| 致谢 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-7页 |
| 英文摘要 | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-17页 |
| 1 节旋藻形态及分类学的研究进展 | 第12-14页 |
| 2 节旋藻的开发利用概述 | 第14-15页 |
| 3 节旋藻染色体外DNA研究进展 | 第15-17页 |
| 第二章 节旋藻染色体外DNA的种质差异性研究 | 第17-30页 |
| 1 材料与方法 | 第17-20页 |
| ·材料 | 第17页 |
| ·培养条件及形态观察 | 第17页 |
| ·试剂与仪器 | 第17-18页 |
| ·节旋藻生物量及吸收光谱的测定 | 第18页 |
| ·节旋藻exDNA的提取 | 第18-19页 |
| ·DNA浓度测定及电泳检测 | 第19页 |
| ·PCR引物设计与扩增 | 第19-20页 |
| ·PCR产物的克隆及测序 | 第20页 |
| ·序列分析、系统发生树构建 | 第20页 |
| 2 结果与讨论 | 第20-30页 |
| ·钝顶节旋藻的形态学特征 | 第20-21页 |
| ·节旋藻品系间exDNA的比较 | 第21-22页 |
| ·基于16S rRNA基因及ITS序列的种质差异性分析 | 第22-25页 |
| ·16S rRNA基因及ITS序列的基本结构与GC含量分析 | 第22-23页 |
| ·基于16S rRNA基因及ITS序列的差异位点数分析 | 第23-24页 |
| ·基于16S rRNA基因和ITS序列的系统发生树构建 | 第24-25页 |
| ·基于cpcHID操纵子序列的种质差异性分析 | 第25-30页 |
| ·cpcHID操纵子序列的基本结构及GC含量分析 | 第25-26页 |
| ·基于cpcHID操纵子序列的差异位点数分析 | 第26-27页 |
| ·基于cpcHID操纵子序列的系统发生树构建 | 第27-30页 |
| 第三章 节旋藻exDNA的克隆及序列分析 | 第30-51页 |
| 1 材料与方法 | 第30-34页 |
| ·试剂与仪器 | 第30页 |
| ·节旋藻exDNA的回收纯化 | 第30-31页 |
| ·exDNA的克隆策略 | 第31-33页 |
| ·克隆载体的制备 | 第31-32页 |
| ·exDNA直接末端补平克隆 | 第32页 |
| ·exDNA酶切后末端补平克隆 | 第32-33页 |
| ·exDNA超声波处理后末端补平克隆 | 第33页 |
| ·阳性克隆筛选、质粒DNA的分离 | 第33页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第33页 |
| ·序列测定及分析 | 第33-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-48页 |
| ·exDNA的纯化 | 第34页 |
| ·exDNA三种克隆方法的比较 | 第34-36页 |
| ·exDNA直接末端补平克隆 | 第34-35页 |
| ·exDNA酶切后末端补平克隆 | 第35-36页 |
| ·exDNA超声波处理后末端补平克隆 | 第36页 |
| ·exDNA片段的序列测定及拼接 | 第36页 |
| ·exDNA-L片段的结构与功能分析 | 第36-44页 |
| ·exDNA-L1的结构与功能分析 | 第36-41页 |
| ·exDNA-L2的结构与功能分析 | 第41-43页 |
| ·exDNA-L3结构与功能分析 | 第43-44页 |
| ·exDNA-S片段的结构与功能分析 | 第44-48页 |
| ·exDNA-S1 ORF的结构与功能分析 | 第44-46页 |
| ·exDNA-S2 ORF的结构与功能分析 | 第46-48页 |
| 3 讨论 | 第48-51页 |
| 第四章 exDNA-S1-ORF的表达及其产物纯化 | 第51-61页 |
| 1 材料与方法 | 第51-55页 |
| ·试剂与仪器 | 第51-52页 |
| ·蛋白电泳试剂的配制 | 第52页 |
| ·PCR引物设计 | 第52页 |
| ·表达质粒的构建 | 第52-54页 |
| ·目的ORF的诱导表达及电泳鉴定 | 第54页 |
| ·表达产物的纯化 | 第54-55页 |
| ·包涵体的分离及溶解 | 第54页 |
| ·亲和层析 | 第54-55页 |
| ·蛋白的梯度透析 | 第55页 |
| 2 结果与讨论 | 第55-61页 |
| ·表达质粒pET-ORF的构建 | 第55-57页 |
| ·目的蛋白的表达分析 | 第57-58页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第58-61页 |
| 第五章 exDNA-S1-ORF表达产物的抗体制备及免疫学分析 | 第61-69页 |
| 1 材料与方法 | 第61-65页 |
| ·试验动物 | 第61页 |
| ·试剂与仪器 | 第61页 |
| ·抗原的准备 | 第61-62页 |
| ·免疫 | 第62页 |
| ·用于ELISA检测的相关试剂配制 | 第62-63页 |
| ·ELISA测定多抗血清的效价 | 第63页 |
| ·节旋藻可溶性蛋白提取及电泳样品制备 | 第63-64页 |
| ·Western blot(免疫印迹)相关试剂配制 | 第64-65页 |
| ·SDS-PAGE、转膜及杂交 | 第65页 |
| 2 结果与讨论 | 第65-69页 |
| ·抗体的制备及效价测定 | 第65-66页 |
| ·exDNA-S1-ORF在节旋藻体内的表达分析 | 第66-69页 |
| 主要参考文献 | 第69-77页 |
| 研究生期间参与发表的论文 | 第77页 |
