| 中文摘要 | 第1-13页 |
| 英文摘要 | 第13-18页 |
| 第一章 青稞抗旱资源的筛选与评价 | 第18-38页 |
| 摘要 | 第18页 |
| Abstract | 第18-19页 |
| 第一节 青稞耐失水能力的检察 | 第19-28页 |
| 引言 | 第19-21页 |
| 1 材料与方法 | 第21-23页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-23页 |
| ·失水率(WLR)的测定 | 第21-22页 |
| ·相对含水量(RWC)的测定 | 第22页 |
| ·反复干旱法检测青稞抗旱性 | 第22-23页 |
| ·实验数据的处理 | 第23页 |
| 2 结果与分析 | 第23-26页 |
| ·不同地区品种失水率分析 | 第23-24页 |
| ·失水率重复检测结果 | 第24页 |
| ·相对含水量分析 | 第24-25页 |
| ·盆栽缺水恢复结果 | 第25-26页 |
| 3 讨论 | 第26-27页 |
| 4 结论 | 第27-28页 |
| 第二节 不同抗旱性青稞对干旱胁迫的生理反应 | 第28-38页 |
| 引言 | 第28-29页 |
| 1 材料与方法 | 第29-32页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·生物化学试剂 | 第29页 |
| ·试剂的准备与配制 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-32页 |
| ·丙二醛含量的测定 | 第30-31页 |
| ·游离脯氨酸含量测定 | 第31-32页 |
| ·实验数据的分析处理 | 第32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-34页 |
| ·脯氨酸标准曲线 | 第32-33页 |
| ·脯氨酸含量分析 | 第33页 |
| ·丙二醛含量分析 | 第33-34页 |
| 3 讨论 | 第34-37页 |
| 4 结论 | 第37-38页 |
| 第二章 不同抗旱性青稞LEA2/LEA3蛋白基因与序列分析 | 第38-67页 |
| 摘要 | 第38页 |
| Abstract | 第38-40页 |
| 第一节 不同抗旱性青稞Dhn6基因的克隆与序列分析 | 第40-55页 |
| 引言 | 第40-42页 |
| 1 材料与方法 | 第42-48页 |
| ·材料 | 第42-44页 |
| ·植物材料 | 第42页 |
| ·菌株与质粒 | 第42页 |
| ·主要药品与试剂 | 第42页 |
| ·培养基和溶液配制 | 第42-43页 |
| ·引物 | 第43-44页 |
| ·其它试剂的配制 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-48页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第44-45页 |
| ·RT-PCR扩增Dhn6基因 | 第45-46页 |
| ·目的基因RT-PCR产物的回收 | 第46页 |
| ·大肠杆菌(JM109)感受态细胞的制备 | 第46-47页 |
| ·Dhn6基因片段的连接与转化 | 第47页 |
| ·重组子的筛选及鉴定 | 第47-48页 |
| ·阳性克隆的检测与序列分析 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-52页 |
| ·Dhn6基因的RT-PCR结果 | 第48-49页 |
| ·目的基因的PCR和酶切鉴定结果 | 第49页 |
| ·Dhn6基因的序列分析结果 | 第49-51页 |
| ·脱水素6的氨基酸序列分析比较结果 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 4 结论 | 第54-55页 |
| 第二节 不同抗旱性青稞HVA1基因的克隆与序列分析 | 第55-67页 |
| 引言 | 第55-57页 |
| 1 材料与方法 | 第57-59页 |
| ·材料 | 第57-58页 |
| ·植物材料 | 第57页 |
| ·菌株与质粒 | 第57页 |
| ·主要药品、试剂、培养基和溶液 | 第57页 |
| ·引物 | 第57-58页 |
| ·方法 | 第58-59页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第58页 |
| ·RT-PCR扩增HVA1基因 | 第58页 |
| ·目的基因的RT-PCR扩增产物的回收 | 第58页 |
| ·大肠杆菌(JM109)感受态细胞的制备 | 第58页 |
| ·HVA1基因片段的连接与转化 | 第58-59页 |
| ·重组子的筛选及鉴定 | 第59页 |
