摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-22页 |
1 真菌病毒概况 | 第11-15页 |
·真菌病毒分类现状 | 第11页 |
·真菌病毒的传播特性及相关研究 | 第11-13页 |
·真菌病毒的传播概况 | 第11-12页 |
·影响真菌病毒传播的因子 | 第12页 |
·真菌病毒传播的相关研究 | 第12-13页 |
·真菌病毒对寄主真菌的影响及互作 | 第13-15页 |
2 真菌病毒生物防治应用相关研究 | 第15页 |
3 核盘菌中的真菌病毒 | 第15-20页 |
·核盘菌与菌核病 | 第15-18页 |
·核盘菌分类地位及危害情况 | 第15-16页 |
·核盘菌侵染循环以及致病机理 | 第16-17页 |
·菌核病防治情况 | 第17-18页 |
·核盘菌重寄生真菌盾壳霉 | 第18-19页 |
·盾壳霉概况 | 第18页 |
·盾壳霉在菌核病防治中的应用 | 第18-19页 |
·核盘菌EP-1PN菌株中的SSDRV | 第19-20页 |
·Ep-1PN菌株研究背景 | 第19页 |
·SsDRV对油菜菌核病的生防潜能及存在的问题 | 第19-20页 |
·盾壳霉传播SSDRV的可能性 | 第20页 |
4 农杆菌介导的真菌遗传转化研究进展 | 第20-21页 |
5 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 核盘菌真菌病毒SSDRV基因组CDNA克隆及序列分析 | 第22-35页 |
1 材料和方法 | 第22-27页 |
·材料 | 第22-23页 |
·菌株及培养方法 | 第22页 |
·载体、Race用oligo接头、引物和电泳用分子量标记 | 第22-23页 |
·试剂及培养基 | 第23页 |
·酶及其它药品、试剂 | 第23页 |
·方法 | 第23-27页 |
·Ep-1PN菌株培养和菌丝收集 | 第23-24页 |
·病毒dsRNA的提取 | 第24页 |
·病毒dsRNA样品去DNA处理及回收纯化 | 第24页 |
·通过RACE获得SsDRV5’末端cDNA | 第24-26页 |
·SsDRV5’末端序列测定 | 第26-27页 |
·目的片段的回收纯化和载体连接 | 第26页 |
·热激发大肠杆菌感受态的制备 | 第26页 |
·热击转化和质粒筛选、提取 | 第26-27页 |
·序列拼接及分析 | 第27页 |
2 结果与分析 | 第27-33页 |
·病毒DSRNA提取 | 第27-28页 |
·SSDRV基因组CDNA5’末端RACE | 第28页 |
·SSDRV基因组序列拼接 | 第28页 |
·SSDRV基因组序列推定蛋白质功能分析 | 第28页 |
·SSDRV编码的甲基转移酶、解螺旋酶和RDRP同源性比较 | 第28-33页 |
3.问题和讨论 | 第33-35页 |
第三章 真菌病毒SSDRV侵染性CDNA转化载体构建 | 第35-45页 |
1.材料和方法 | 第35-41页 |
·材料 | 第35-37页 |
·菌株、载体及引物 | 第35-36页 |
·试剂及培养基 | 第36页 |
·试剂盒及抗生素 | 第36-37页 |
·方法 | 第37-41页 |
·全长cDNA阳性克隆的获取 | 第37页 |
·含双trpC启动子的丝状真菌转化载体的构建 | 第37-40页 |
·含重组质粒农杆菌的获取 | 第40页 |
·农杆菌感受态的制备及热击转化 | 第40页 |
·农杆菌质粒的酶切鉴定 | 第40页 |
·农杆菌介导转化盾壳霉 | 第40-41页 |
2.结果与分析 | 第41-43页 |
·SSDRV全长CDNA的获取 | 第41-42页 |
·转化盾壳霉载体构建及鉴定 | 第42页 |
·含重组质粒农杆菌和鉴定 | 第42页 |
·农杆菌介导盾壳霉转化 | 第42-43页 |
3.问题和讨论 | 第43-45页 |
研究展望 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-57页 |
附录1:SSDRV全基因组及编码氨基酸序列 | 第57-61页 |
附录2:已发表的相关论文 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |