摘 要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第一章 绪论 | 第11-57页 |
1. 序言 | 第11页 |
2. 鳗弧菌的特性 | 第11-12页 |
3. 弧菌胞外金属蛋白酶的研究现状 | 第12-18页 |
·弧菌胞外金属蛋白酶为重要的致病因子 | 第12-13页 |
·弧菌胞外蛋白酶在大肠杆菌内表达和加工过程的研究 | 第13-17页 |
·鳗弧菌金属蛋白酶氨基酸结构分析及同源性比较 | 第17-18页 |
4. 蛋白质的转位 | 第18-29页 |
·细菌的细胞膜 | 第18-21页 |
·蛋白质的转位 | 第21-29页 |
5. 重组蛋白在大肠杆菌中的分泌 | 第29-40页 |
·重组蛋白的分泌 | 第29-37页 |
·结论 | 第37-40页 |
6. 本论文的研究目的与意义 | 第40-42页 |
参考文献 | 第42-57页 |
第二章 鳗弧菌金属蛋白酶在大肠杆菌中的表达及其酶活性研究 | 第57-79页 |
1. 前言 | 第57-58页 |
2. 材料和方法 | 第58-67页 |
·材料 | 第58-62页 |
·方法 | 第62-67页 |
3. 结果分析 | 第67-74页 |
·pBAD-VAP 表达载体的鉴定与序列分析 | 第67-72页 |
·重组蛋白(rEmpA)的表达 | 第72-74页 |
·重组蛋白rEmpA 酶活测定 | 第74页 |
4. 讨论 | 第74-76页 |
5. 小结 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-79页 |
第三章 鳗弧菌金属蛋白酶在大肠杆菌中加工与转运的研究.. | 第79-103页 |
1. 前言 | 第79-80页 |
2. 材料和方法 | 第80-85页 |
·材料 | 第80-82页 |
·方法 | 第82-85页 |
3. 结果分析 | 第85-94页 |
·TOP10/pBAD24 或TOP10/pBAD-VAP 诱导后的生长曲线 | 第85-86页 |
·EmpA 加工表达的SDS-PAGE 与Immunoblotting 检测 | 第86-88页 |
·EmpA 在Wt、Sec 缺陷型与△Tat 缺陷型菌株中的表达 | 第88-94页 |
4. 讨论 | 第94-96页 |
5. 小结 | 第96-99页 |
参考文献 | 第99-103页 |
第四章 EmpA 在大肠杆菌中的表达、纯化及重组酶性质研究. | 第103-115页 |
1. 前言 | 第103页 |
2. 材料和方法 | 第103-107页 |
·材料 | 第103-104页 |
·方法 | 第104-107页 |
3. 结果分析 | 第107-112页 |
·重组质粒PCR、酶切鉴定,序列鉴定及分析 | 第107页 |
·重组蛋白酶rEmpA-his 的分离与纯化 | 第107-108页 |
·重组金属蛋白酶rEmpA-his 的酶学性质 | 第108-110页 |
·纯化的重组酶对不同蛋白底物的降解作用 | 第110-112页 |
4. 讨论 | 第112-113页 |
5. 小结 | 第113-114页 |
参考文献 | 第114-115页 |
总结与创新点 | 第115-116页 |
附录 | 第116-126页 |
博士期间发表的论文 | 第126-128页 |
致谢 | 第128页 |