中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
前言 | 第11-13页 |
实验流程图 | 第13-14页 |
第一部分 hS和hSP蛋白的大肠杆菌原核表达 | 第14-27页 |
·引言 | 第14-15页 |
·材料 | 第15-16页 |
·方法 | 第16-20页 |
·结果 | 第20-25页 |
·hS及hSP蛋白原核表达的分子构建 | 第20页 |
·hS及hSP蛋白在大肠杆菌的诱导表达 | 第20-22页 |
·hS及hSP包涵体复性及纯化 | 第22-25页 |
·小结 | 第25-27页 |
第二部分 hS及hSP蛋白真核毕赤酵母表达的分子构建 | 第27-33页 |
·引言 | 第27-28页 |
·材料 | 第28页 |
·方法 | 第28-30页 |
·结果 | 第30-32页 |
·小结 | 第32-33页 |
第三部分 hS及hSP分子毕赤酵母表达株的获得 | 第33-47页 |
·引言 | 第33页 |
·材料 | 第33-34页 |
·方法 | 第34-40页 |
·结果 | 第40-46页 |
·表达质粒与空质粒pPIC9K的线性化 | 第40-41页 |
·线性化DNA片断的纯化回收 | 第41-42页 |
·毕赤酵母GS115的电穿孔转化 | 第42-43页 |
·毕赤酵母的PEG转化 | 第43-44页 |
·GS115多拷贝插入重组子的筛选 | 第44-46页 |
·小结 | 第46-47页 |
第四部分 hS及hSP蛋白在毕赤酵母中的分泌表达与纯化 | 第47-61页 |
·引言 | 第47页 |
·材料 | 第47页 |
·方法 | 第47-50页 |
·结果 | 第50-59页 |
·hS和hSP蛋白的初次诱导 | 第50-51页 |
·hS和hSP蛋白表达条件的优化 | 第51-58页 |
·诱导后hS胞内蛋白情况 | 第58页 |
·后续hSP胞内表达探索 | 第58-59页 |
·小结 | 第59-61页 |
第五部分 hS蛋白体外结合功能的初步测试 | 第61-66页 |
·引言 | 第61页 |
·材料 | 第61-62页 |
·方法 | 第62-64页 |
·结果 | 第64-65页 |
·小结 | 第65-66页 |
讨论 hS和hSP:E.coli系统?Pichiapastoris系统?还是其它表达系统? | 第66-72页 |
全文总结 | 第72-75页 |
参考文献 | 第75-79页 |
文献综述 | 第79-94页 |
综述参考文献 | 第92-94页 |
个人简历 | 第94-96页 |
致谢 | 第96-97页 |