摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
1 文献综述 | 第10-21页 |
·水稻雌性不育的研究进展 | 第10-11页 |
·水稻雄性不育的研究进展 | 第11-13页 |
·细胞质雄性不育 | 第12-13页 |
·细胞核雄性不育 | 第13页 |
·控制水稻雄蕊发育的关键基因 | 第13-16页 |
·绒毡层及其他壁细胞相关基因与雄性不育 | 第14-15页 |
·胼胝质沉积相关基因与雄性不育 | 第15页 |
·减数分裂相关基因与雄性不育 | 第15页 |
·花药开裂及其他相关基因与雄性不育 | 第15-16页 |
·水稻的图位克隆技术 | 第16-21页 |
·图位克隆技术(map-based cloning)简述 | 第16页 |
·图位克隆的步骤 | 第16-17页 |
·图位克隆技术的应用 | 第17-21页 |
2 材料与方法 | 第21-34页 |
·材料 | 第21-23页 |
·水稻材料 | 第21页 |
·菌株及载体 | 第21页 |
·化学试剂和分子试剂 | 第21页 |
·仪器设备 | 第21-22页 |
·细菌培养基 | 第22页 |
·适用于水稻的培养基 | 第22-23页 |
·方法 | 第23-34页 |
·突变性状的遗传分析 | 第23-24页 |
·新标记的开发 | 第24页 |
·基因的精细定位和遗传作图 | 第24页 |
·候选基因的预测与分析 | 第24-25页 |
·水稻叶片总DNA的提取 | 第25页 |
·水稻材料RNA的提取 | 第25-26页 |
·cDNA第一链的合成及检测 | 第26页 |
·基因干扰片段扩增 | 第26-27页 |
·PCR产物的纯化和回收 | 第27页 |
·基因全长克隆 | 第27-28页 |
·基因干扰中间载体构建 | 第28-29页 |
·植物表达载体构建及检测 | 第29-31页 |
·重组质粒对农杆菌的转化 | 第31-32页 |
·转化子的鉴定和保存 | 第32页 |
·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第32-34页 |
3 结果与分析 | 第34-53页 |
·突变体外观形态 | 第34-35页 |
·突变基因的精细定位 | 第35-36页 |
·候选基因的预测 | 第36-38页 |
·候选基因的克隆及测序分析 | 第38-44页 |
·缺失区间基因分析 | 第44-45页 |
·表达载体的构建 | 第45-51页 |
·互补表达载体 | 第45-47页 |
·过量表达载体的构建 | 第47-48页 |
·反义表达载体的构建 | 第48-50页 |
·RNAi载体的构建 | 第50-51页 |
·含有重组质粒农杆菌阳性克隆的鉴定 | 第51页 |
·农杆菌介导的遗传转化和阳性植株的获得 | 第51-53页 |
4 讨论与结论 | 第53-57页 |
·水稻雌雄不育突变体的形态特征 | 第53页 |
·MDS1基因是一个新的雌雄双不育基因 | 第53-54页 |
·基因定位的群体构建 | 第54页 |
·候选基因确定 | 第54-55页 |
·表达载体的构建及遗传转化 | 第55-56页 |
·后续工作展望 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
致谢 | 第61页 |