凡纳滨对虾一种HSC70的cDNA克隆,原核表达及其体内表达分析
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-14页 |
| ·研究背景和意义 | 第12-13页 |
| ·拟解决的问题及研究内容 | 第13-14页 |
| 第二章 文献综述 | 第14-30页 |
| ·热休克蛋白概述 | 第14-16页 |
| ·热休克蛋白70的生物学特性及分子结构 | 第16-17页 |
| ·热休克蛋白70基因的表达调控 | 第17-22页 |
| ·热休克因子(HSF) | 第17-19页 |
| ·热休克元件(HSE) | 第19-20页 |
| ·热休克蛋白70基因的转录调控模式 | 第20-22页 |
| ·热休克蛋白70的生物学功能 | 第22-28页 |
| ·分子伴侣 | 第22-23页 |
| ·HSP70与细胞凋亡 | 第23页 |
| ·HSP70与免疫 | 第23-25页 |
| ·HSP70与衰老 | 第25-26页 |
| ·HSP70与环境胁迫 | 第26-28页 |
| ·虾类HSP70的研究进展 | 第28-30页 |
| 第三章 材料与方法 | 第30-44页 |
| ·材料、试剂及仪器 | 第30-31页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·试剂 | 第30-31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-44页 |
| ·亚致死温度与致死温度实验 | 第31-32页 |
| ·亚致死温度与WSSV注射实验 | 第32页 |
| ·HSC70的RACE克隆及基因组DNA扩增 | 第32-40页 |
| ·对虾HSC70在非应激及热应激状态下的表达分析 | 第40-41页 |
| ·凡纳滨对虾HSC70基因在大肠杆菌中的表达 | 第41-44页 |
| 第四章 实验结果与分析 | 第44-60页 |
| ·凡纳滨对虾的热应激与高温耐受性 | 第44页 |
| ·亚致死温度的选择 | 第44页 |
| ·热应激诱导的高温耐受性 | 第44页 |
| ·凡纳滨对虾的热应激与抗WSSV作用 | 第44-46页 |
| ·对虾一种HSC70基因的克隆及序列分析 | 第46-53页 |
| ·HSC70 cDNA及DNA克隆 | 第46-48页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第48页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第48-49页 |
| ·HSC70多序列比对和分子系统发育分析 | 第49-53页 |
| ·HSC70体内表达的半定量分析 | 第53-56页 |
| ·HSC70的组织特异性表达 | 第53-54页 |
| ·HSC70在热应激条件下的表达 | 第54-56页 |
| ·pET-3c/HSC70载体的构建及诱导表达 | 第56-60页 |
| ·表达质粒pET-3c/HSC70的构建 | 第56-57页 |
| ·HSC70在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达 | 第57页 |
| ·不同条件下凡纳滨对虾HSC70的诱导表达 | 第57-59页 |
| ·HSC70 Western Blot分析 | 第59-60页 |
| 第五章 讨论 | 第60-67页 |
| ·对虾热应激的保护作用 | 第60-61页 |
| ·HSC70基因及其分子系统发育分析 | 第61-63页 |
| ·凡纳滨对虾HSC70的基因结构与蛋白质结构 | 第61-62页 |
| ·凡纳滨对虾HSC70的分子系统发育分析 | 第62-63页 |
| ·HSC70在虾体内的表达分析 | 第63-65页 |
| ·凡纳滨对虾HSC70的原核表达 | 第65-67页 |
| 第六章 结论 | 第67-68页 |
| ·热应激的保护作用 | 第67页 |
| ·HSC70的基因克隆 | 第67页 |
| ·HSC70的体内组织表达 | 第67页 |
| ·HSC70在热应激反应中的表达 | 第67页 |
| ·HSC70的原核表达 | 第67-68页 |
| 第七章 展望 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 研究生期间发表论文情况 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |