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利用T-DNA插入突变和RNA干涉技术研究水稻基因功能

第一章 文献综述第1-27页
   ·水稻基因组学研究概述第11-12页
   ·水稻T-DNA插入突变技术研究进展第12-19页
     ·T-DNA插入与基因敲除第14-15页
     ·T-DNA激活标签技术第15-16页
     ·T-DNA捕获标签技术第16-18页
     ·T-DNA插入位点侧翼序列的分离第18-19页
   ·RNA干涉技术研究进展第19-24页
     ·RNA干涉的作用机制第20-21页
     ·RNA干涉的参与因子第21页
     ·RNA干涉的功能和意义第21-22页
     ·RNA干涉技术的特点和方法第22-23页
     ·RNA干涉技术在植物中的应用第23-24页
   ·植物类受体激酶基因研究进展第24-25页
   ·本研究的意义和技术路线第25-27页
第二章 利用T-DNA插入构建水稻增强子捕获突变群体第27-34页
   ·材料与方法第27-29页
     ·水稻转化所用双元载体第27-28页
     ·水稻材料和成熟胚来源的愈伤组织诱导第28页
     ·胚性愈伤组织的转化第28页
     ·潮霉素抗性愈伤组织筛选和植株再生第28-29页
     ·再生植株的PCR和Southern杂交检测第29页
   ·结果第29-33页
     ·水稻遗传转化的效率及其影响因素第29-32页
     ·再生植株的PCR和Southern杂交检测第32-33页
   ·讨论第33-34页
第三章 水稻增强子捕获突变群体的功能分析第34-53页
   ·材料与方法第34-39页
     ·GAL4/VP16-UAS-GUS系统的增强子捕获功能第34-35页
     ·水稻组织的GUS组织化学染色第35页
     ·T-DNA插入位点侧翼序列的分离第35-36页
     ·侧翼序列的测定第36页
     ·侧翼序列的同源性查找和启动子预测第36-37页
     ·预测启动子的功能分析第37-39页
   ·结果第39-49页
     ·T_1代种子和幼苗中GUS基因的表达模式第39-41页
     ·T-DNA侧翼序列的扩增第41-42页
     ·T-DNA侧翼序列的结构分析第42-43页
     ·T-DNA插入位点的分析第43页
     ·启动子的预测和表达模式分析第43-48页
     ·T-DNA插入与GUS染色表型的共分离分析第48-49页
   ·讨论第49-53页
第四章 水稻类受体激酶基因的RNA干涉分析第53-72页
   ·材料与方法第53-59页
     ·水稻用RNA干涉诱导载体和基因过量表达载体的构建第53-55页
     ·类受体激酶基因RNA干涉、过量表达和启动子检测载体的构建第55-56页
     ·稻瘟菌接种第56页
     ·Southern杂交第56-57页
     ·Northern杂交第57-58页
     ·RT-PCR检测第58-59页
   ·结果第59-69页
     ·水稻用RNA干涉诱导载体和基因过量表达载体的构建第59-60页
     ·类受体激酶基因RNA干涉载体的构建第60-61页
     ·稻瘟菌筛选RNA干涉突变体及相应LRR-RLK基因的结构分析第61-63页
     ·RK41基因T_0代RNA干涉植株的Southern和Northern检测第63页
     ·RK41基因T_1代RNA干涉植株的RT-PCR和抗瘟性检测第63-65页
     ·RK41基因过量表达载体的构建第65-66页
     ·RK41基因过量表达植株的RT-PCR和抗瘟性检测第66页
     ·RK41基因表达模式的检测第66-68页
     ·其它LRR-RLK基因的RNA干涉突变体第68-69页
   ·讨论第69-72页
结论及创新点第72-74页
参考文献第74-84页
致谢第84-85页
作者简历第85页

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