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人源化抗CTLA-4单链抗体及其免疫毒素融合蛋白的表达与纯化研究:原核大肠杆菌与真核毕赤酵母表达系统

中文摘要第1-5页
Abstract第5-11页
前言第11-13页
实验流程图第13-14页
第一部分 hS和hSP蛋白的大肠杆菌原核表达第14-27页
   ·引言第14-15页
   ·材料第15-16页
   ·方法第16-20页
   ·结果第20-25页
     ·hS及hSP蛋白原核表达的分子构建第20页
     ·hS及hSP蛋白在大肠杆菌的诱导表达第20-22页
     ·hS及hSP包涵体复性及纯化第22-25页
   ·小结第25-27页
第二部分 hS及hSP蛋白真核毕赤酵母表达的分子构建第27-33页
   ·引言第27-28页
   ·材料第28页
   ·方法第28-30页
   ·结果第30-32页
   ·小结第32-33页
第三部分 hS及hSP分子毕赤酵母表达株的获得第33-47页
   ·引言第33页
   ·材料第33-34页
   ·方法第34-40页
   ·结果第40-46页
     ·表达质粒与空质粒pPIC9K的线性化第40-41页
     ·线性化DNA片断的纯化回收第41-42页
     ·毕赤酵母GS115的电穿孔转化第42-43页
     ·毕赤酵母的PEG转化第43-44页
     ·GS115多拷贝插入重组子的筛选第44-46页
   ·小结第46-47页
第四部分 hS及hSP蛋白在毕赤酵母中的分泌表达与纯化第47-61页
   ·引言第47页
   ·材料第47页
   ·方法第47-50页
   ·结果第50-59页
     ·hS和hSP蛋白的初次诱导第50-51页
     ·hS和hSP蛋白表达条件的优化第51-58页
     ·诱导后hS胞内蛋白情况第58页
     ·后续hSP胞内表达探索第58-59页
   ·小结第59-61页
第五部分 hS蛋白体外结合功能的初步测试第61-66页
   ·引言第61页
   ·材料第61-62页
   ·方法第62-64页
   ·结果第64-65页
   ·小结第65-66页
讨论 hS和hSP:E.coli系统?Pichiapastoris系统?还是其它表达系统?第66-72页
全文总结第72-75页
参考文献第75-79页
文献综述第79-94页
 综述参考文献第92-94页
个人简历第94-96页
致谢第96-97页

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