| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-20页 |
| 1 药用植物连作障碍与怀牛膝连作促进 | 第11-13页 |
| ·药用植物连作障碍普遍存在 | 第11-12页 |
| ·怀牛膝生物学特性及其显著的连作促进作用 | 第12-13页 |
| 2 抑制消减杂交技术介绍 | 第13-16页 |
| ·减法杂交 | 第13页 |
| ·mRNA差异显示PCR | 第13-14页 |
| ·基因芯片技术 | 第14页 |
| ·抑制消减杂交技术 | 第14-16页 |
| 3 蛋白组学简介 | 第16-19页 |
| ·蛋白组学及其技术产生的背景 | 第16页 |
| ·蛋白组学研究策略与技术 | 第16-19页 |
| ·利用差异蛋白组学研究药用植物连作的优点 | 第19页 |
| 4 本研究的特点与意义 | 第19-20页 |
| 材料与方法 | 第20-23页 |
| 1 土壤采集及土壤预处理 | 第20-21页 |
| 2 怀牛膝连作促进作用潜力分析 | 第21页 |
| 3 怀牛膝幼苗培养及取样方法 | 第21页 |
| 4 怀牛膝连作促进的差异基因表达的抑制消减杂交分析 | 第21-22页 |
| 5 怀牛膝连作促进的差异蛋白质组学研究 | 第22-23页 |
| 结果分析 | 第23-33页 |
| 1 土壤浸提液对模式植物莴苣的根部伸长的效应分析 | 第23-24页 |
| 2 怀牛膝连作促进的差异基因的抑制消减杂交分析 | 第24-29页 |
| 3 怀牛膝连作促进的差异蛋白质组学研究 | 第29-33页 |
| 结论与讨论 | 第33-37页 |
| 问题与展望 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-44页 |
| 附录一 抑制消减杂交实验方法 | 第44-61页 |
| 1 所需试剂 | 第44页 |
| 2 主要仪器 | 第44-45页 |
| 3 主要试剂溶液及配制方法 | 第45-46页 |
| 4 实验方法 | 第46-61页 |
| ·总RNA提取 | 第46-47页 |
| ·痕量基因组DNA的DNase处理 | 第47页 |
| ·抑制差减文库构建 | 第47-53页 |
| ·PCR产物的连接转化 | 第53-55页 |
| ·重组子的鉴定 | 第55-60页 |
| ·克隆子的测序及序列分析 | 第60-61页 |
| 附录二 差异蛋白质组学实验方法 | 第61-65页 |
| 1 蛋白质提取 | 第61页 |
| 2 双向电泳 | 第61-62页 |
| ·第一向—等电聚焦(IEF)电泳 | 第61-62页 |
| ·第二向—SDS-PAGE电泳 | 第62页 |
| 3 银染 | 第62页 |
| 4 蛋白质表达图谱的建立及差异点的确定 | 第62页 |
| 5 蛋白质点胶内酶解及肽段提取 | 第62-63页 |
| ·脱银 | 第62-63页 |
| ·胶内消化 | 第63页 |
| ·萃取 | 第63页 |
| 6 质谱分析 | 第63页 |
| ·上样 | 第63页 |
| ·MALDI-TOF/MS(基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱)分析 | 第63页 |
| 7 数据库查询及蛋白质鉴定 | 第63-65页 |
| 附录三 各差异蛋白PMF图谱 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67页 |