致谢 | 第1-6页 |
中英文对照 | 第6-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
1 前言 | 第11-26页 |
·衣原体生物学进展 | 第11-14页 |
·RNase H 的研究进展 | 第14-24页 |
·RNase H 的分类 | 第14-15页 |
·RNase H 结构与功能的研究进展 | 第15-16页 |
·RNase H 的功能 | 第16-24页 |
·复制过程中DNA滞后链引物的切除 | 第16-18页 |
·DNA 修复功能 | 第18-22页 |
·RNase H 的转录功能 | 第22-23页 |
·逆转录酶的 RNase H 结构域的功能 | 第23-24页 |
·RNase H 的应用 | 第24页 |
·一种独特的DNA扩增方法 | 第24页 |
·设计反义的寡聚脱氧核糖核酸药物 | 第24页 |
·研究病毒的致病机理及抗病毒的药物 | 第24页 |
·课题研究意义 | 第24-26页 |
2 材料与方法 | 第26-32页 |
·材料 | 第26页 |
·衣原体 RNase HⅡ编码基因的克隆、表达及酶的纯化 | 第26-29页 |
·PCR 扩增衣原体RNase HⅡ的编码基因 | 第26-27页 |
·表达质粒pET28aCpRNaseHⅡa 和pET28aCpRNaseHⅡb 的构建 | 第27页 |
·衣原体 RNase HⅡ基因的表达 | 第27页 |
·衣原体 RNase HⅡ的纯化 | 第27-29页 |
·变性Ni-NTA亲和纯化和蛋白质复性 | 第28页 |
·非变性Ni-NTA亲和纯化 | 第28-29页 |
·蛋白含量测定的Bandfird方法 | 第29页 |
·衣原体RNase HⅡ的功能鉴定 | 第29-32页 |
·衣原体 RNase HⅡ底物的制备 | 第29-30页 |
·衣原体 RNase HⅡ活性鉴定 | 第30-31页 |
·金属离子对衣原体RNase HⅡ活性的影响 | 第31页 |
·衣原体RNase HⅡ酶促反应的最适pH值测定 | 第31页 |
·衣原体 RNase HⅡ热稳定性分析 | 第31页 |
·衣原体 RNase HⅡ酶促反应动力学 | 第31-32页 |
·衣原体 RNase HⅡ酶切位点特征 | 第32页 |
·衣原体 RNase HⅡ酶切底物特异性 | 第32页 |
3 结果与分析 | 第32-45页 |
·衣原体 RNase HⅡ的表达 | 第32-34页 |
·衣原体 RNase HⅡ的纯化 | 第34-35页 |
·酶的比活性 | 第35-36页 |
·动力学常数 | 第36页 |
·金属离子依赖性 | 第36-39页 |
·酶促反应的最适pH值 | 第39页 |
·酶的热稳定性分析 | 第39-40页 |
·酶切位点特异性 | 第40-43页 |
·酶切底物特异性 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
·衣原体RNase HⅡ的表达与纯化 | 第45页 |
·衣原体RNase HⅡ的功能鉴定 | 第45-48页 |
5 展望 | 第48-49页 |
·衣原体 RNase HⅡ的晶体结构分析 | 第48-49页 |
·建立新型 SNP 检测技术 | 第49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
附录 | 第57页 |