英文缩写词表 | 第1-11页 |
前言 | 第11-13页 |
第一章 文献回顾 | 第13-32页 |
第一节 雌激素受体β(ERβ)的结构、功能及其与疾病的关系 | 第13-26页 |
·雌激素受体β(ERβ)的结构 | 第13-15页 |
·ERβ的功能 | 第15-19页 |
·ERβ在人体内的分布 | 第19-22页 |
·ERβ与肿瘤的关系 | 第22-26页 |
第二节 ERβ与前列腺癌的关系 | 第26-32页 |
·雌激素受体的表达 | 第27-28页 |
·ERβ亚型与前列腺癌发生的关系 | 第28-29页 |
·雌激素受体β亚单位的检测和前列腺癌的治疗 | 第29-30页 |
·ERβ研究展望 | 第30-32页 |
第二章 实验材料和方法 | 第32-54页 |
第一节 实验材料 | 第32-33页 |
·主要仪器 | 第32页 |
·主要试剂 | 第32页 |
·质粒 | 第32-33页 |
·抗体 | 第33页 |
·菌株 | 第33页 |
·实验标本 | 第33页 |
·细胞 | 第33页 |
第二节 实验方法 | 第33-54页 |
·hERβ全长基因的获得 | 第33-37页 |
·pcDNA3.1-hERβ重组质粒的构建 | 第37-39页 |
·pEGFP-C1-hERβ重组质粒的构建 | 第39-42页 |
·pGCsilencer~(TM)U6/Neo/GFP-siRNA-ERβ 重组质粒的构建与鉴定 | 第42-44页 |
·细胞培养及重组质粒的转染 | 第44-45页 |
·细胞生长抑制试验-MTT 法 | 第45页 |
·凋亡细胞的检测 | 第45-47页 |
·蛋白水平分析—Western blot | 第47-48页 |
·RT-PCR 半定量分析 | 第48-49页 |
·PC3 及PC-3M 细胞免疫细胞化学染色 | 第49-50页 |
·酶谱分析 | 第50-54页 |
第三章 实验结果 | 第54-94页 |
第一节 重组质粒的构建 | 第55-69页 |
·成功构建pcDNA3.1-hERβ重组质粒 | 第55-58页 |
·成功构建pEGFP-C1-hERβ重组质粒 | 第58-67页 |
·成功构建pGCsilencer~(TM)U6/Neo/GFP-siRNA-ERβ质粒 | 第67-69页 |
第二节 细胞培养及重组质粒的转染 | 第69-75页 |
·绿色荧光蛋白的观察 | 第69页 |
·免疫细胞化学方法测定hERβ | 第69页 |
·蛋白质水平鉴定hERβ | 第69-75页 |
·m RNA 水平鉴定hERβ | 第75页 |
第三节 ERβ 对PC-3 和PC-3M 细胞增殖抑制实验的影响 | 第75-80页 |
·ERβ对细胞形态及数目的影响 | 第75-77页 |
·ERβ对细胞活性的影响 | 第77-80页 |
·ERβ对细胞增殖周期的影响 | 第80页 |
第四节 ERβ 对PC-3 及PC-3M 细胞凋亡的影响 | 第80-90页 |
·凋亡指标检测 | 第80-83页 |
·ERβ对调节增殖和凋亡相关基因的影响 | 第83-90页 |
第五节 ERβ 对细胞侵袭性的影响 | 第90-94页 |
·基质胶浸润分析实验 | 第90-91页 |
·酶谱分析实验 | 第91-92页 |
·RT-PCR 分析MMP9 的mRNA 表达 | 第92-94页 |
第四章 讨论 | 第94-111页 |
第一节 质粒构建与转染 | 第95-100页 |
第二节 ERβ 对细胞增殖调控的影响 | 第100-102页 |
第三节 ERβ 对细胞凋亡信号传导的影响 | 第102-108页 |
第四节 ERβ 对细胞侵袭能力的影响 | 第108-111页 |
第五章 结论 | 第111-112页 |
参考文献 | 第112-127页 |
攻读博士学位期间已发表的文章 | 第127-128页 |
中文摘要 | 第128-134页 |
ABSTRACT | 第134-140页 |
致谢 | 第140页 |