中文摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 引言 | 第13-28页 |
·玉米背景介绍 | 第13页 |
·Ac-Ds 转座子 | 第13-16页 |
·玉米转座子的发现 | 第13-14页 |
·转座子的类型 | 第14页 |
·三种转座因子的特点 | 第14页 |
·Ac/Ds 转座子系统 | 第14-15页 |
·Ac/Ds 二元转座系统 | 第15页 |
·玉米内源 Ac/Ds 转座系统 | 第15-16页 |
·玉米转基因技术 | 第16-22页 |
·农杆菌转化技术 | 第16-18页 |
·Ti 质粒的分类 | 第16页 |
·Ti 质粒的结构和功能 | 第16-17页 |
·Ti 重组质粒的构建 | 第17页 |
·Ti 质粒转化过程 | 第17-18页 |
·Ti 质粒介导的转化技术 | 第18页 |
·基因枪法 | 第18-22页 |
·基因枪法的发展 | 第19页 |
·基因枪的优缺点 | 第19-20页 |
·基因枪转化的参数 | 第20-21页 |
·片段 DNA 基因枪转化 | 第21页 |
·基因枪共转化 | 第21-22页 |
·GRAS 转录因子研究进展 | 第22-26页 |
·转录因子 | 第22-23页 |
·GRAS 转录因子家族的命名 | 第23页 |
·GRAS 转录因子家族的分类 | 第23页 |
·GRAS 转录因子家族的蛋白结构特点 | 第23-24页 |
·GRAS 转录因子家族的功能 | 第24-25页 |
·GRAS 转录因子家族研究现状 | 第25-26页 |
·本研究的目的和意义 | 第26-28页 |
·过表达 Ac 转座酶对玉米内源性转座子的影响 | 第26-27页 |
·玉米 GRAS 转录因子家族 cDNA 克隆及初步的功能分析 | 第27-28页 |
2 材料和方法 | 第28-43页 |
·实验材料 | 第28-30页 |
·植物材料和种植 | 第28页 |
·菌株和质粒 | 第28页 |
·酶及生化试剂 | 第28页 |
·PCR 引物 | 第28-30页 |
·培养基 | 第30页 |
·试验方法 | 第30-43页 |
·取材及 RNA 提取与反转录 | 第30-32页 |
·Trizol 法提取 RNA | 第30-31页 |
·反转录 cDNA 的合成 | 第31-32页 |
·质粒 DNA 的提取和片段 DNA 的制备 | 第32-33页 |
·小量碱法提质粒 | 第32页 |
·百泰克试剂盒小量质粒提取 | 第32-33页 |
·基因枪用片段制备 | 第33页 |
·大肠杆菌和农杆菌感受态制备及转化 | 第33-34页 |
·大肠杆菌感受态制备 | 第33页 |
·热激法转化大肠杆菌感受态 | 第33-34页 |
·农杆菌感受态制备 | 第34页 |
·冻融法转化农杆菌感受态 | 第34页 |
·载体构建 | 第34-36页 |
·PCR 扩增目的片段 | 第34-35页 |
·连接反应 | 第35页 |
·酶切与回收 | 第35-36页 |
·表达载体构建 | 第36页 |
·农杆菌侵染法介导的玉米遗传转化 | 第36-38页 |
·农杆菌的培养和处理 | 第36-37页 |
·幼胚的处理 | 第37页 |
·侵染与共培养 | 第37页 |
·筛选阶段 | 第37页 |
·转基因植株再生 | 第37-38页 |
·转基因植株的鉴定 | 第38页 |
·基因枪法玉米遗传转化 | 第38-41页 |
·基因枪设备 | 第38页 |
·基因枪质粒的制备(百泰克小量试剂盒) | 第38页 |
·基因枪 DNA 片段制备 | 第38-39页 |
·基因枪微弹制作 | 第39-40页 |
·基因枪转化 | 第40-41页 |
·转化愈伤组织的筛选和植株再生 | 第41页 |
·转基因植株的鉴定 | 第41页 |
·农杆菌介导的短柄草转化 | 第41-43页 |
·愈伤组织诱导 | 第41-42页 |
·农杆菌侵染愈伤组织 | 第42页 |
·转基因植株鉴定 | 第42-43页 |
3 结果和分析 | 第43-63页 |
·过表达 Ac 转座酶对玉米内源性转座子的影响 | 第43-55页 |
·载体构建及片段 DNA 制备 | 第43-44页 |
·玉米取胚及愈伤组织诱导 | 第44-45页 |
·农杆菌介导的玉米转化 | 第45-50页 |
·农杆菌瞬时表达实验 | 第45-47页 |
·农杆菌侵染转化幼胚 | 第47-50页 |
·基因枪法玉米转化 | 第50-55页 |
·基因枪瞬时表达实验 | 第50-52页 |
·鱼精蛋白与片段基因枪转化的探索 | 第52-55页 |
·玉米 GRAS 转录因子家族 cDNA 克隆及初步的功能分析 | 第55-63页 |
·玉米 GRAS 转录因子家族保守序列分析 | 第55-57页 |
·玉米 GRAS 转录因子家族基因染色体位置 | 第57页 |
·玉米 GRAS 亚家族分类 | 第57-59页 |
·玉米 GRAS 基因成员表达部位的分析 | 第59-60页 |
·玉米 GRAS 基因成员的克隆及植物表达载体构建 | 第60-61页 |
·农杆菌介导的短柄草转化 | 第61-62页 |
·转基因植株的鉴定及表型分析 | 第62-63页 |
4 讨论 | 第63-67页 |
·过表达 Ac 转座酶对玉米内源性转座子的影响 | 第63-65页 |
·农杆菌介导的玉米转基因技术的研究 | 第63页 |
·基因枪法转化技术的研究 | 第63-64页 |
·瞬时表达实验 GFP 荧光标记 | 第64-65页 |
·玉米 GRAS 转录因子家族 cDNA 克隆及初步的功能分析 | 第65-67页 |
·玉米 GRAS 转录因子家族保守序列的分析 | 第65页 |
·玉米 GRAS 转录因子家族成员染色体分布及分类 | 第65页 |
·玉米 GRAS 家族成员的克隆 | 第65-66页 |
·短柄草转化及表型 | 第66-67页 |
5 结论 | 第67-68页 |
·过表达 Ac 转座酶对玉米内源性转座子的影响 | 第67页 |
·玉米 GRAS 转录因子家族 cDNA 克隆及初步的功能分析 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-75页 |
致谢 | 第75页 |