目录 | 第1-6页 |
缩写 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-26页 |
第一章 蓝藻光合NADPH脱氢酶的研究进展 | 第11-25页 |
摘要 | 第11-12页 |
1. 前言 | 第12页 |
2. ndh基因的鉴定 | 第12-14页 |
3. NDH-1复合体的鉴定 | 第14-16页 |
4. NDH-1复合体的构型 | 第16-17页 |
5. NDH-1复合体的生理功能 | 第17-19页 |
6. 展望 | 第19页 |
7. 本文的研究目的及意义 | 第19-20页 |
参考文献 | 第20-25页 |
Chapter l | 第25-26页 |
第二部分 实验 | 第26-62页 |
第二章 利用同源重组构建蓝藻集胞藻6803ndhO基因突变株及其分子鉴定 | 第27-37页 |
摘要 | 第27-28页 |
1 引言 | 第28页 |
2 材料与方法 | 第28-30页 |
·实验材料与培养条件 | 第28-29页 |
·试剂与仪器 | 第29页 |
·集胞藻6803总DNA的提取 | 第29页 |
·同源重组载体的构建 | 第29-30页 |
·集胞藻6803的自然转化和转化子的筛选 | 第30页 |
·突变株的PCR鉴定 | 第30页 |
·突变株的蛋白免疫印迹鉴定 | 第30页 |
3 结果 | 第30-34页 |
·同源重组载体pUC-△ndhO的构建 | 第30-31页 |
·集胞藻6803的自然转化和突变株的筛选 | 第31-32页 |
·突变株的分子鉴定 | 第32-34页 |
4 讨论 | 第34页 |
参考文献 | 第34-37页 |
Chapter 2 | 第37-38页 |
第三章 集胞藻6803NdhO蛋白多克隆抗体制备及其初步应用 | 第38-50页 |
摘要 | 第38-39页 |
1 引言 | 第39页 |
2 材料与方法 | 第39-43页 |
·实验材料与培养条件 | 第39-40页 |
·试剂与仪器 | 第40页 |
·集胞藻6803总DNA的抽提 | 第40页 |
·引物设计及目的片段扩增 | 第40页 |
·pET32a(+)-ndhO表达质粒的构建 | 第40-41页 |
·融合蛋白的小量诱导表达及溶解性分析 | 第41页 |
·融合蛋白的纯化 | 第41-42页 |
·多克隆抗体的制备及效价测定 | 第42页 |
·集胞藻6803全细胞粗提取液的分离 | 第42页 |
·非变性凝胶电泳 | 第42-43页 |
·蛋白免疫印迹分析 | 第43页 |
3 结果 | 第43-47页 |
·PCR扩增目的片段 | 第43页 |
·验证表达质粒pET32a(+)-ndhO | 第43-44页 |
·融合蛋白pET-NdhO的小量诱导表达 | 第44页 |
·溶解性分析 | 第44页 |
·融合蛋白pET-NdhO的纯化 | 第44-45页 |
·多克隆抗体效价的检测 | 第45页 |
·蛋白免疫印迹分析抗体特异性 | 第45-46页 |
·多克隆抗体的初步应用 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-50页 |
Chapter 3 | 第50-51页 |
第四章 集胞藻6803NdhO亚基的生理功能分析 | 第51-61页 |
摘要 | 第51-52页 |
1 引言 | 第52-53页 |
2 材料与方法 | 第53-54页 |
·细胞培养 | 第53页 |
·试剂与仪器 | 第53页 |
·生长曲线的测定 | 第53页 |
·PQ和P700氧化还原的变化 | 第53-54页 |
·SDS-PAGE、Western及BN-PAGE | 第54页 |
3 结果 | 第54-57页 |
·NdhO亚基的缺失影响了NDH-1介导的围绕PSI的循环电子传递 | 第54-55页 |
·高光下NdhO亚基的缺失改变了细胞的生长速率 | 第55-56页 |
·NdhO亚基的缺失对NDH-1复合体表达及组装的影响 | 第56-57页 |
4 讨论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-61页 |
Chapter 4 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
附录:硕士期间发表文章 | 第63-65页 |