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ERβ对激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3和PC-3M增殖和凋亡的影响

英文缩写词表第1-11页
前言第11-13页
第一章 文献回顾第13-32页
 第一节 雌激素受体β(ERβ)的结构、功能及其与疾病的关系第13-26页
   ·雌激素受体β(ERβ)的结构第13-15页
   ·ERβ的功能第15-19页
   ·ERβ在人体内的分布第19-22页
   ·ERβ与肿瘤的关系第22-26页
 第二节 ERβ与前列腺癌的关系第26-32页
   ·雌激素受体的表达第27-28页
   ·ERβ亚型与前列腺癌发生的关系第28-29页
   ·雌激素受体β亚单位的检测和前列腺癌的治疗第29-30页
   ·ERβ研究展望第30-32页
第二章 实验材料和方法第32-54页
 第一节 实验材料第32-33页
   ·主要仪器第32页
   ·主要试剂第32页
   ·质粒第32-33页
   ·抗体第33页
   ·菌株第33页
   ·实验标本第33页
   ·细胞第33页
 第二节 实验方法第33-54页
   ·hERβ全长基因的获得第33-37页
   ·pcDNA3.1-hERβ重组质粒的构建第37-39页
   ·pEGFP-C1-hERβ重组质粒的构建第39-42页
   ·pGCsilencer~(TM)U6/Neo/GFP-siRNA-ERβ 重组质粒的构建与鉴定第42-44页
   ·细胞培养及重组质粒的转染第44-45页
   ·细胞生长抑制试验-MTT 法第45页
   ·凋亡细胞的检测第45-47页
   ·蛋白水平分析—Western blot第47-48页
   ·RT-PCR 半定量分析第48-49页
   ·PC3 及PC-3M 细胞免疫细胞化学染色第49-50页
   ·酶谱分析第50-54页
第三章 实验结果第54-94页
 第一节 重组质粒的构建第55-69页
   ·成功构建pcDNA3.1-hERβ重组质粒第55-58页
   ·成功构建pEGFP-C1-hERβ重组质粒第58-67页
   ·成功构建pGCsilencer~(TM)U6/Neo/GFP-siRNA-ERβ质粒第67-69页
 第二节 细胞培养及重组质粒的转染第69-75页
   ·绿色荧光蛋白的观察第69页
   ·免疫细胞化学方法测定hERβ第69页
   ·蛋白质水平鉴定hERβ第69-75页
   ·m RNA 水平鉴定hERβ第75页
 第三节 ERβ 对PC-3 和PC-3M 细胞增殖抑制实验的影响第75-80页
   ·ERβ对细胞形态及数目的影响第75-77页
   ·ERβ对细胞活性的影响第77-80页
   ·ERβ对细胞增殖周期的影响第80页
 第四节 ERβ 对PC-3 及PC-3M 细胞凋亡的影响第80-90页
   ·凋亡指标检测第80-83页
   ·ERβ对调节增殖和凋亡相关基因的影响第83-90页
 第五节 ERβ 对细胞侵袭性的影响第90-94页
   ·基质胶浸润分析实验第90-91页
   ·酶谱分析实验第91-92页
   ·RT-PCR 分析MMP9 的mRNA 表达第92-94页
第四章 讨论第94-111页
 第一节 质粒构建与转染第95-100页
 第二节 ERβ 对细胞增殖调控的影响第100-102页
 第三节 ERβ 对细胞凋亡信号传导的影响第102-108页
 第四节 ERβ 对细胞侵袭能力的影响第108-111页
第五章 结论第111-112页
参考文献第112-127页
攻读博士学位期间已发表的文章第127-128页
中文摘要第128-134页
ABSTRACT第134-140页
致谢第140页

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