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口蹄疫病毒P12A-3C基因在百脉根中的表达及其免疫豚鼠试验

第一章 引言第1-22页
   ·口蹄疫概况第13页
   ·口蹄疫病毒第13页
   ·牧草百脉根概况第13-14页
   ·口蹄疫疫苗研究进展第14-16页
     ·灭活疫苗第14-15页
     ·弱毒活疫苗第15页
     ·新型疫苗第15-16页
   ·转基因植物疫苗研究概况第16-21页
     ·基本原理第16-17页
     ·表达载体的构建第17页
     ·根癌农杆菌Ti质粒转化方法第17-18页
     ·转基因植物疫苗国内外研究进展第18-19页
     ·转基因植物疫苗存在问题及发展方向第19-20页
     ·转基因植物的生物安全问题第20-21页
   ·本研究的目的和意义第21-22页
第二章 口蹄疫病毒Asial/YNBS/58株目的基因P12A、3C的克隆和序列分析第22-29页
   ·材料与方法第22-25页
     ·病毒与乳鼠第22页
     ·载体及主要试剂第22页
     ·引物第22页
     ·病毒增殖第22-23页
     ·病毒RNA提取第23页
     ·cDNA合成第23页
     ·P1-2A、3C基因的扩增第23页
     ·P1-2A、3C基因的克隆与鉴定第23-25页
   ·结果与分析第25-26页
     ·P1-2A、3C基因的PCR扩增与鉴定第25页
     ·重组质粒鉴定第25-26页
     ·序列测定第26页
     ·密码子偏好性分析第26页
   ·讨论第26-29页
第三章 口蹄疫病毒Asial/YNBS/58植物双元表达载体的构建第29-35页
   ·材料和方法第29-31页
     ·质粒和菌株第29页
     ·试剂和工具酶第29页
     ·主要仪器第29页
     ·pcDNA3.1(+)-3C质粒载体的构建第29-30页
     ·pcDNA3.1(+)-P12A-3C质粒载体的构建第30-31页
     ·pBin438-P12A-3C质粒载体的构建第31页
     ·三亲杂交法将pBin438-P12A-3C导入农杆菌第31页
     ·农杆菌目的基因的PCR检测第31页
   ·结果与分析第31-32页
     ·口蹄疫病毒P12A-3C基因植物表达载体的构建与鉴定第31-32页
   ·讨论第32-35页
第四章 口蹄疫病毒免疫原基因P12A-3C在百脉根中的转化及阳性植株的鉴定第35-42页
   ·材料和方法第35-38页
     ·种子和转化载体第35页
     ·主要试剂及仪器第35页
     ·培养基、激素及抗生素第35-36页
     ·种子消毒方法第36页
     ·百脉根遗传转化第36-37页
     ·未转化植株的组织培养第37页
     ·PCR法检测外源基因的整合第37页
     ·RT-PCR法检测外源基因的整合第37-38页
     ·表达蛋白的ELISA检测第38页
   ·结果与分析第38-39页
   ·讨论第39-42页
第五章 转基因植株的动物免疫试验第42-46页
   ·材料和方法第42-43页
     ·植物材料和实验动物第42页
     ·主要试剂第42页
     ·疫苗的制备及免疫剂量第42页
     ·动物免疫第42-43页
     ·抗体监测第43页
   ·结果与分析第43-44页
     ·抗体的动态变化第43-44页
   ·讨论第44-46页
第六章 全文总结第46-47页
参考文献第47-56页
致谢第56-57页
作者简历第57-58页
附录:第58-64页

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