水稻品种抗稻曲病鉴定和病菌酰胺酶基因的克隆及原核表达
摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-12页 |
第一章 论文综述 | 第12-22页 |
1 稻曲病的分布及危害 | 第12-14页 |
·稻曲病的分布 | 第12页 |
·稻曲病的危害 | 第12-14页 |
2 稻曲病的发生规律 | 第14-15页 |
·侵染源与稻曲病的发生关系 | 第14页 |
·气候与稻曲病发生的关系 | 第14页 |
·水稻品种与稻曲病发生的关系 | 第14-15页 |
·肥料与稻曲病发生的关系 | 第15页 |
3 稻曲病人工接种及病情的分级 | 第15-16页 |
·稻曲病田间人工接种 | 第15-16页 |
·稻曲病病情分级 | 第16页 |
4 稻曲病菌的生物学特性 | 第16-18页 |
·不同温度对稻曲病菌菌落生长的影响 | 第17页 |
·不同pH值对稻曲病菌落生长的影响 | 第17页 |
·不同培养基对稻曲病菌落生长的影响 | 第17-18页 |
·微量元素对稻曲病菌落生长的影响 | 第18页 |
5 稻曲病的防治 | 第18-20页 |
·化学防治 | 第18-19页 |
·选育抗性品种 | 第19页 |
·生物防治 | 第19-20页 |
6 电击转化法的应用 | 第20页 |
7 酰胺酶的研究进展 | 第20-21页 |
8 本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
第二章 水稻品种抗稻曲病人工接种鉴定 | 第22-38页 |
1 供试材料 | 第22-23页 |
·供试菌株 | 第22页 |
·供试水稻品种 | 第22页 |
·供试主要试剂 | 第22-23页 |
·引物 | 第23页 |
2 试验方法 | 第23-32页 |
·稻曲病病原菌的分离与纯化 | 第23-24页 |
·稻曲病菌株的鉴定 | 第24-30页 |
·水稻品种处理 | 第30-31页 |
·人工接种体的制备 | 第31页 |
·田间人工接种 | 第31页 |
·再生稻人工接种 | 第31-32页 |
·田间调查和分级标准 | 第32页 |
3 结果与分析 | 第32-36页 |
·稻曲病菌株的鉴定及序列分析 | 第32-33页 |
·人工接种菌株 | 第33-34页 |
·水稻品种头季稻人工接种后对不同菌株的抗性反应 | 第34-35页 |
·水稻品种再生稻人工接种后对不同菌株的抗性反应 | 第35-36页 |
4 讨论 | 第36-38页 |
第三章 稻曲病菌分生孢子的电击转化 | 第38-44页 |
1 材料 | 第38-39页 |
·供试菌株 | 第38页 |
·供试培养基 | 第38页 |
·供试主要试剂 | 第38页 |
·引物 | 第38-39页 |
2 方法 | 第39-41页 |
·稻曲病菌薄壁分生孢子的制备 | 第39页 |
·质粒的制备 | 第39-40页 |
·电击转化步骤 | 第40页 |
·转基因稻曲病菌株GFP荧光检测 | 第40页 |
·转基因稻曲病菌株潮霉素基因PCR检测 | 第40-41页 |
3 结果与分析 | 第41-43页 |
·质粒的提取 | 第41页 |
·转基因稻曲病菌株生长表现 | 第41页 |
·转基因稻曲病菌株GFP荧光检测 | 第41-42页 |
·转基因稻曲病菌株潮霉素基因PCR检测 | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-44页 |
第四章 酰胺酶基因的克隆及原核表达 | 第44-56页 |
1 材料 | 第44-45页 |
·供试菌株和载体 | 第44页 |
·供试主要试剂 | 第44页 |
·引物 | 第44-45页 |
2 方法 | 第45-51页 |
·稻曲病菌的培养 | 第45页 |
·酰胺酶基因的克隆 | 第45-47页 |
·酰胺酶基因重组质粒的制备 | 第47-48页 |
·酰胺酶基因原核表达载体的构建 | 第48-49页 |
·酰胺酶基因的原核表达 | 第49-50页 |
·酰胺酶重组蛋白的诱导表达 | 第50页 |
·表面蛋白的提取 | 第50页 |
·SDS-PAGE电泳分离细胞表面蛋白 | 第50-51页 |
3 结果与分析 | 第51-55页 |
·稻曲病酰胺酶基因的克隆 | 第51页 |
·酰胺酶基因的克隆及测序 | 第51-52页 |
·酰胺酶基因重组质粒的制备 | 第52-53页 |
·重组载体的构建及鉴定 | 第53-54页 |
·pQE30-酰胺酶基因重组子的鉴定 | 第54页 |
·pQE30-酰胺酶基因重组子的原核表达 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-56页 |
第五章 全文总结、创新点及下一步计划 | 第56-57页 |
1 全文总结 | 第56页 |
2 创新点 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
附录 | 第63-71页 |
附录A 本实验主要仪器及试剂 | 第63-69页 |
附录B 本实验常用抗生素及浓度 | 第69页 |
附录C 稻曲病菌酰胺酶基因序列 | 第69-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
作者简介 | 第72页 |