18-21页 |
·硬骨鱼类MH | 第18页 |
·硬骨鱼类MHⅡ类基因的结构特征 | 第18-19页 |
·硬骨鱼类MHⅡ类分子的结构特征 | 第19页 |
·硬骨鱼类MHⅡ类基因的多态性 | 第19-20页 |
·硬骨鱼类MHⅡ类基因与抗病力的关系 | 第20-21页 |
3 存在问题 | 第21页 |
4 目的意义 | 第21-22页 |
第二章 草鱼小瓜虫病组织病理学观察 | 第22-34页 |
引言 | 第22页 |
1 实验材料 | 第22-23页 |
·实验鱼 | 第22页 |
·实验虫源 | 第22页 |
·主要实验试剂和仪器 | 第22-23页 |
2 试验方法 | 第23-25页 |
·小瓜虫分离 | 第23页 |
·小瓜虫幼虫的计数 | 第23页 |
·草鱼的感染实验 | 第23页 |
·组织病理观察 | 第23-24页 |
·组织病理取样 | 第23-24页 |
·组织病理切片制作 | 第24页 |
·透射电镜样品观察 | 第24-25页 |
·透射电镜样品取样 | 第24页 |
·透射电镜样品切片制作 | 第24-25页 |
3 实验结果 | 第25-32页 |
·淡水小瓜虫的分离鉴定 | 第25页 |
·草鱼淡水小瓜虫病的临床症状 | 第25页 |
·病理变化观察 | 第25-32页 |
·鳃病理变化 | 第25-26页 |
·皮肤病理变化 | 第26页 |
·肌肉病理变化 | 第26页 |
·肠病理变化 | 第26页 |
·肝脏病理变化 | 第26页 |
·脾脏病理变化 | 第26-32页 |
4 讨论 | 第32-34页 |
第三章 小瓜虫对草鱼MHⅡ-DAB1基因的影响 | 第34-55页 |
引言 | 第34页 |
1 实验材料 | 第34-36页 |
·实验鱼 | 第34页 |
·实验虫源 | 第34页 |
·主要实验仪器 | 第34-35页 |
·主要试剂和试剂盒 | 第35页 |
·所用溶剂及其器具 | 第35-36页 |
2 试验方法 | 第36-43页 |
·小瓜虫感染实验 | 第36页 |
·样品的制备 | 第36-38页 |
·DNA的抽提 | 第36页 |
·RNA的提取 | 第36-38页 |
·RNA的提取 | 第36-37页 |
·RNA中痕量DNA的去除 | 第37页 |
·总RNA浓度、纯度的检测 | 第37页 |
·总RNA的反转录 | 第37-38页 |
·草鱼MHⅡ-DAB1基因的多态性检测 | 第38-41页 |
·DAB1基因外显子2的克隆 | 第38页 |
·PCR产物的纯化 | 第38-39页 |
·连接反应 | 第39-40页 |
·感受态细胞的制备 | 第40页 |
·重组质粒的转化 | 第40页 |
·重组质粒的提取 | 第40-41页 |
·重组质粒的测序 | 第41页 |
·MHⅡ-DAB1基因表达 | 第41-43页 |
·MHⅡ-DAB1基因引物的设计 | 第41-42页 |
·MHⅡ-DAB1基因的克隆鉴定 | 第42页 |
·PCR反应 | 第42页 |
·PCR产物的纯化 | 第42页 |
·连接反应 | 第42页 |
·感受态细胞的制备 | 第42页 |
·重组质粒的转化 | 第42页 |
·重组质粒的提取 | 第42页 |
·重组质粒的测序 | 第42页 |
·MHⅡ-DAB1基因表达 | 第42-43页 |
·实时荧光定量PCR数据处理 | 第43页 |
3 实验结果 | 第43-53页 |
·草鱼MHⅡ-DAB1基因外显子2多态性分析 | 第43-49页 |
·DAB1等位基因命名及多态位点的变异 | 第43-44页 |
·DAB1基因的碱基组成及核苷酸的替换 | 第44-45页 |
·DAB1基因外显子2密码子的使用偏倚性及使用频率 | 第45-46页 |
·DAB1基因外显子2的氨基酸分析 | 第46页 |
·DAB1等位基因进化树的构建 | 第46-48页 |
·DAB1基因对小瓜虫的抗病力 | 第48-49页 |
·草鱼MHⅡ-DAB1基因定量表达 | 第49-53页 |
·总RNA的检测 | 第49页 |
·克隆鉴定 | 第49-50页 |
·从溶解曲线验证实时定量引物的特异性 | 第50页 |
·MHⅡ-DAB1基因在各组织的表达 | 第50-53页 |
4 讨论 | 第53-55页 |
总结 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
附录 | 第67-68页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第68页 |