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猪四个候选基因的分离、鉴定及分子标记与杂种优势的关联分析

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-16页
资源家系测定性状的英文缩写第16-17页
第一章 文献综述第17-31页
 1 前言第17页
 2 猪肌肉生长发育及品质相关的候选基因研究进展第17-22页
   ·已明确的主效基因第17-18页
   ·其它候选基因第18-22页
 3 拟分离基因的研究现状第22-25页
   ·谷胱甘肽S转移酶M2(Glutathione S-transferase M2,GSTM2)第22-23页
   ·肌联蛋白帽(Titin-cap,TCAP)第23页
   ·肌动蛋白a2(Actin,Alpha 2,ACTA2)第23-24页
   ·双特异性磷酸酶13(Dual Specificity Phosphatase 13,DUSP13)第24-25页
 4. 电脑克隆在分离新基因中的应用第25-27页
 5. 分子标记在杂种优势研究中的应用第27-29页
   ·利用分子标记研究杂种优势的遗传基础第27-28页
   ·通过分子标记研究亲本间遗传差异与杂种优势的关系第28页
   ·分子标记在杂种优势相关基因研究中的应用第28-29页
 6. 无义介导的mRNA降解第29-31页
第二章 本研究的目的和意义第31-32页
第三章 四个候选基因的分离、鉴定第32-91页
 1 引言第32页
 2 试验材料第32-34页
   ·试验样品和性状测定第32-33页
     ·DNA样品第32页
     ·组织样品第32页
     ·性状测定第32-33页
   ·主要仪器和设备第33页
   ·主要药品及试剂第33页
   ·缓冲液和常用试剂的配制第33-34页
 3 试验方法第34-45页
   ·猪基因组DNA的提取第34-35页
   ·基因组DNA的浓度测定和质量检测第35页
   ·总RNA的提取及cDNA第一链和SMART cDNA的合成第35-37页
     ·总RNA的提取第35-36页
     ·cDNA第一链的合成第36页
     ·SMART cDNA的合成第36-37页
   ·候选基因cDNA的分离第37-40页
     ·利用电子克隆策略设计引物第37-38页
     ·RT-PCR方法扩增cDNA第38页
     ·PCR产物的回收纯化、克隆和测序第38-40页
     ·RACE-PCR第40页
   ·DNA序列的生物信息学分析第40-41页
   ·候选基因基因组序列的分离及SNPs研究第41-44页
     ·引物设计第41页
     ·PCR反应第41页
     ·PCR产物回收、纯化和克隆测序第41页
     ·DNA序列的生物信息学分析第41页
     ·候选基因部分SNP位点的多态性检测第41-44页
   ·统计分析第44页
     ·分子标记在不同猪种中的等位基因频率及基因型频率计算第44页
     ·分子标记的基因效应分析第44页
   ·表达谱分析第44-45页
     ·RT-PCR组织表达谱分析第45页
     ·Real-time RT-PCR不同品种、不同发育阶段骨骼肌中的表达分析第45页
 4 结果与分析第45-84页
   ·猪GSTM2基因第45-56页
     ·总RNA的提取第45-46页
     ·猪GSTM2基因cDNA序列的克隆第46页
     ·猪GSTM2基因部分基因组序列的克隆第46-47页
     ·猪GSTM2基因序列的生物信息学分析第47-50页
     ·猪GSTM2基因的SNPs研究第50-53页
     ·猪GSTM2基因存在无义介导mRNA降解的可能性分析第53-54页
     ·猪GSTM2基因的表达谱分析第54-56页
   ·猪TCAP基因第56-64页
     ·猪TCAP基因部分基因组序列的克隆第56页
     ·猪TCAP基因序列的生物信息学分析第56-58页
     ·猪TCAP基因的SNPs研究第58-62页
     ·猪TCAP基因的表达谱分析第62-64页
   ·猪ACTA2基因第64-75页
     ·猪ACTA2基因cDNA序列的克隆第64页
     ·猪ACTA2基因部分基因组序列的克隆第64-65页
     ·猪ACTA2基因序列的生物信息学分析第65-69页
     ·猪ACTA2基因的SNPs研究第69-71页
     ·猪ACTA2基因的表达谱分析第71-75页
   ·猪DUSP13基因第75-84页
     ·猪DUSP13基因cDNA序列的克隆第75页
     ·猪DUSP13基因部分基因组序列的克隆第75-76页
     ·猪DUSP13基因序列的生物信息学分析第76-78页
     ·猪DUSP13基因的SNPs研究第78-82页
     ·猪DUSP13基因的表达谱分析第82-84页
 5 讨论第84-91页
   ·利用电子克隆策略分离猪新基因第84页
   ·猪与其他物种基因组和氨基酸的保守性第84-85页
   ·关于SNPs的生物学效应第85页
   ·关于ASP技术与多态检测方法第85-86页
   ·分子标记在不同猪群间基因频率分布第86-87页
   ·分子标记的遗传效应分析第87-88页
   ·组织表达谱分析第88-89页
   ·基因在不同品种、不同发育阶段骨骼肌的Real-time表达分析第89页
   ·关于无义介导的mRNA降解第89-91页
第四章 分子标记与杂种优势的关联分析第91-104页
 1 引言第91页
 2 试验材料第91页
   ·试验猪群和性状测定第91页
   ·主要仪器设备及试剂第91页
 3 试验方法第91-95页
   ·分子标记的选择及引物第91-93页
   ·分子标记在试验猪群中的基因分型第93-94页
     ·GSTM2、ACTA2、DUSP13的PCR-RFLP基因分型和TCAP-ASP基因分型第93页
     ·微卫星标记的基因分型第93-94页
   ·统计分析第94-95页
     ·杂种优势的计算第94页
     ·个体位点杂合度的计算第94页
     ·标记位点对性状杂种优势的单标记分析第94页
     ·个体杂合度与杂种优势的相关分析第94-95页
     ·不同个体杂合度水平间杂种优势的差异第95页
 4 结果与分析第95-102页
   ·微卫星标记PCR扩增和电泳结果第95页
   ·单标记分析结果第95-100页
   ·个体杂合度与性状杂种优势的相关分析第100-101页
   ·不同个体杂合度水平间杂种优势的差异第101-102页
 5 讨论第102-104页
   ·关于单标记分析第102-103页
   ·关于个体杂合度与性状杂种优势的相关分析第103页
   ·关于不同个体杂合度水平间杂种优势的差异第103-104页
小结第104-106页
 本研究已取得的成果第104-105页
 下一步工作第105-106页
参考文献第106-117页
致谢第117页

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