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H3K4二甲基化修饰结合蛋白的鉴定及其功能研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
目录第9-12页
第一部分 前言第12-24页
 一 表观遗传学第12-13页
 二 组蛋白修饰第13-15页
 三 组蛋白甲基化修饰第15-21页
   ·组蛋白的甲基化第15-17页
   ·组蛋白的甲基化酶第17-18页
   ·组蛋白的去甲基化酶第18-21页
 四 组蛋白甲基化修饰结合蛋白第21-23页
   ·PHD指家族蛋白第21页
   ·MBT重复第21-22页
   ·Tudor结构域第22页
   ·WD40重复第22-23页
   ·chormo结构域第23页
 五 本研究的目的和意义第23-24页
第二部分 H3K4me2特异结合蛋白NRDc的鉴定及其功能研究第24-65页
 一 引言第24-26页
 二 实验材料和方法第26-53页
   ·抗体第26页
   ·试剂第26-27页
   ·质粒第27-36页
   ·细胞培养,细胞转染及稳定细胞株的建立第36-39页
   ·蛋白样品的制备第39-40页
   ·蛋白表达纯化第40-42页
   ·Western Blot第42-44页
   ·pulldown第44-47页
   ·免疫染色第47-48页
   ·核质分离第48页
   ·microarray和RT-PCR第48-50页
   ·免疫沉淀第50页
   ·染色质免疫沉淀第50-53页
 三 实验结果第53-63页
   ·H3K4me2特异结合蛋白的鉴定第53-55页
   ·NRDc特异结合H3K4me2的功能结构域的鉴定第55-58页
   ·NRDc与转录共抑制因子NCoR/SMRT复合体相关第58-59页
   ·NRDc具有转录抑制功能第59-60页
   ·NRDc的H3K4me2的结合活性对基因转录抑制和NCoR/SMRT复合体招募的影响第60-63页
 四 讨论第63-65页
   ·一个新的H3K4me2特异结合蛋白NRDc的鉴定第63页
   ·NRDc在转录调控的功能第63-65页
第三部分 H3K4me2特异识别蛋白PAF1复合体的鉴定第65-106页
 一 引言第65-71页
   ·PAF1复合体介绍第65-66页
   ·PAF1复合体在转录周期中的位置第66-67页
   ·PAF1复合体的转录调控机制第67-71页
 二 实验材料和方法第71-96页
   ·抗体第71页
   ·试剂第71-72页
   ·质粒第72-82页
   ·细胞培养,细胞转染及稳定细胞株的建立第82-83页
   ·用昆虫病毒表达系统表达蛋白第83-87页
   ·蛋白表达纯化第87-89页
   ·蛋白样品的制备第89-90页
   ·Western Blot第90-92页
   ·pulldown第92-96页
 三 实验结果第96-104页
   ·特异结合未修饰的H3和H3K4me2的PAF1复合体的鉴定第96-98页
   ·特异结合未修饰的H3和H3K4me2的PAF1复合体亚基的鉴定第98-99页
   ·PAF1亚基特异结合H3和H3K4me2的功能结构域的鉴定第99-100页
   ·PAF1亚基功能结构域的进化分析第100-104页
 四 讨论第104-106页
   ·PAF1复合体与组蛋白的结合第104-105页
   ·PAF1复合体的H3和H3K4me2的结合特异性的潜在功能第105-106页
本文总结第106-108页
 一 主要研究结论第106页
 二 本研究的主要创新点第106-108页
参考文献第108-120页
附录第120-121页
致谢第121页

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