摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 引言 | 第11-21页 |
·细胞因子概述 | 第11-16页 |
·细胞因子研究概况 | 第11-12页 |
·细胞因子的产生 | 第12页 |
·细胞因子的共同特性 | 第12-13页 |
·细胞因子在兽医学中的应用 | 第13-16页 |
·BOIL-2 的研究进展 | 第16-19页 |
·IL-2 及IL-2R 的结构特点 | 第16-17页 |
·IL-2 的生物学功能 | 第17页 |
·IL-2 的应用 | 第17-19页 |
·研究目的与意义 | 第19-21页 |
2 材料与方法 | 第21-34页 |
·实验材料 | 第21-22页 |
·实验动物 | 第21页 |
·菌种与载体 | 第21页 |
·工具酶和主要试剂 | 第21页 |
·其它相关试剂 | 第21页 |
·标准参照物 | 第21页 |
·主要试剂的配制 | 第21-22页 |
·仪器设备 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-33页 |
·从牛外周血淋巴细胞中分离总RNA | 第22-23页 |
·BoIL-2 基因RT-PCR 扩增 | 第23-24页 |
·PCR 扩增片段的克隆 | 第24-26页 |
·重组质粒的鉴定 | 第26-27页 |
·原核表达载体的构建 | 第27-28页 |
·重组质粒的鉴定 | 第28-29页 |
·重组BoIL-2 在大肠杆菌表达系统中的诱导表达 | 第29-30页 |
·免疫印记(Western-blot)分析 | 第30-31页 |
·重组蛋白的纯化 | 第31页 |
·纯化蛋白的复性 | 第31页 |
·MTT 法测重组蛋白的生物活性 | 第31-32页 |
·多克隆抗体的制备 | 第32页 |
·多克隆抗体的鉴定 | 第32-33页 |
·数据处理 | 第33-34页 |
3 结果 | 第34-47页 |
·牛外周血淋巴细胞中分离总RNA | 第34页 |
·RT-PCR 法扩增编码 BoIL-2 基因序列 | 第34-35页 |
·PCR 产物的纯化与回收 | 第35-36页 |
·重组质粒 pMD-18-T-IL-2 的鉴定 | 第36-40页 |
·重组质粒pMD-18-T-IL-2 菌落PCR 鉴定 | 第36页 |
·重组质粒pMD-18-T-IL-2 的限制性内切酶鉴定 | 第36页 |
·重组质粒pMD-18-T-IL-2 的PCR 鉴定 | 第36-37页 |
·重组质粒pMD-18-T-IL-2 的测序结果及分析 | 第37-40页 |
·BoIL-2 基因在大肠杆菌中的表达及多克隆抗体的制备 | 第40-47页 |
·重组表达质粒的鉴定 | 第40-41页 |
·重组蛋白的表达、鉴定与纯化 | 第41-44页 |
·MTT 法测定BoIL-2 重组蛋白的生物活性 | 第44-45页 |
·多克隆抗体的制备 | 第45-47页 |
4 讨论 | 第47-50页 |
·BOIL-2 基因的克隆与序列分析 | 第47-48页 |
·BOIL-2 在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第48页 |
·复性重组蛋白生物学活性的测定 | 第48-49页 |
·多克隆抗体的制备及鉴定 | 第49-50页 |
5 结论 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第58页 |