| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-13页 |
| 前言 | 第13-29页 |
| 一、抗体介导的肺癌靶向治疗 | 第13-19页 |
| 二、链霉亲和素-生物素系统在预靶向免疫治疗上的应用 | 第19-24页 |
| 三、抗人肺癌单克隆抗体3D3的研究进展和临床应用前景 | 第24-26页 |
| 四、研究目的和内容 | 第26-29页 |
| 第一章 融合蛋白hu3D3/cSA的表达及其活性鉴定 | 第29-66页 |
| 一、材料和方法 | 第29-45页 |
| 1 材料 | 第29-34页 |
| ·菌株及质粒 | 第29页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第29-30页 |
| ·主要仪器及设备 | 第30-31页 |
| ·主要溶液的配制 | 第31-34页 |
| 2 方法 | 第34-45页 |
| ·hu3D3/cSA重组基因的设计 | 第34页 |
| ·引物的合成 | 第34-35页 |
| ·PCR扩增cSA基因 | 第35页 |
| ·重组质粒的构建及其转化 | 第35-37页 |
| ·重组子的筛选和序列分析 | 第37-39页 |
| ·hu3D3/cSA在大肠杆菌中的诱导表达 | 第39-40页 |
| ·目的蛋白hu3D3/cSA的纯化和复性 | 第40-42页 |
| ·目的蛋白hu3D3/cSA的活性分析 | 第42-45页 |
| ·融合蛋白hu3D3组分的活性分析 | 第42-44页 |
| ·融合蛋白cSA组分的活性分析 | 第44-45页 |
| 二、结果与分析 | 第45-61页 |
| 1 理论设计的hu3D3/cSA基因核苷酸序列 | 第45-46页 |
| 2 cSA基因的扩增 | 第46页 |
| 3 重组质粒hu3D3/cSA/pET-22b(+)的筛选和序列分析 | 第46-49页 |
| 4 目的蛋白hu3D3/cSA的表达 | 第49-52页 |
| 5 目的蛋白hu3D3/cSA的高效表达与纯化 | 第52页 |
| 6 蛋白浓度的测定 | 第52页 |
| 7 目的蛋白的活性鉴定 | 第52-61页 |
| ·融合蛋白hu3D3组分的活性鉴定 | 第52-58页 |
| ·融合蛋白cSA组分的活性鉴定 | 第58-61页 |
| 三、讨论 | 第61-66页 |
| 第二章 hu3D3/cSA介导多种药物对不同细胞株的作用 | 第66-91页 |
| 一、材料和方法 | 第66-73页 |
| 1 材料 | 第66-67页 |
| ·细胞株 | 第66页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第66页 |
| ·主要仪器及设备 | 第66-67页 |
| ·主要溶液的配制 | 第67页 |
| 2 方法 | 第67-73页 |
| ·抗肿瘤药物的选择 | 第67-68页 |
| ·BNHS标记抗肿瘤药物 | 第68页 |
| ·生物素化抗肿瘤药物的活性检测 | 第68-69页 |
| ·体外细胞实验分析比较hu3D3/cSA联合抗肿瘤药物对不同细胞株的作用 | 第69-73页 |
| ·光学显微镜观察细胞的形态结构 | 第71页 |
| ·台盼蓝染色法描述细胞的生长曲线 | 第71页 |
| ·MTT实验比较hu3D3/cSA联合抗肿瘤药物对不同细胞株的杀伤作用 | 第71-73页 |
| 二、结果与分析 | 第73-86页 |
| 1 抗肿瘤药物的选择 | 第73-74页 |
| 2 抗肿瘤药物的生物素标记与纯化 | 第74-75页 |
| 3 生物素化抗肿瘤药物的活性检测 | 第75-76页 |
| 4 hu3D3/cSA联合抗肿瘤药物对不同细胞株的体外细胞实验 | 第76-86页 |
| ·细胞形态学观察 | 第76-78页 |
| ·细胞生长曲线描述 | 第78-81页 |
| ·MTT实验 | 第81-86页 |
| ·各实验组对靶细胞A549的杀伤作用 | 第81-83页 |
| ·各实验组对非靶细胞MGC-803的杀伤作用 | 第83-86页 |
| 三、讨论 | 第86-91页 |
| 本文存在的问题及今后应深入开展的研究 | 第91-93页 |
| 总结 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
