| 摘要 | 第1-3页 |
| Summary | 第3-4页 |
| 英文缩写符号及中英文对照表 | 第4-9页 |
| 1 前言 | 第9-27页 |
| ·获得多价转基因植物的策略 | 第9-15页 |
| ·多基因和多个表达载体构建策略 | 第9-11页 |
| ·基因转化策略 | 第11-13页 |
| ·问题与展望 | 第13-15页 |
| ·融合基因研究进展 | 第15-18页 |
| ·利用融合蛋白对目的基因进行示踪 | 第15-16页 |
| ·利用融合基因增强目的基因的表达 | 第16页 |
| ·利用融合蛋白改变目的蛋白的免疫原性 | 第16-17页 |
| ·相同或相似功能的基因融合 | 第17-18页 |
| ·植物抗真菌病害基因工程的策略 | 第18-19页 |
| ·利用植物R基因 | 第19页 |
| ·利用抗菌蛋白基因的策略 | 第19页 |
| ·几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因及其应用 | 第19-21页 |
| ·几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因的特性 | 第19-20页 |
| ·几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因的应用 | 第20-21页 |
| ·Bar基因 | 第21-22页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第22-25页 |
| ·转化机理 | 第22-23页 |
| ·农柑菌介导的遗传转化方法 | 第23-24页 |
| ·农柑菌介导的基因转移方法不足之初 | 第24-25页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第25-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-40页 |
| ·技术路线 | 第27页 |
| ·实验材料 | 第27-31页 |
| ·植物材料 | 第27-28页 |
| ·菌株与质粒 | 第28-29页 |
| ·生化试剂和其它材料来源 | 第29页 |
| ·PCR引物 | 第29-31页 |
| ·实验方法 | 第31-40页 |
| ·植物材料的种植 | 第31页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第31-35页 |
| ·小量碱法提取质粒 | 第31-32页 |
| ·PCR反应体系 | 第32页 |
| ·PCR反应程序 | 第32页 |
| ·目的片段的回收 | 第32-33页 |
| ·目的片段与载体片段(Vector)的连接 | 第33页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第33页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定体系 | 第34-35页 |
| ·根癌农杆菌EHA105感受态细胞的制备及转化 | 第35-37页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的转化 | 第36页 |
| ·农杆菌Ti质粒DNA提取 | 第36-37页 |
| ·利用农杆菌介导转化烟草 | 第37-38页 |
| ·农杆菌培养 | 第37页 |
| ·烟草转化、培养和植株再生 | 第37-38页 |
| ·烟草再生植株的PCR检测 | 第38-40页 |
| ·CTAB微量法提取基因组DNA | 第38-39页 |
| ·烟草再生植株的PCR筛选 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-58页 |
| ·Chi和Glu基因的亚克隆 | 第40-45页 |
| ·Chi基因的亚克隆及测序 | 第40-43页 |
| ·Glu基因的亚克隆及测序 | 第43-45页 |
| ·中间载体的构建 | 第45-51页 |
| ·中间载体pAHC25的改造 | 第45-47页 |
| ·中间载体pAHC25-Chi和pAHC25-Glu的构建 | 第47-48页 |
| ·植物表达载体pBI121的改造 | 第48-49页 |
| ·植物表达载体pBI121-Ubi-Bar/Chi和pBI121-Ubi-Bar/Glu的构建 | 第49-51页 |
| ·双价融合基因植物表达载体的构建过程 | 第51-55页 |
| ·融合基因的构建过程 | 第51-52页 |
| ·融合基因的PCR和酶切鉴定 | 第52页 |
| ·融合基因的测序 | 第52-54页 |
| ·双价植物表达载体的构建 | 第54-55页 |
| ·植物表达载体质粒转化农杆菌 | 第55-56页 |
| ·烟草再生植株的获得 | 第56-57页 |
| ·烟草再生植株的PCR检测 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| ·载体的容量方面 | 第58页 |
| ·启动子的选择 | 第58-59页 |
| ·植物抗病反应中抗真菌蛋白的协同效应 | 第59页 |
| ·Bar基因 | 第59-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 作者简介 | 第68-69页 |
| 导师简介 | 第69-70页 |