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新型抗凝药物DTI解毒剂的研究及凝血调节蛋白在树突状细胞中作用机制的初步探索

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 文献综述第13-41页
 1.凝血系统综述第13-31页
  概述第13-14页
   ·血小板的激活第14-17页
     ·胶原质激活血小板的机制第15-16页
     ·凝血酶诱导的血小板聚集第16-17页
     ·二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集第17页
   ·凝血途径第17-20页
     ·内源性凝血途径 Contact activation pathway (intrinsic)第19-20页
     ·外源性凝血途径 Tissue factor pathway (extrinsic)第20页
     ·最终的共同途径 Final common pathway第20页
   ·凝血系统中的正负反馈途径及一些重要的凝血因子第20-29页
     ·组织因子(Tissue factor, TF)第24页
     ·凝血酶(Thrombin)第24-25页
     ·纤维蛋白酶原(Fibrinogen)第25-26页
     ·凝血因子 XIII(Factor XIII)第26页
     ·蛋白 C(protein C)第26-27页
     ·凝血调节蛋白(thrombomodulin, TM)第27-29页
   ·凝血异常的相关疾病第29-31页
 2.凝血酶与凝血酶的抑制剂第31-38页
   ·凝血酶的结构第31-33页
   ·凝血酶的直接抑制剂第33-38页
 3.凝血系统与免疫系统的相互联系第38-41页
第二章 凝血酶直接抑制剂 DTI 的解毒剂的制备及其作用第41-92页
 1.前言第41-42页
 2.材料与方法第42-65页
   ·凝血酶突变体质粒的构建第42-51页
     ·设计凝血酶突变体第42-45页
     ·利用定点突变技术获得凝血酶突变体质粒第45-51页
   ·CHO-S 细胞的转染及阳性克隆的筛选第51-57页
     ·CHO-S 细胞的培养第51-53页
     ·Lipofectamin 2000 转染 CHO-S 细胞第53页
     ·筛选转染后的阳性克隆细胞第53-57页
   ·凝血酶重组蛋白的表达及纯化第57-61页
   ·凝血实验第61-65页
     ·APTT 试验第62页
     ·TT 试验第62-63页
     ·Thrombinoscope 试验第63-65页
 3.结果与讨论第65-92页
   ·凝血酶突变体质粒在 CHO-S 中的转染及阳性克隆的筛选第65-68页
   ·凝血酶突变体重组蛋白的表达及纯化第68-80页
   ·凝血实验第80-92页
     ·S195A第80-87页
     ·S195A/Y76A第87-89页
     ·S195A/Y76A/R101A第89-92页
第三章 凝血调节蛋白的制备及其对树突状细胞的作用第92-118页
 1.前言第92-94页
 2.材料方法第94-106页
   ·构建重组表达载体第94-98页
   ·CHO-S 转染及阳性克隆的筛选第98-100页
   ·重组蛋白的表达与纯化第100页
   ·TM-mfc 重组蛋白的功能检测第100-106页
     ·aPC assay第100-101页
     ·HMGB1 binding assay第101-102页
     ·TM 重组蛋白与 BMDC 的孵育实验第102-103页
     ·流式细胞仪分析(FACS)第103-106页
 3.结果与讨论第106-118页
   ·构建重组质粒第106-108页
   ·阳性克隆的筛选第108-110页
   ·重组蛋白纯化第110-111页
   ·aPC assay第111-112页
   ·HMGB1 binding assay第112-113页
   ·流式细胞仪分析 TM 融合蛋白对 BMDC 的作用第113-118页
     ·TM 在 BMDC 中的表达第113-115页
     ·融合蛋白对 BMDC 的影响第115-118页
总结与展望第118-120页
参考文献第120-138页
致谢第138-139页
个人简介第139页
发表的学术论文第139页

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