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牛白细胞介素2基因克隆、表达及多克隆抗体的制备

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 引言第11-21页
   ·细胞因子概述第11-16页
     ·细胞因子研究概况第11-12页
     ·细胞因子的产生第12页
     ·细胞因子的共同特性第12-13页
     ·细胞因子在兽医学中的应用第13-16页
   ·BOIL-2 的研究进展第16-19页
     ·IL-2 及IL-2R 的结构特点第16-17页
     ·IL-2 的生物学功能第17页
     ·IL-2 的应用第17-19页
   ·研究目的与意义第19-21页
2 材料与方法第21-34页
   ·实验材料第21-22页
     ·实验动物第21页
     ·菌种与载体第21页
     ·工具酶和主要试剂第21页
     ·其它相关试剂第21页
     ·标准参照物第21页
     ·主要试剂的配制第21-22页
     ·仪器设备第22页
   ·实验方法第22-33页
     ·从牛外周血淋巴细胞中分离总RNA第22-23页
     ·BoIL-2 基因RT-PCR 扩增第23-24页
     ·PCR 扩增片段的克隆第24-26页
     ·重组质粒的鉴定第26-27页
     ·原核表达载体的构建第27-28页
     ·重组质粒的鉴定第28-29页
     ·重组BoIL-2 在大肠杆菌表达系统中的诱导表达第29-30页
     ·免疫印记(Western-blot)分析第30-31页
     ·重组蛋白的纯化第31页
     ·纯化蛋白的复性第31页
     ·MTT 法测重组蛋白的生物活性第31-32页
     ·多克隆抗体的制备第32页
     ·多克隆抗体的鉴定第32-33页
   ·数据处理第33-34页
3 结果第34-47页
   ·牛外周血淋巴细胞中分离总RNA第34页
   ·RT-PCR 法扩增编码 BoIL-2 基因序列第34-35页
   ·PCR 产物的纯化与回收第35-36页
   ·重组质粒 pMD-18-T-IL-2 的鉴定第36-40页
     ·重组质粒pMD-18-T-IL-2 菌落PCR 鉴定第36页
     ·重组质粒pMD-18-T-IL-2 的限制性内切酶鉴定第36页
     ·重组质粒pMD-18-T-IL-2 的PCR 鉴定第36-37页
     ·重组质粒pMD-18-T-IL-2 的测序结果及分析第37-40页
   ·BoIL-2 基因在大肠杆菌中的表达及多克隆抗体的制备第40-47页
     ·重组表达质粒的鉴定第40-41页
     ·重组蛋白的表达、鉴定与纯化第41-44页
     ·MTT 法测定BoIL-2 重组蛋白的生物活性第44-45页
     ·多克隆抗体的制备第45-47页
4 讨论第47-50页
   ·BOIL-2 基因的克隆与序列分析第47-48页
   ·BOIL-2 在大肠杆菌中的表达与纯化第48页
   ·复性重组蛋白生物学活性的测定第48-49页
   ·多克隆抗体的制备及鉴定第49-50页
5 结论第50-51页
致谢第51-52页
参考文献第52-58页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第58页

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