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67LR促进肝癌侵袭转移的分子机制研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-8页
引言第8-12页
第一章 67LR 促进肝癌细胞MMP-2 和MMP-9 的表达第12-25页
 一、材料与方法第12-17页
     ·细胞培养第12页
     ·主要试剂第12-13页
     ·细胞总RNA 提取第13页
     ·半定量 RT-PCR 扩增 MMPs 及 TIMPs第13-15页
     ·Real Time-荧光定量 PCR第15-16页
     ·明胶酶谱法分析检测 MMP-2 及 MMP-9 的表达及活性第16-17页
     ·统计学分析第17页
 二、结果第17-23页
     ·HepG2 细胞MMPs 和TIMPs 的总体表达第17-19页
     ·67LR 促进HepG2 细胞 MMP-2 和MMP-9 的表达第19-22页
     ·67LR 促进MMP-2 和MMP-9 的活性第22-23页
 三、讨论第23-24页
 四、小结第24-25页
第二章 67LR 瞬时转染对转移相关基因表达的影响第25-40页
 一、材料与方法第26-31页
     ·细胞培养第26页
     ·主要试剂第26-27页
     ·质粒抽提第27-29页
     ·引物设计第29页
     ·质粒转染第29-30页
     ·半定量 RT-PCR第30-31页
     ·统计学方法第31页
 二、结果第31-35页
     ·67LR 对MMPs 表达的影响第31-33页
     ·67LR 对 TIMPs 表达的影响第33-34页
     ·67LR 对其他转移相关基因表达的影响第34-35页
 三、讨论第35-39页
 四、小结第39-40页
第三章 67LR knock-down 对转移相关基因表达的影响第40-58页
 一、材料与方法第41-45页
     ·细胞培养第41页
     ·siRNA 设计及合成第41-42页
     ·siRNA 转染第42-43页
     ·流式细胞术检测第43页
     ·半定量RT-PCR第43-45页
     ·统计学分析第45页
 二、结果第45-55页
     ·67LR RNAi 效果鉴定第45-47页
     ·67LR knock-down 对MMPs 表达的影响第47-49页
     ·67LR knock-down 对TIMPs 表达的影响第49-52页
     ·67LR knock-down 对其他转移相关基因表达的影响第52-55页
 三、讨论第55-57页
 四、小结第57-58页
总结第58-59页
参考文献第59-65页
综述第65-75页
在读期间发表论文第75-76页
致谢第76页

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