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水稻品种抗稻曲病鉴定和病菌酰胺酶基因的克隆及原核表达

摘要第1-5页
Abstract第5-12页
第一章 论文综述第12-22页
 1 稻曲病的分布及危害第12-14页
   ·稻曲病的分布第12页
   ·稻曲病的危害第12-14页
 2 稻曲病的发生规律第14-15页
   ·侵染源与稻曲病的发生关系第14页
   ·气候与稻曲病发生的关系第14页
   ·水稻品种与稻曲病发生的关系第14-15页
   ·肥料与稻曲病发生的关系第15页
 3 稻曲病人工接种及病情的分级第15-16页
   ·稻曲病田间人工接种第15-16页
   ·稻曲病病情分级第16页
 4 稻曲病菌的生物学特性第16-18页
   ·不同温度对稻曲病菌菌落生长的影响第17页
   ·不同pH值对稻曲病菌落生长的影响第17页
   ·不同培养基对稻曲病菌落生长的影响第17-18页
   ·微量元素对稻曲病菌落生长的影响第18页
 5 稻曲病的防治第18-20页
   ·化学防治第18-19页
   ·选育抗性品种第19页
   ·生物防治第19-20页
 6 电击转化法的应用第20页
 7 酰胺酶的研究进展第20-21页
 8 本研究的目的与意义第21-22页
第二章 水稻品种抗稻曲病人工接种鉴定第22-38页
 1 供试材料第22-23页
   ·供试菌株第22页
   ·供试水稻品种第22页
   ·供试主要试剂第22-23页
   ·引物第23页
 2 试验方法第23-32页
   ·稻曲病病原菌的分离与纯化第23-24页
   ·稻曲病菌株的鉴定第24-30页
   ·水稻品种处理第30-31页
   ·人工接种体的制备第31页
   ·田间人工接种第31页
   ·再生稻人工接种第31-32页
   ·田间调查和分级标准第32页
 3 结果与分析第32-36页
   ·稻曲病菌株的鉴定及序列分析第32-33页
   ·人工接种菌株第33-34页
   ·水稻品种头季稻人工接种后对不同菌株的抗性反应第34-35页
   ·水稻品种再生稻人工接种后对不同菌株的抗性反应第35-36页
 4 讨论第36-38页
第三章 稻曲病菌分生孢子的电击转化第38-44页
 1 材料第38-39页
   ·供试菌株第38页
   ·供试培养基第38页
   ·供试主要试剂第38页
   ·引物第38-39页
 2 方法第39-41页
   ·稻曲病菌薄壁分生孢子的制备第39页
   ·质粒的制备第39-40页
   ·电击转化步骤第40页
   ·转基因稻曲病菌株GFP荧光检测第40页
   ·转基因稻曲病菌株潮霉素基因PCR检测第40-41页
 3 结果与分析第41-43页
   ·质粒的提取第41页
   ·转基因稻曲病菌株生长表现第41页
   ·转基因稻曲病菌株GFP荧光检测第41-42页
   ·转基因稻曲病菌株潮霉素基因PCR检测第42-43页
 4 讨论第43-44页
第四章 酰胺酶基因的克隆及原核表达第44-56页
 1 材料第44-45页
   ·供试菌株和载体第44页
   ·供试主要试剂第44页
   ·引物第44-45页
 2 方法第45-51页
   ·稻曲病菌的培养第45页
   ·酰胺酶基因的克隆第45-47页
   ·酰胺酶基因重组质粒的制备第47-48页
   ·酰胺酶基因原核表达载体的构建第48-49页
   ·酰胺酶基因的原核表达第49-50页
   ·酰胺酶重组蛋白的诱导表达第50页
   ·表面蛋白的提取第50页
   ·SDS-PAGE电泳分离细胞表面蛋白第50-51页
 3 结果与分析第51-55页
   ·稻曲病酰胺酶基因的克隆第51页
   ·酰胺酶基因的克隆及测序第51-52页
   ·酰胺酶基因重组质粒的制备第52-53页
   ·重组载体的构建及鉴定第53-54页
   ·pQE30-酰胺酶基因重组子的鉴定第54页
   ·pQE30-酰胺酶基因重组子的原核表达第54-55页
 4 讨论第55-56页
第五章 全文总结、创新点及下一步计划第56-57页
 1 全文总结第56页
 2 创新点第56-57页
参考文献第57-63页
附录第63-71页
 附录A 本实验主要仪器及试剂第63-69页
 附录B 本实验常用抗生素及浓度第69页
 附录C 稻曲病菌酰胺酶基因序列第69-71页
致谢第71-72页
作者简介第72页

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