中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
引言 | 第8-12页 |
第一章 67LR 促进肝癌细胞MMP-2 和MMP-9 的表达 | 第12-25页 |
一、材料与方法 | 第12-17页 |
·细胞培养 | 第12页 |
·主要试剂 | 第12-13页 |
·细胞总RNA 提取 | 第13页 |
·半定量 RT-PCR 扩增 MMPs 及 TIMPs | 第13-15页 |
·Real Time-荧光定量 PCR | 第15-16页 |
·明胶酶谱法分析检测 MMP-2 及 MMP-9 的表达及活性 | 第16-17页 |
·统计学分析 | 第17页 |
二、结果 | 第17-23页 |
·HepG2 细胞MMPs 和TIMPs 的总体表达 | 第17-19页 |
·67LR 促进HepG2 细胞 MMP-2 和MMP-9 的表达 | 第19-22页 |
·67LR 促进MMP-2 和MMP-9 的活性 | 第22-23页 |
三、讨论 | 第23-24页 |
四、小结 | 第24-25页 |
第二章 67LR 瞬时转染对转移相关基因表达的影响 | 第25-40页 |
一、材料与方法 | 第26-31页 |
·细胞培养 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26-27页 |
·质粒抽提 | 第27-29页 |
·引物设计 | 第29页 |
·质粒转染 | 第29-30页 |
·半定量 RT-PCR | 第30-31页 |
·统计学方法 | 第31页 |
二、结果 | 第31-35页 |
·67LR 对MMPs 表达的影响 | 第31-33页 |
·67LR 对 TIMPs 表达的影响 | 第33-34页 |
·67LR 对其他转移相关基因表达的影响 | 第34-35页 |
三、讨论 | 第35-39页 |
四、小结 | 第39-40页 |
第三章 67LR knock-down 对转移相关基因表达的影响 | 第40-58页 |
一、材料与方法 | 第41-45页 |
·细胞培养 | 第41页 |
·siRNA 设计及合成 | 第41-42页 |
·siRNA 转染 | 第42-43页 |
·流式细胞术检测 | 第43页 |
·半定量RT-PCR | 第43-45页 |
·统计学分析 | 第45页 |
二、结果 | 第45-55页 |
·67LR RNAi 效果鉴定 | 第45-47页 |
·67LR knock-down 对MMPs 表达的影响 | 第47-49页 |
·67LR knock-down 对TIMPs 表达的影响 | 第49-52页 |
·67LR knock-down 对其他转移相关基因表达的影响 | 第52-55页 |
三、讨论 | 第55-57页 |
四、小结 | 第57-58页 |
总结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
综述 | 第65-75页 |
在读期间发表论文 | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |