| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一章 应用大肠杆菌CPD缺陷株SY2验证DS64PHR基因功能 | 第13-35页 |
| 1.材料和方法 | 第13-23页 |
| ·材料 | 第13-16页 |
| ·菌种、载体 | 第13-14页 |
| ·基因 | 第14页 |
| ·试剂 | 第14-15页 |
| ·酶制剂、试剂盒 | 第15页 |
| ·引物及测序 | 第15页 |
| ·培养基 | 第15-16页 |
| ·实验仪器设备 | 第16页 |
| ·方法 | 第16-23页 |
| ·E.coli CPD光裂合酶基因的克隆 | 第16-18页 |
| ·SY2系列工程菌的制备 | 第18-21页 |
| ·Ds64PHR在SY2中的功能鉴定 | 第21-23页 |
| 2.结果和分析 | 第23-31页 |
| ·表达载体的验证 | 第23-24页 |
| ·克隆得到E.coli CPD光裂合酶基因 | 第23页 |
| ·SY2系列工程菌的验证 | 第23-24页 |
| ·Ds64PHR光修复功能的体内鉴定 | 第24-31页 |
| ·Ds64PHR在SY2中光修复功能的初步验证 | 第24-27页 |
| ·紫外线照射强度梯度实验 | 第27-29页 |
| ·可见光修复时间梯度实验 | 第29-31页 |
| 3.讨论 | 第31-35页 |
| ·表达载体的可行性论证 | 第31-32页 |
| ·宿主菌的选择 | 第32-33页 |
| ·实验条件的优化 | 第33页 |
| ·Ds64PHR的修复特性 | 第33-35页 |
| 第二章 DS64PHR蛋白的纯化及抗体制备 | 第35-52页 |
| 1.材料和方法 | 第35-43页 |
| ·材料 | 第35-39页 |
| ·菌种、载体 | 第35页 |
| ·动物 | 第35页 |
| ·试剂 | 第35-38页 |
| ·酶制剂、试剂盒 | 第38页 |
| ·培养基 | 第38页 |
| ·实验仪器设备 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-43页 |
| ·BL21(DE3)pET30a-Ds64PHR工程菌的构建 | 第39页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第39-40页 |
| ·SDS—PAGE蛋白质凝胶电泳 | 第40-41页 |
| ·洗涤包涵体 | 第41页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第41-42页 |
| ·双向免疫扩散 | 第42-43页 |
| 2.结果和分析 | 第43-48页 |
| ·工程菌的验证 | 第43-44页 |
| ·Ds64PHR融合蛋白的诱导表达 | 第44-45页 |
| ·融合蛋白的定位 | 第45-46页 |
| ·包涵体的纯化 | 第46-48页 |
| ·抗体效价的检测 | 第48页 |
| 3.讨论 | 第48-52页 |
| ·表达载体的选择 | 第48-49页 |
| ·诱导条件的优化 | 第49-50页 |
| ·纯化方法的选取 | 第50-51页 |
| ·SDS—PAGE蛋白质凝胶电泳 | 第51-52页 |
| 第三章 DS64PHR的表达特性 | 第52-69页 |
| 1.材料和方法 | 第52-61页 |
| ·材料 | 第52-55页 |
| ·藻种 | 第52页 |
| ·试剂 | 第52-55页 |
| ·酶制剂、试剂盒 | 第55页 |
| ·引物及测序 | 第55页 |
| ·培养基 | 第55页 |
| ·实验仪器设备 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-61页 |
| ·盐藻的胁迫培养 | 第55-56页 |
| ·RNA的提取 | 第56-57页 |
| ·杂交探针的制备 | 第57页 |
| ·Northern杂交 | 第57-59页 |
| ·盐藻细胞总蛋白的提取 | 第59-60页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第60页 |
| ·Western杂交 | 第60-61页 |
| 2.结果和分析 | 第61-67页 |
| ·总蛋白含量的测定 | 第61-62页 |
| ·BSA标准曲线的建立 | 第61页 |
| ·盐藻总蛋白含量的测定 | 第61-62页 |
| ·盐藻总RNA的提取 | 第62页 |
| ·Ds64PHR基因在核酸水平的表达情况 | 第62-65页 |
| ·持续光照培养后基因的表达情况 | 第62-63页 |
| ·紫外胁迫培养后基因的表达情况 | 第63-64页 |
| ·高盐处理后RNA水平差异 | 第64页 |
| ·持续黑暗培养基因的RNA水平差异 | 第64-65页 |
| ·融合蛋白的Western Blotting | 第65页 |
| ·盐藻天然蛋白Western杂交实验结果 | 第65-67页 |
| ·持续光照培养后蛋白的Western Blotting | 第65页 |
| ·紫外胁迫培养后蛋白的表达水平 | 第65-66页 |
| ·高盐处理后RNA水平差异 | 第66页 |
| ·持续黑暗培养基因的RNA水平差异 | 第66-67页 |
| 3.讨论 | 第67-69页 |
| ·上样量的一致性 | 第67页 |
| ·胁迫环境对表达量的影响 | 第67-69页 |
| 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 综述 | 第75-101页 |
