| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-34页 |
| ·细菌蛋白分泌的主要途径 | 第8-12页 |
| ·Sec途径 | 第8-10页 |
| ·Tat途径 | 第10-11页 |
| ·SRP途径 | 第11页 |
| ·三种主要途径的差别 | 第11-12页 |
| ·蛋白经SRP途径的靶向转运 | 第12-30页 |
| ·信号肽 | 第12-13页 |
| ·SRP途径的分子机制 | 第13-17页 |
| ·真核生物SRP途径 | 第13-14页 |
| ·细菌SRP途径 | 第14-15页 |
| ·SRP的保守性 | 第15-17页 |
| ·细菌中SRP的结构与功能 | 第17-20页 |
| ·SRP组分的结构数据 | 第17-18页 |
| ·SRP的核心是动态的 | 第18页 |
| ·M结构域结合靶向信号的结构基础 | 第18-19页 |
| ·细菌SRP对底物的识别 | 第19页 |
| ·SRP调控翻译作用 | 第19-20页 |
| ·SRP受体 | 第20-23页 |
| ·真核细胞SRP受体 | 第20页 |
| ·原核细胞SRP受体 | 第20-23页 |
| ·SRP组分RNA | 第23-24页 |
| ·SRP与其受体的相互作用 | 第24-26页 |
| ·SRP组分也与其他蛋白相互作用 | 第26-27页 |
| ·SRP与靶向信号的相互作用 | 第27页 |
| ·SRP与核糖体以及核糖体新生肽链结合 | 第27-28页 |
| ·GTP在SRP途径中的作用 | 第28-30页 |
| ·链霉菌SRP途径的研究进展 | 第30-31页 |
| ·小结与展望 | 第31-34页 |
| 第二章 材料和方法 | 第34-43页 |
| ·材料 | 第34-36页 |
| ·生物信息学资源 | 第34页 |
| ·实验材料 | 第34-36页 |
| ·质粒和菌株 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器 | 第34-35页 |
| ·培养基和缓冲液 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-43页 |
| ·生物信息学预测和分析方法 | 第36页 |
| ·常规实验方法 | 第36-43页 |
| ·天蓝色链霉菌基因组DNA的提取 | 第36-37页 |
| ·感受态细胞制备 | 第37页 |
| ·细胞转化 | 第37页 |
| ·FtsY和Ffh及其功能域的克隆和测序 | 第37-39页 |
| ·pET15b-NG，pET15b-G，pGEX-4T-2-ftsY表达载体的构建和诱导表达 | 第39页 |
| ·ftsY和ffh基因及其功能域在E.coli中的表达和鉴定 | 第39页 |
| ·亲和纯化表达蛋白 | 第39-40页 |
| ·蛋白含量测定 | 第40-41页 |
| ·GTP水解活性测定 | 第41页 |
| ·GTPase的K_m和V_(max)测定 | 第41页 |
| ·GTP光亲和交联 | 第41页 |
| ·pH对FtsY，Ffh及其功能域GTPase酶活性的影响 | 第41页 |
| ·Mg~(2+)对FtsY，Ffh及其功能域GTPase酶活性的影响 | 第41-42页 |
| ·温度对FtsY，Ffh及其功能域GTPase酶活性的影响 | 第42-43页 |
| 第三章 结果和讨论 | 第43-80页 |
| ·FtsY蛋白的生物信息学分析 | 第43-50页 |
| ·FtsY的理化性质和一级结构分析 | 第43-45页 |
| ·FtsY亲疏水性分析 | 第45页 |
| ·FtsY二级结构分析 | 第45-46页 |
| ·FtsY三级空间结构分析 | 第46-47页 |
| ·FtsY的亚细胞定位 | 第47-48页 |
| ·FtsY蛋白的同源性分析 | 第48-49页 |
| ·FtsY蛋白同源进化树构建 | 第49-50页 |
| ·Ffh蛋白的生物信息学分析 | 第50-57页 |
| ·Ffh的理化性质和一级结构分析 | 第50-51页 |
| ·Ffh亲疏水性分析 | 第51-52页 |
| ·Ffh二级结构分析 | 第52-53页 |
| ·Ffh三级空间结构分析 | 第53-54页 |
| ·Ffh的亚细胞定位 | 第54页 |
| ·Ffh蛋白的同源性分析 | 第54-57页 |
| ·Ffh蛋白同源进化树构建 | 第57页 |
| ·S.coelicolor FtsY和Ffh及其功能域GTPase酶活性的实验研究 | 第57-76页 |
| ·FtsY／Ffh蛋白及其功能域克隆、表达和亲和纯化 | 第58-66页 |
| ·FtsY／Ffh蛋白及其功能域克隆 | 第58-62页 |
| ·FtsY／Ffh蛋白及其功能域表达和亲和纯化 | 第62-66页 |
| ·纯化蛋白含量的测定 | 第66-67页 |
| ·FtsY／Ffh蛋白及其功能域的GTPase酶活性 | 第67-69页 |
| ·FtsY蛋白及其功能域的GTPase酶的K_m和V_(max) | 第69-71页 |
| ·Ffh功能域的GTPase酶的K_m和V_(max) | 第71-72页 |
| ·FtsY蛋白及其功能域GTPase稳定性 | 第72-74页 |
| ·温度对FtsY蛋白及其功能域GTPase酶活性影响 | 第72-73页 |
| ·pH对FtsY蛋白及其功能域GTPase酶活性影响 | 第73页 |
| ·Mg~(2+)对FtsY蛋白及其功能域GTPase酶活性影响 | 第73-74页 |
| ·Ffh-NG和Ffh-G蛋白功能域GTPase稳定性 | 第74-75页 |
| ·温度对Ffh-NG和Ffh-G GTPase酶活性影响 | 第74-75页 |
| ·pH对Ffh蛋白功能域GTPase酶活性影响 | 第75页 |
| ·Mg~(2+)对Ffh功能域GTPase酶活性的影响 | 第75页 |
| ·FtsY／Ffh蛋白及其功能域结合GTP的能力 | 第75-76页 |
| ·讨论 | 第76-80页 |
| 论文独创性声明 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-89页 |
| 发表论文情况 | 第89-90页 |
| 附录 测序报告 | 第90-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
