| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 缩写词表 | 第14-15页 |
| 第一章 棉花组织培养及生物技术研究进展 | 第15-37页 |
| ·棉花组织培养的概述 | 第15-19页 |
| ·棉花组织培养及植株再生 | 第15-17页 |
| ·愈伤组织的诱导和培养 | 第15-16页 |
| ·植株再生 | 第16-17页 |
| ·响体细胞胚发生和植株再生的因素 | 第17-19页 |
| ·基因型 | 第17页 |
| ·外植体 | 第17-18页 |
| ·激素 | 第18页 |
| ·培养条件 | 第18-19页 |
| ·植物体细胞无性系变异研究进展 | 第19-21页 |
| ·体细胞无性系变异特点及遗传基础 | 第19-20页 |
| ·植物体细胞无性系变异的影响因素 | 第20-21页 |
| ·外植体中预存的变异 | 第20页 |
| ·外植体的基因型和类型 | 第20页 |
| ·植株再生方式 | 第20-21页 |
| ·培养时间、继代次数的影响 | 第21页 |
| ·培养方式对体细胞变异的影响 | 第21页 |
| ·植物转基因研究进展 | 第21-28页 |
| ·植物遗传转化的发展 | 第21-22页 |
| ·植物遗传转化的方法 | 第22-25页 |
| ·根癌农杆菌介导的基因转移 | 第22-23页 |
| ·基因枪转化法 | 第23页 |
| ·PEG法 | 第23页 |
| ·显微注射法(microiniection) | 第23页 |
| ·电激法 | 第23-24页 |
| ·碳化硅纤维介导转化法 | 第24页 |
| ·子房注射法 | 第24页 |
| ·其它方法 | 第24-25页 |
| ·棉花的遗传转化 | 第25-27页 |
| ·影响农杆菌T-DNA转移的因素 | 第27-28页 |
| ·GFP报告基因的利用 | 第28-30页 |
| ·发光机制 | 第29页 |
| ·GFP的应用领域 | 第29-30页 |
| ·植物突变体库创建与功能基因组研究 | 第30-35页 |
| ·植物突变体库的创建 | 第30-33页 |
| ·理化诱变 | 第30-31页 |
| ·植物转座子标签 | 第31-32页 |
| ·农杆菌介导的T-DNA插入突变 | 第32-33页 |
| ·经典的插入突变克隆基因的不足 | 第33页 |
| ·Gene trap技术在植物功能基因组研究中的应用 | 第33-35页 |
| ·本课题的研究目的与意义 | 第35-37页 |
| ·高体细胞胚胎发生能力基因型的筛选 | 第35页 |
| ·棉花体细胞无性系变异的研究 | 第35页 |
| ·农杆菌介导棉花转化体系的优化 | 第35-36页 |
| ·新的转化方法的探讨 | 第36页 |
| ·promoter-trap突变群体的初步研究 | 第36-37页 |
| 第二章 高体细胞胚胎发生能力基因型的筛选 | 第37-48页 |
| ·材料和方法 | 第37-40页 |
| ·品种(系)材料 | 第37-38页 |
| ·方法 | 第38-40页 |
| ·棉花组织培养所用培养基和培养条件 | 第38-39页 |
| ·棉花体细胞再生的培养体系 | 第39页 |
| ·愈伤秤重、形态及细胞学压片观察 | 第39页 |
| ·不同基因型棉花品种(系)的再生能力比较 | 第39-40页 |
| ·数据统计与分析 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-46页 |
| ·不同基因型的愈伤组织诱导 | 第40-41页 |
| ·不同品种(系)的愈伤组织增殖及分化能力比较 | 第41-44页 |
| ·三个棉花品种体细胞发生能力的保持的比较研究 | 第44-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第三章 棉花组织培养中的体细胞无性系变异研究 | 第48-60页 |
| ·试验材料 | 第49页 |
| ·试验方法 | 第49-51页 |
| ·体细胞胚胎发生及植株再生 | 第49页 |
| ·再生植株的倍性分析 | 第49-50页 |
| ·再生植株的细胞学压片 | 第50页 |
| ·再生植株的RAPD多态性研究 | 第50页 |
| ·两种不同激素组合诱导的胚性愈伤组织再生能力的比较 | 第50页 |
| ·两种不同激素组合诱导的胚性愈伤组织的RAPD、SSR多态性研究 | 第50-51页 |
| ·结果分析 | 第51-58页 |
| ·流式细胞仪检测再生植株的倍性 | 第51-52页 |
| ·再生植株的细胞学压片观察 | 第52-53页 |
| ·再生植株的RAPD多态性 | 第53-55页 |
| ·两种激素诱导的愈伤组织再生能力的比较 | 第55页 |
| ·两种激素诱导的胚性愈伤组织的RAPD、SSR多态性研究 | 第55-57页 |
| ·聚类结果分析 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 第四章 农杆菌介导的棉花遗传转化的研究 | 第60-90页 |
| ·农杆菌介导的棉花胚性愈伤组织遗传转化 | 第61-66页 |
| ·试验材料 | 第61页 |
