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斑马鱼分拣蛋白SNX10基因功能研究

图表清单第1-8页
缩略词表第8-10页
摘要第10-11页
Abstract第11-12页
引言第12-13页
1 文献综述第13-20页
   ·磷脂酰肌醇的分子结构及与之相互作用的蛋白结构域第13-14页
   ·PX结构域和SNXs蛋白家族第14-15页
   ·内涵体细胞器和蛋白分拣第15-16页
   ·SNX10及其在细胞水平的功能第16页
   ·个体水平的基因敲低和过表达技术第16-17页
   ·个体水平的原位杂交技术第17-18页
   ·模式生物斑马鱼第18页
   ·左右不对称发育第18-19页
   ·心脏的发育第19页
   ·拟解决的问题第19-20页
2 材料与方法第20-39页
   ·材料第20-26页
     ·动物材料第20页
     ·菌种第20页
     ·细胞系第20页
     ·酶及试剂盒、载体等第20-22页
   1) 酶第20页
   2) Marker及核酸染料第20-21页
   3) 试剂盒及引物第21页
   4) 克隆载体第21-22页
     ·细胞培养基及转染试剂第22页
     ·原位杂交相关试剂第22-23页
     ·morpholino寡核苷酸第23页
     ·主要溶液第23-25页
   1) 免疫荧光第23-24页
   2) 原位杂交第24-25页
     ·主要仪器第25-26页
     ·常用相关软件及网站第26页
   ·方法第26-39页
     ·动物材料的处理第26页
     ·总RNA提取、反转录和检测第26-28页
   1) RNA提取第26-27页
   2) 反转录第27-28页
   3) cDNA质量检测第28页
     ·目的基因的RT-PCR第28-31页
   1) RT-PCR第29页
   2) 目的片段回收、连接、转化第29-30页
   3) 克隆的鉴定和测序第30-31页
     ·细胞转染及免疫荧光第31-33页
   1) MCF7细胞系的培养第31页
   2) MCF7细胞系的转染第31页
   3) 免疫荧光第31-33页
     ·斑马鱼养殖第33页
     ·显微注射及morpholino基因敲低技术第33-34页
     ·原位杂交第34-39页
3 结果与分析第39-49页
   ·总RNA提取第39页
   ·各基因cDNA全长的克隆第39-41页
   ·dSNX10a的序列与NCBI公布的SNX10序列差别第41页
   ·转染细胞鉴定dSNX10a/dSNX10b/xSNX10第41-42页
   ·免疫荧光鉴定dSNX10a/dSNX10b细胞器定位结果第42-43页
   ·斑马鱼dSNX10a/dSNX10b原位杂交结果和dSNX10a/dSNX10b基因表达敲低后个体表型第43-46页
   ·小结和讨论第46-49页
     ·小结第46-47页
     ·讨论第47-49页
参考文献第49-53页
致谢第53页

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