| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 文献综述部分 | 第12-30页 |
| 第一章 牛体外受精的研究进展 | 第12-22页 |
| 1 牛卵母细胞的体外成熟培养 | 第12-16页 |
| ·牛卵母细胞的主要来源 | 第12-13页 |
| ·牛卵母细胞体外成熟培养的影响因素 | 第13-16页 |
| 2 卵母细胞的体外受精 | 第16-17页 |
| ·精子的体外获能 | 第16-17页 |
| ·卵母细胞的成熟情况 | 第17页 |
| 3 胚胎的体外培养 | 第17-21页 |
| ·培养液的该进 | 第18-20页 |
| ·培养体系的改进 | 第20-21页 |
| 4 小结 | 第21-22页 |
| 第二章 分子生物学法进行哺乳动物早期胚胎性别鉴定的研究进展 | 第22-30页 |
| 1 核酸探针法 | 第22页 |
| 2 荧光原位杂交(FISH)法 | 第22-23页 |
| 3 聚合酶链反应(PCR)法 | 第23-24页 |
| ·PCR的原理 | 第23页 |
| ·PCR方法进行胚胎性别鉴定 | 第23-24页 |
| 4 LAMP法 | 第24-28页 |
| ·LAMP法的引物设计 | 第24-25页 |
| ·LAMP法的扩增机制 | 第25-27页 |
| ·LAMP法的试剂 | 第27页 |
| ·LAMP法的特点 | 第27页 |
| ·改良LAMP法 | 第27页 |
| ·LAMP结果的检测 | 第27-28页 |
| ·LAMP法的应用 | 第28页 |
| 5 小结 | 第28-30页 |
| 试验研究部分 | 第30-58页 |
| 第三章 牛胚胎的体外生产 | 第30-38页 |
| 1 材料 | 第30-32页 |
| ·试验材料 | 第30页 |
| ·主要仪器及设备 | 第30-31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·操作液 | 第31-32页 |
| 2 方法 | 第32-33页 |
| ·卵巢的收集与保存 | 第32页 |
| ·卵母细胞采集 | 第32页 |
| ·卵母细胞的筛选与分级 | 第32页 |
| ·卵母细胞成熟培养 | 第32页 |
| ·颗粒细胞单层(GCM)制作 | 第32-33页 |
| ·卵母细胞成熟判定 | 第33页 |
| ·精子的体外获能 | 第33页 |
| ·卵母细胞体外受精 | 第33页 |
| ·受精卵体外发育培养 | 第33页 |
| 3 试验设计 | 第33-34页 |
| 4 数据处理 | 第34页 |
| 5 结果 | 第34-35页 |
| ·EGF对卵母细胞体外成熟的影响 | 第34页 |
| ·肝素对卵裂率和胚胎发育的影响 | 第34-35页 |
| ·不同的培养体系对胚胎体外发育的影响 | 第35页 |
| 6 讨论 | 第35-37页 |
| ·EGF对卵母细胞体外成熟的影响 | 第35-36页 |
| ·肝素对卵裂率和胚胎发育的影响 | 第36页 |
| ·不同的培养体系对胚胎体外发育的影响 | 第36-37页 |
| 7 小结 | 第37-38页 |
| 第四章 环介导恒温扩增方法的研究 | 第38-47页 |
| 1 材料 | 第38-39页 |
| ·试验材料 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·仪器设备 | 第38-39页 |
| ·试剂配置 | 第39页 |
| 2 方法 | 第39-41页 |
| ·血样DNA的提取(酚-氯仿法) | 第39-40页 |
| ·引物设计 | 第40-41页 |
| 3 试验设计 | 第41页 |
| 4 结果 | 第41-45页 |
| ·优化LAMP的反应条件和反应体系 | 第41-44页 |
| ·引物特异性的研究 | 第44-45页 |
| 5 讨论 | 第45-46页 |
| ·不同浓度Betaine对反应结果的影响 | 第45页 |
| ·不同反应温度对反应结果的影响 | 第45页 |
| ·不同反应时间对反应结果的影响 | 第45页 |
| ·不同Mg~(2+)浓度对反应结果的影响 | 第45页 |
| ·不同浓度BIP(FIP)对反应结果的影响 | 第45页 |
| ·环引物LB和LF对反应结果的影响 | 第45-46页 |
| ·不同浓度的F2(B2)对反应结果的影响 | 第46页 |
| ·引物特异性的研究 | 第46页 |
| 6 小结 | 第46-47页 |
| 第五章 环介导恒温扩增结果的快速鉴定 | 第47-54页 |
| 1 材料 | 第47页 |
| ·试验材料 | 第47页 |
| ·主要试剂、仪器设备、试剂配置、DNA的提取和LAMP引物设计 | 第47页 |
| ·PCR引物设计和反应条件 | 第47页 |
| 2 方法 | 第47-48页 |
| ·LAMP结果的鉴定 | 第47-48页 |
| ·平行检测 | 第48页 |
| 3 结果 | 第48-52页 |
| ·核酸染料(EB)法 | 第48页 |
| ·硫酸铜共沉淀法 | 第48-51页 |
| ·LAMP结果的琼脂糖凝胶电泳检测和PCR平行检测 | 第51页 |
| ·对LAMP快速鉴定方法准确性的研究 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-53页 |
| 5 小结 | 第53-54页 |
| 第六章 环介导恒温扩增在牛胚胎性别鉴定中的应用 | 第54-58页 |
| 1 材料 | 第54页 |
| ·试验材料 | 第54页 |
| ·主要试剂、仪器设备和试剂配置 | 第54页 |
| 2 方法 | 第54页 |
| ·胚胎取样和取样细胞DNA的提取 | 第54页 |
| ·引物设计,溴化乙锭(EB)和硫酸铜检测结果和琼脂糖凝胶电泳 | 第54页 |
| 3 试验设计 | 第54-55页 |
| 4 结果 | 第55-56页 |
| 5 讨论 | 第56-57页 |
| 6 小结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 全文结论 | 第65-66页 |
| 图版 | 第66-69页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
