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一个水稻雌雄不育突变基因的精细定位及候选基因的克隆

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
1 文献综述第10-21页
   ·水稻雌性不育的研究进展第10-11页
   ·水稻雄性不育的研究进展第11-13页
     ·细胞质雄性不育第12-13页
     ·细胞核雄性不育第13页
   ·控制水稻雄蕊发育的关键基因第13-16页
     ·绒毡层及其他壁细胞相关基因与雄性不育第14-15页
     ·胼胝质沉积相关基因与雄性不育第15页
     ·减数分裂相关基因与雄性不育第15页
     ·花药开裂及其他相关基因与雄性不育第15-16页
   ·水稻的图位克隆技术第16-21页
     ·图位克隆技术(map-based cloning)简述第16页
     ·图位克隆的步骤第16-17页
     ·图位克隆技术的应用第17-21页
2 材料与方法第21-34页
   ·材料第21-23页
     ·水稻材料第21页
     ·菌株及载体第21页
     ·化学试剂和分子试剂第21页
     ·仪器设备第21-22页
     ·细菌培养基第22页
     ·适用于水稻的培养基第22-23页
   ·方法第23-34页
     ·突变性状的遗传分析第23-24页
     ·新标记的开发第24页
     ·基因的精细定位和遗传作图第24页
     ·候选基因的预测与分析第24-25页
     ·水稻叶片总DNA的提取第25页
     ·水稻材料RNA的提取第25-26页
     ·cDNA第一链的合成及检测第26页
     ·基因干扰片段扩增第26-27页
     ·PCR产物的纯化和回收第27页
     ·基因全长克隆第27-28页
     ·基因干扰中间载体构建第28-29页
     ·植物表达载体构建及检测第29-31页
     ·重组质粒对农杆菌的转化第31-32页
     ·转化子的鉴定和保存第32页
     ·农杆菌介导的水稻遗传转化第32-34页
3 结果与分析第34-53页
   ·突变体外观形态第34-35页
   ·突变基因的精细定位第35-36页
   ·候选基因的预测第36-38页
   ·候选基因的克隆及测序分析第38-44页
   ·缺失区间基因分析第44-45页
   ·表达载体的构建第45-51页
     ·互补表达载体第45-47页
     ·过量表达载体的构建第47-48页
     ·反义表达载体的构建第48-50页
     ·RNAi载体的构建第50-51页
     ·含有重组质粒农杆菌阳性克隆的鉴定第51页
   ·农杆菌介导的遗传转化和阳性植株的获得第51-53页
4 讨论与结论第53-57页
   ·水稻雌雄不育突变体的形态特征第53页
   ·MDS1基因是一个新的雌雄双不育基因第53-54页
   ·基因定位的群体构建第54页
   ·候选基因确定第54-55页
   ·表达载体的构建及遗传转化第55-56页
   ·后续工作展望第56-57页
参考文献第57-61页
致谢第61页

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