摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
目录 | 第9-12页 |
第一部分 前言 | 第12-24页 |
一 表观遗传学 | 第12-13页 |
二 组蛋白修饰 | 第13-15页 |
三 组蛋白甲基化修饰 | 第15-21页 |
·组蛋白的甲基化 | 第15-17页 |
·组蛋白的甲基化酶 | 第17-18页 |
·组蛋白的去甲基化酶 | 第18-21页 |
四 组蛋白甲基化修饰结合蛋白 | 第21-23页 |
·PHD指家族蛋白 | 第21页 |
·MBT重复 | 第21-22页 |
·Tudor结构域 | 第22页 |
·WD40重复 | 第22-23页 |
·chormo结构域 | 第23页 |
五 本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
第二部分 H3K4me2特异结合蛋白NRDc的鉴定及其功能研究 | 第24-65页 |
一 引言 | 第24-26页 |
二 实验材料和方法 | 第26-53页 |
·抗体 | 第26页 |
·试剂 | 第26-27页 |
·质粒 | 第27-36页 |
·细胞培养,细胞转染及稳定细胞株的建立 | 第36-39页 |
·蛋白样品的制备 | 第39-40页 |
·蛋白表达纯化 | 第40-42页 |
·Western Blot | 第42-44页 |
·pulldown | 第44-47页 |
·免疫染色 | 第47-48页 |
·核质分离 | 第48页 |
·microarray和RT-PCR | 第48-50页 |
·免疫沉淀 | 第50页 |
·染色质免疫沉淀 | 第50-53页 |
三 实验结果 | 第53-63页 |
·H3K4me2特异结合蛋白的鉴定 | 第53-55页 |
·NRDc特异结合H3K4me2的功能结构域的鉴定 | 第55-58页 |
·NRDc与转录共抑制因子NCoR/SMRT复合体相关 | 第58-59页 |
·NRDc具有转录抑制功能 | 第59-60页 |
·NRDc的H3K4me2的结合活性对基因转录抑制和NCoR/SMRT复合体招募的影响 | 第60-63页 |
四 讨论 | 第63-65页 |
·一个新的H3K4me2特异结合蛋白NRDc的鉴定 | 第63页 |
·NRDc在转录调控的功能 | 第63-65页 |
第三部分 H3K4me2特异识别蛋白PAF1复合体的鉴定 | 第65-106页 |
一 引言 | 第65-71页 |
·PAF1复合体介绍 | 第65-66页 |
·PAF1复合体在转录周期中的位置 | 第66-67页 |
·PAF1复合体的转录调控机制 | 第67-71页 |
二 实验材料和方法 | 第71-96页 |
·抗体 | 第71页 |
·试剂 | 第71-72页 |
·质粒 | 第72-82页 |
·细胞培养,细胞转染及稳定细胞株的建立 | 第82-83页 |
·用昆虫病毒表达系统表达蛋白 | 第83-87页 |
·蛋白表达纯化 | 第87-89页 |
·蛋白样品的制备 | 第89-90页 |
·Western Blot | 第90-92页 |
·pulldown | 第92-96页 |
三 实验结果 | 第96-104页 |
·特异结合未修饰的H3和H3K4me2的PAF1复合体的鉴定 | 第96-98页 |
·特异结合未修饰的H3和H3K4me2的PAF1复合体亚基的鉴定 | 第98-99页 |
·PAF1亚基特异结合H3和H3K4me2的功能结构域的鉴定 | 第99-100页 |
·PAF1亚基功能结构域的进化分析 | 第100-104页 |
四 讨论 | 第104-106页 |
·PAF1复合体与组蛋白的结合 | 第104-105页 |
·PAF1复合体的H3和H3K4me2的结合特异性的潜在功能 | 第105-106页 |
本文总结 | 第106-108页 |
一 主要研究结论 | 第106页 |
二 本研究的主要创新点 | 第106-108页 |
参考文献 | 第108-120页 |
附录 | 第120-121页 |
致谢 | 第121页 |