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广西猪瘟病毒不同来源株的E2基因的克隆和序列分析

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
第一章 前言第9-26页
   ·病原学第9-11页
     ·CSFV的分类、形态结构与理化特征第9页
     ·CSFV的抗原性、毒力和分型第9-10页
     ·CSFV的培养特性第10-11页
     ·CSFV的遗传变异第11页
   ·CSFV的分子结构第11-17页
     ·CSFV基因组结构第11-12页
     ·CSFV基因组和蛋白质功能第12-17页
   ·CSFV的繁殖过程及致病机理第17-19页
     ·CSFV的侵入及其在宿主体内的分布第17-18页
     ·CSFV在宿主细胞中的繁殖过程第18-19页
     ·CSFV对宿主细胞的致病机理第19页
   ·CSFV分子流行病学研究第19-22页
     ·CSFV基因分群第20-21页
     ·国内流行CSFV E2基因的抗原变异第21-22页
   ·猪瘟的国际流行态势与我国流行现状第22-24页
     ·猪瘟的国际流行态势第22-23页
     ·我国猪瘟流行现状第23-24页
   ·本研究目的意义第24-26页
第二章 材料与方法第26-35页
   ·材料第26-29页
     ·CSFV病料第26页
     ·引物第26页
     ·试剂及主要试剂配制第26-28页
     ·仪器第28-29页
   ·方法第29-35页
     ·实验方案:技术路线第29页
     ·母猪外周淋巴细胞的分离第29页
     ·CSFV的分离培养第29-30页
     ·病料阳性鉴定第30页
     ·CSFV RNA的提取第30页
     ·反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)第30-31页
     ·PCR产物胶回收第31-32页
     ·感受态细胞的制备第32页
     ·基因克隆第32-33页
     ·基因测序第33-34页
     ·测序结果的处理与分析第34-35页
第三章 结果与分析第35-56页
   ·采集病料的检测结果第35页
   ·阳性病料RT-PCR结果第35-36页
   ·阳性病料接种PK15细胞后RT-PCR结果第36页
   ·CSFV E2基因RT-PCR第36-37页
   ·纯化结果第37页
   ·重组质粒的酶切鉴定第37-38页
   ·重组质粒的PCR鉴定第38页
   ·E2基因核苷酸序列的测定与比较第38-47页
   ·氨基酸序列对比第47-50页
   ·同源性分析第50-52页
   ·遗传树分析第52-56页
第四章 讨论第56-61页
   ·猪瘟的持续感染和垂直传播第56页
   ·引物特异性第56-57页
   ·重组质粒切酶及PCR鉴定第57页
   ·序列分析第57-60页
     ·核苷酸序列比较第57-58页
     ·氨基酸序列比较第58页
     ·主要抗原表位B、C区氨基酸变异第58页
     ·抗原表位A、D区氨基酸变异第58-59页
     ·E2蛋白中Cys变异情况第59页
     ·WH303和4-9D4单抗识别氨基酸位点变异情况第59页
     ·糖基化位点氨基酸变异情况第59页
     ·广西猪瘟病毒E2蛋白多态性分析第59-60页
     ·遗传学分析第60页
   ·展望第60-61页
第五章 结论第61-62页
参考文献第62-67页
致谢第67-68页
攻读学位期间发表的学术论文第68页

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