中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
第一章 前言 | 第9-26页 |
·病原学 | 第9-11页 |
·CSFV的分类、形态结构与理化特征 | 第9页 |
·CSFV的抗原性、毒力和分型 | 第9-10页 |
·CSFV的培养特性 | 第10-11页 |
·CSFV的遗传变异 | 第11页 |
·CSFV的分子结构 | 第11-17页 |
·CSFV基因组结构 | 第11-12页 |
·CSFV基因组和蛋白质功能 | 第12-17页 |
·CSFV的繁殖过程及致病机理 | 第17-19页 |
·CSFV的侵入及其在宿主体内的分布 | 第17-18页 |
·CSFV在宿主细胞中的繁殖过程 | 第18-19页 |
·CSFV对宿主细胞的致病机理 | 第19页 |
·CSFV分子流行病学研究 | 第19-22页 |
·CSFV基因分群 | 第20-21页 |
·国内流行CSFV E2基因的抗原变异 | 第21-22页 |
·猪瘟的国际流行态势与我国流行现状 | 第22-24页 |
·猪瘟的国际流行态势 | 第22-23页 |
·我国猪瘟流行现状 | 第23-24页 |
·本研究目的意义 | 第24-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-35页 |
·材料 | 第26-29页 |
·CSFV病料 | 第26页 |
·引物 | 第26页 |
·试剂及主要试剂配制 | 第26-28页 |
·仪器 | 第28-29页 |
·方法 | 第29-35页 |
·实验方案:技术路线 | 第29页 |
·母猪外周淋巴细胞的分离 | 第29页 |
·CSFV的分离培养 | 第29-30页 |
·病料阳性鉴定 | 第30页 |
·CSFV RNA的提取 | 第30页 |
·反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第30-31页 |
·PCR产物胶回收 | 第31-32页 |
·感受态细胞的制备 | 第32页 |
·基因克隆 | 第32-33页 |
·基因测序 | 第33-34页 |
·测序结果的处理与分析 | 第34-35页 |
第三章 结果与分析 | 第35-56页 |
·采集病料的检测结果 | 第35页 |
·阳性病料RT-PCR结果 | 第35-36页 |
·阳性病料接种PK15细胞后RT-PCR结果 | 第36页 |
·CSFV E2基因RT-PCR | 第36-37页 |
·纯化结果 | 第37页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第37-38页 |
·重组质粒的PCR鉴定 | 第38页 |
·E2基因核苷酸序列的测定与比较 | 第38-47页 |
·氨基酸序列对比 | 第47-50页 |
·同源性分析 | 第50-52页 |
·遗传树分析 | 第52-56页 |
第四章 讨论 | 第56-61页 |
·猪瘟的持续感染和垂直传播 | 第56页 |
·引物特异性 | 第56-57页 |
·重组质粒切酶及PCR鉴定 | 第57页 |
·序列分析 | 第57-60页 |
·核苷酸序列比较 | 第57-58页 |
·氨基酸序列比较 | 第58页 |
·主要抗原表位B、C区氨基酸变异 | 第58页 |
·抗原表位A、D区氨基酸变异 | 第58-59页 |
·E2蛋白中Cys变异情况 | 第59页 |
·WH303和4-9D4单抗识别氨基酸位点变异情况 | 第59页 |
·糖基化位点氨基酸变异情况 | 第59页 |
·广西猪瘟病毒E2蛋白多态性分析 | 第59-60页 |
·遗传学分析 | 第60页 |
·展望 | 第60-61页 |
第五章 结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第68页 |