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蓝藻NdhO亚基的突变体构建、抗体制备及生理功能分析

目录第1-6页
缩写第6-7页
摘要第7-8页
Abstract第8-10页
第一部分 文献综述第10-26页
 第一章 蓝藻光合NADPH脱氢酶的研究进展第11-25页
  摘要第11-12页
  1. 前言第12页
  2. ndh基因的鉴定第12-14页
  3. NDH-1复合体的鉴定第14-16页
  4. NDH-1复合体的构型第16-17页
  5. NDH-1复合体的生理功能第17-19页
  6. 展望第19页
  7. 本文的研究目的及意义第19-20页
  参考文献第20-25页
 Chapter l第25-26页
第二部分 实验第26-62页
 第二章 利用同源重组构建蓝藻集胞藻6803ndhO基因突变株及其分子鉴定第27-37页
  摘要第27-28页
  1 引言第28页
  2 材料与方法第28-30页
   ·实验材料与培养条件第28-29页
   ·试剂与仪器第29页
   ·集胞藻6803总DNA的提取第29页
   ·同源重组载体的构建第29-30页
   ·集胞藻6803的自然转化和转化子的筛选第30页
   ·突变株的PCR鉴定第30页
   ·突变株的蛋白免疫印迹鉴定第30页
  3 结果第30-34页
   ·同源重组载体pUC-△ndhO的构建第30-31页
   ·集胞藻6803的自然转化和突变株的筛选第31-32页
   ·突变株的分子鉴定第32-34页
  4 讨论第34页
  参考文献第34-37页
 Chapter 2第37-38页
 第三章 集胞藻6803NdhO蛋白多克隆抗体制备及其初步应用第38-50页
  摘要第38-39页
  1 引言第39页
  2 材料与方法第39-43页
   ·实验材料与培养条件第39-40页
   ·试剂与仪器第40页
   ·集胞藻6803总DNA的抽提第40页
   ·引物设计及目的片段扩增第40页
   ·pET32a(+)-ndhO表达质粒的构建第40-41页
   ·融合蛋白的小量诱导表达及溶解性分析第41页
   ·融合蛋白的纯化第41-42页
   ·多克隆抗体的制备及效价测定第42页
   ·集胞藻6803全细胞粗提取液的分离第42页
   ·非变性凝胶电泳第42-43页
   ·蛋白免疫印迹分析第43页
  3 结果第43-47页
   ·PCR扩增目的片段第43页
   ·验证表达质粒pET32a(+)-ndhO第43-44页
   ·融合蛋白pET-NdhO的小量诱导表达第44页
   ·溶解性分析第44页
   ·融合蛋白pET-NdhO的纯化第44-45页
   ·多克隆抗体效价的检测第45页
   ·蛋白免疫印迹分析抗体特异性第45-46页
   ·多克隆抗体的初步应用第46-47页
  4 讨论第47-48页
  参考文献第48-50页
 Chapter 3第50-51页
 第四章 集胞藻6803NdhO亚基的生理功能分析第51-61页
  摘要第51-52页
  1 引言第52-53页
  2 材料与方法第53-54页
   ·细胞培养第53页
   ·试剂与仪器第53页
   ·生长曲线的测定第53页
   ·PQ和P700氧化还原的变化第53-54页
   ·SDS-PAGE、Western及BN-PAGE第54页
  3 结果第54-57页
   ·NdhO亚基的缺失影响了NDH-1介导的围绕PSI的循环电子传递第54-55页
   ·高光下NdhO亚基的缺失改变了细胞的生长速率第55-56页
   ·NdhO亚基的缺失对NDH-1复合体表达及组装的影响第56-57页
  4 讨论第57-58页
  参考文献第58-61页
 Chapter 4第61-62页
致谢第62-63页
附录:硕士期间发表文章第63-65页

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