| ·棉花胚性愈伤组织的根癌农杆菌转化体系 | 第61-62页 |
| ·培养基及培养条件 | 第61页 |
| ·转化方法 | 第61-62页 |
| ·转化愈伤及再生植株的分子检测 | 第62-65页 |
| ·基因组DNA抽提(大量法) | 第62-63页 |
| ·小量抽提法(用于PCR扩增) | 第63-64页 |
| ·PCR分析 | 第64页 |
| ·Southern杂交(参照Sambrook,2002进行) | 第64-65页 |
| ·根癌农杆菌转化‘YZ-1’胚性愈伤组织的条件优化 | 第65-66页 |
| ·农杆菌菌株对转化效率的影响 | 第65页 |
| ·农杆菌菌液浓度对转化效率的影响 | 第65页 |
| ·乙酰丁香酮(AS)与农杆菌侵染效率 | 第65页 |
| ·共培养温度与农杆菌侵染 | 第65页 |
| ·共培养时间与农杆菌侵染 | 第65-66页 |
| ·愈伤组织生理状态与农杆菌侵染 | 第66页 |
| ·转基因再生植株的嫁接移栽试验 | 第66-67页 |
| ·普通嫁接 | 第66页 |
| ·试管内嫁接移栽技术 | 第66-67页 |
| ·GFP作为报告基因研究下胚轴为转化受体的棉花遗传转化 | 第67-69页 |
| ·试验材料： | 第67页 |
| ·农杆菌介导的棉花下胚轴遗传转化 | 第67-69页 |
| ·GFP荧光检测 | 第69页 |
| ·转化细胞的生长特性观察及其分化调控 | 第69页 |
| ·结果与分析 | 第69-88页 |
| ·农杆菌转化棉花胚性愈伤组织的参数优化研究 | 第69-73页 |
| ·农杆菌菌株对转化效率的影响 | 第69-70页 |
| ·农杆菌菌液浓度对转化效率的影响 | 第70页 |
| ·乙酰丁香酮对转化效率的影响 | 第70-71页 |
| ·共培养温度对对转化效率的影响 | 第71页 |
| ·共培养时间对转化效率的影响 | 第71-72页 |
| ·愈伤组织生理状态对对转化效率的影响 | 第72-73页 |
| ·农杆菌介导的‘YZ-1’的胚性愈伤组织遗传转化体系的建立 | 第73-74页 |
| ·抗性愈伤组织的PCR鉴定 | 第74-75页 |
| ·转基因再生植株的Southern杂交检测 | 第75-76页 |
| ·转基因再生植株的嫁接移栽技术 | 第76-81页 |
| ·GFP作为报告基因研究下胚轴为转化受体的遗传转化 | 第81-88页 |
| ·GFP的瞬时表达和稳定表达 | 第81-83页 |
| ·转基因愈伤组织的形态结构、生长发育特性研究 | 第83-84页 |
| ·不同基因型的材料遗传转化特性 | 第84-86页 |
| ·GFP转化愈伤的分化调控 | 第86-88页 |
| ·讨论 | 第88-90页 |
| 第五章 棉花胚芽为转化受体的遗传转化 | 第90-99页 |
| ·材料和方法 | 第90-93页 |
| ·材料 | 第90-91页 |
| ·根癌农杆菌和转化载体 | 第91-92页 |
| ·转化方法 | 第92页 |
| ·胚芽的剥离 | 第92页 |
| ·超声波辅助农杆菌转化处理 | 第92页 |
| ·转化及植株再生过程 | 第92页 |
| ·GFP瞬时表达观察 | 第92-93页 |
| ·结果与分析 | 第93-97页 |
| ·超声波辅助的棉花胚芽的遗传转化体系的建立 | 第93-94页 |
| ·不同超声波功率、处理时间对超声波处理效果的影响 | 第94-95页 |
| ·不同的介质对超声波处理效果的影响 | 第95-96页 |
| ·不同的基因型对超声波处理效果的影响 | 第96-97页 |
| ·抗虫基因的SAAT转化 | 第97页 |
| ·讨论 | 第97-99页 |
| 第六章 PROMOTER-TRAPPING突变群体的初步研究 | 第99-113页 |
| ·材料和方法 | 第99-101页 |
| ·品种 | 第99-100页 |
| ·农杆菌菌株和转化载体 | 第100页 |
| ·以胚性愈伤组织为受体的遗传转化 | 第100页 |
| ·转化愈伤及再生植株不同器官的GUS染色 | 第100页 |
| ·再生植株的分子生物学鉴定 | 第100-101页 |
| ·转基因当代材料的农艺性状考察 | 第101页 |
| ·结果与分析 | 第101-110页 |
| ·转基因再生植株的农艺性状考察 | 第101-103页 |
| ·转基因再生植株农艺性状的变异规律 | 第103-104页 |
| ·转基因再生植株的PCR检测 | 第104-105页 |
| ·转基因再生植株的Southern杂交分析 | 第105-106页 |
| ·Promoter-trap T_0代群体GUS检测 | 第106-110页 |
| ·GUS基因在突变群体的表达频率 | 第106页 |
| ·GUS基因在根中的表达模式 | 第106-107页 |
| ·GUS基因在花器官中的表达模式 | 第107页 |
| ·GUS基因在营养器官中的表达模式 | 第107-108页 |
| ·GUS基因在不同体细胞胚胎发育阶段中的表达频率 | 第108-110页 |
| ·讨论 | 第110-113页 |
| 参考文献 | 第113-125页 |
| 附录 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126页 |