| ·重组子的鉴定与序列测定 | 第59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-63页 |
| ·LEA3蛋白基因的RT-PCR | 第59页 |
| ·LEA3蛋白基因的克隆与重组子检测 | 第59-60页 |
| ·序列测定与分析 | 第60-62页 |
| ·氨基酸序列结构与分析 | 第62-63页 |
| ·氨基酸基元序列结构比较 | 第63页 |
| 3 讨论 | 第63-66页 |
| 4 结论 | 第66-67页 |
| 第三章 不同抗旱性青稞LEA2/LEA3蛋白基因的差异表达 | 第67-97页 |
| 摘要 | 第67-68页 |
| Abstract | 第68-69页 |
| 第一节 青稞失水变化率与HVA1基因的表达关系 | 第69-82页 |
| 引言 | 第69-72页 |
| 1 材料与方法 | 第72-76页 |
| ·材料 | 第72-73页 |
| ·植物材料 | 第72页 |
| ·主要药品与试剂 | 第72页 |
| ·引物 | 第72-73页 |
| ·方法 | 第73-76页 |
| ·失水变化率(Dynamic water loss rate,WLR)的测定 | 第73页 |
| ·材料的处理与样品cDNA的合成 | 第73-75页 |
| ·目的基因和内参基因的引物专一性检测 | 第75页 |
| ·SYBR Green定量PCR检测 | 第75-76页 |
| ·重复性实验与数据处理 | 第76页 |
| 2 结果与分析 | 第76-80页 |
| ·抗旱性对照青稞品种失水变化率分析 | 第76-77页 |
| ·HVA1基因的基准曲线和裂解曲线分析 | 第77页 |
| ·a-tubulin2基因的基准曲线和裂解曲线分析 | 第77-78页 |
| ·阴性对照的基准曲线和裂解曲线观察 | 第78-79页 |
| ·HVA1基因的相对表达水平分析 | 第79-80页 |
| 3 讨论 | 第80-81页 |
| 4 结论 | 第81-82页 |
| 第二节 不同抗旱性青稞脱水素基因的干旱差异表达 | 第82-97页 |
| 引言 | 第82-84页 |
| 1 材料与方法 | 第84-87页 |
| ·材料 | 第84-86页 |
| ·植物材料 | 第84-85页 |
| ·主要药品与试剂 | 第85页 |
| ·引物 | 第85-86页 |
| ·方法 | 第86-87页 |
| ·材料的处理与样品cDNA的合成 | 第86页 |
| ·目的基因和内参基因的引物专一性检测 | 第86页 |
| ·SYBR Green定量PCR检测 | 第86-87页 |
| ·重复性实验与数据处理 | 第87页 |
| 2 结果与分析 | 第87-93页 |
| ·脱水素基因的基准曲线和裂解曲线分析 | 第87-90页 |
| ·Dhn6基因的相对表达水平分析 | 第90-91页 |
| ·Dhn11基因的相对表达水平分析 | 第91-92页 |
| ·Dhn13基因的相对表达水平分析 | 第92-93页 |
| 3 讨论 | 第93-95页 |
| 4 结论 | 第95-97页 |
| 第四章 后续工作的展望 | 第97-100页 |
| (一) 建立完善的抗旱资源筛选评价体系 | 第97-98页 |
| (二) 探讨LEA蛋白基因的顺式作用成分 | 第98页 |
| (三) 开展LEA蛋白结构与功能的研究 | 第98-99页 |
| (四) 开展抗旱基因遗传转化利用的研究 | 第99-100页 |
| 第五章 文献综述 | 第100-126页 |
| 1 植物抗旱机理的研究进展 | 第100-103页 |
| ·植物形态结构特征对抗旱性的影响 | 第100-101页 |
| ·渗透调节对植物抗旱性的影响 | 第101-103页 |
| ·活性氧清除 | 第103页 |
| 2 LEA蛋白与植物的抗旱性 | 第103-109页 |
| ·LEA蛋白的性质 | 第103-104页 |
| ·LEA蛋白的类型、结构和功能 | 第104-106页 |
| ·LEA基因表达与调控 | 第106-109页 |
| 3.大麦LEA蛋白的研究进展 | 第109-122页 |
| ·HVA1基因的研究进展 | 第109-112页 |
| ·大麦脱水素的研究进展 | 第112-122页 |
| 4 实时荧光定量PCR的研究进展 | 第122-126页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR的原理 | 第122-123页 |
| ·PCR产物的检测和定量方法 | 第123-124页 |
| ·实时定量RT-PCR在mRNA表达水平检测上的应用 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-149页 |
| 致谢 | 第149-150页 |
| 博士在读期间发表论文情况 | 第150页 |
